• Santé - Complexes, Protéine, Anticorps, ADN

[Biologie Moléculaire] Utilisation de la résine Chelex pour reverse crosslink de l'adn

Je recherche quelqu'un qui utiliserait du Chelex pour reverse crosslink des protéines sur l'adn et qui pourrait m'expliquer comment cela fonctionne.  [...] Je l'utilise dans le cadre d'immunoprécipitation de la chromatine, j'en ajoute 100 uL à 10% sur mes échantillons immunoprécipités pour détacher les complexes protéine/anticorps/billes de l'adn. Pour cela je mets le tout à 99°C pendant 10 minutes.  [...]

QCM - Immunoprécipitation

A-Après migration en gel non dénaturant, on identifie la protéine B dans les complexes retenus par l'anticorps anti-protéine A au poids moléculaire de 2kDa.  [...] A partir de là, on ne pourrait pas identifier la protéine C dans les complexes retenus par l'anticorps anti-protéine A puisqu'il n'y aurait plus de complexes formés.  [...]

[Immunologie] immunoprécipitation

Donc avec 1 anticorps tu va piocher ta protéine. Ensuite tu purifie ton complexe anticorps/protéine et tu va regarder si tu as de l'ADN fixé. soit par PCR (si tu cherche une séquence spécifique) ds la CHIP ou soit directement par autoradiographie.  [...] l'immunoprecipitation te permet de purifier la protéine d'interet parmi toute celles synthetisées. Donc ton anticorps reconnait ta protéine, puis en generale tu utilises la proteine A couplée a des billes de sepharose. La proteine A a la propriete de se fixer aux anticorps, et la bille permet de culoter les complexes par centrifugation.  [...]

[Biochimie] retard sur gel

Pourquoi ne pas essayer avec un extrait protéique contenant votre protéine que vous savez active, et de tenter un supershift ou une inhibition avec un anticorps spécifique.  [...] Rien ne garantit que votre protéine, seule, peut se lier à l'ADN (pour avoir pas mal bossé sur des facteurs de transcription, les complexes protéines-ADN ça peut etre réellement compliqué).  [...]

Tabac : un vaccin génétique contre la nicotine pour arrêter de fumer ?

L'intention n'est pas nouvelle. Plusieurs techniques de vaccination ont déjà été proposées mais elles se sont toutes révélées infructueuses. Les premières, considérées comme passives, nécessitaient l'injection en intraveineuse d' anticorps dirigés contre la nicotine.  [...] Les anticorps antinicotiniques séquestrent avec succès la molécule qu'ils ciblent, puisque 83 % de la nicotine retrouvée dans le sang était liée à son immunoglobuline G (la protéine anticorps), soit sept fois plus que chez les animaux témoins. Les complexes immuns ainsi formés sont ensuite métabolisés et excrétés dans les urines.  [...]

protéomique

La technique permet la séparation des protéines et l'obtention de profils très semblable aux profils de gel 2D classique, sauf qu'ici à la place des bandelettes de l'IEF, on utilise un gel 1D (SDS PAGE par exemple), on coupe la bande qui nous intéresse, puis on la fait migré sur un autre gel toujours en 1D.  [...] Il y a plusieurs possibilités. Par exemple on peut déposer des protéines issues de complexes obtenus par EMSA (=gel retard, gel shift). Cela permet de caractériser une interaction protéine-ADN.  [...]

[Génétique] Retard sur gel

Ou alors comme tu dis un autre facteur de transcription à la place de la protéines couplé au FT. Mais dans ce cas dans les deux FT il y aurait un activateur et un inhibiteur car je vois pas l'intéret de 2 activateurs ou inhibiteurs si ils se marche dessus.  [...] 3 bandes c'est un ADN nu + 2 complexes ADN-proteines (le poid de la proteine est different).  [...]

Succès pour la biologie synthétique : des protéines créées in vitro

Les auteurs ont créé un système de production de complexes protéiques. Pour se faire, ils ont tout d'abord attaché de l'ADN à une puce à ADN (champ en rouge à gauche). Deux types d'ADN sont utilisés. l'un code pour une protéine fluorescente verte (GFP, cylindres verts) et l'autre pour une protéine fluorescente rouge (mCherry, cylindres violets).  [...] Les protéines sont synthétisées in vitro (grâce aux ribosomes symbolisés en jaune) et s'accrochent sur des anticorps spécifiques (en forme de Y) qui ont préalablement été attachés sur les autres régions de la puce. Yael Heyman et al., Nature Nanotechnology.  [...]

[Biologie Cellulaire] p53 : apoptose, sénescence

La protéine p53 est un facteur de transcription instable. malgré une synthèse continue, elle est sans doute trop peu abondante dans une cellule normale pour avoir un effet significatif.  [...] L'élévation de la concentration de p53 a d'abord comme effet d'activer l'expression de la protéine Cip-1, inhibitrice de l'activité kinase des Cdk. les complexes cycline.Cdk sont inhibé. la mitose est bloquée à la transition entre les phases G1 et S, ou G2 et M, laissant à la cellule le temps de réparer l'ADN avant de poursuivre le cycle cellulaire.  [...]

ADN et proteine

Je détail ma question... ma correction indique que c'es vrai. mais le cours indique que l'adn est lié aux proteines histones sauf au moment de la réplication & transcription, qui font partie du cycle cellulaire... donc c'est contradictoire.  [...] Oui ça reste lié parce que ce sont l'ADN polymérase/ARN polymérase qui réalisent la réplication/transcription de l'ADN respectivement et que ces complexes sont des protéines donc par définition l'ADN est lié à des protéines durant ces processus.  [...]