• Santé - Coloration, Molécule, Protéines

[Biochimie] molécule, cellule et atomes

en fait une cellule est bien un assemblage de molécule (ex. membrane formée de lipides ou de protéines) mais il existe dans la cellule des molécules en liberté (par exemple une protéine). Avec un microscope phosphrescent on peut voir en particulier UNE molécule dans la cellule (cela peut très bien être l'ADN qui est une molécule après coloration).  [...] ben oui c'est ça, plusieurs atomes reliés entre eux forment 1 molécule qui avec plusieurs autres molécules forment 1 cellules. Mais attention le terme molécule est général. une protéine est une molécule, l'eau est une molécule, l'adn est une molécule.  [...]

[Biochimie] Purification de la beta-gal

On mélange avec le cône du Pipetman et on note l'intensité de la coloration caractéristique du nombre de molécule de bleu de Comassie liées avec les protéines.  [...] C'est ici que je bloque un peu... pour les fractions 1, 2, et 2 j'ai pas de coloration bleu (ça veut dire que j'ai pas de protéine mais bizard parce-que je suis censé avoir des protéines chargées + et neutres... donc je vois pas trop comment interpréter ce résultat).  [...]

[Biologie Moléculaire] Molécule coloration ADN / électroporation / levure

Je cherche une molécule qui, lorsqu'elle arrive à pénétrer dans une cellule, produit une coloration (pas de fluorescence, quelque chose de visible ou de mesurable par simple photo ou spectrophotométrie).  [...] Une protéine fusion avec un DNA biding domain, et un domaine actif enzymatique (de type Beta-Gal)... Une fois l'électroporation terminé, il suffit d'y ajouter le substrat (X-Gal ou ONPG).. et paf une simple lecture au spectro. Seule difficulté mettre au point la protéine fusion.  [...]

GFP : le Nobel de chimie 2008 pour une protéine fluorescente

Dès les débuts de la microscopie, les biologistes ont constaté l'importance de la coloration pour rendre visibles les structures cellulaires, qui, à l'état naturel, sont transparentes sous l' oeil du microscope. Un homme de l'art sait utiliser les bonnes molécules pour colorer ce qu'il veut observer, membrane cellulaire, protéines, sucres, graisses, ADN, tumeurs, etc.  [...] Ce cnidaire utilise deux molécules, l'une (baptisée aequorine) émettant une lumière bleue (395 nanomètres étant l'idéal) qui excite la seconde, la GFP, petite protéine de 238 acides aminés, laquelle réémet une lumière verte (508 nanomètres). Ses résultats sont publiés en 1962 mais la GFP n'éveille pas tout de suite l'intérêt des biologistes.  [...]

[Biologie Cellulaire] Contrôler la pureté des protéines

Puis pour verifier la purete je ferais sur un gel d un cote une coloration au bleu de coomassie qui va colorer toute tes proteines et de l'autre un western blot avec des anticorps diriges contre la proteine que tu veux.. puis tu compare les 2 gels.  [...] C'est très pratique pour isoler spécifiquement une protéine car sur une électrophorèse SDS PAGE classique, seule la masse moléculaire est discriminante donc lorsque tu fais une coloration de ta membrane en rouge ponceau, tu observes une multitude de bandes et chaque bande correspond à de nombreuses protéines différentes.  [...]

[Biologie Moléculaire] Vérification transfert W.Blot

En fait quand on fait un western, on part du principe que pour des proteines de taille standard, si elle ne sont plus dans le gel apres transfert et coloration au bleu de coomassie, alors elles sont sur la membrane. Ceci est vrai si la polarité a été respectée durant le transfert, sinon les protéines sont dans le tampon et pas sur la membrane (mais dans ce cas, ce sont toutes les protéines).  [...] Un autre test a faire est de colorer la membrane apres transfert au rouge ponceau (coloration transitoire qui disparait apres lavage dans de l'eau ou du PBS). Ceci te permet de vérifier que des protéines ont bien été transférées sur la membrane, de manière homogène, et qu'il n'y avait pas de bulles d'air.  [...]

Révélation protéines au AgNO3

Voici ce que j'ai trouvé. Etant mille fois plus sensible que le bleu de coomassie, la coloration au nitrate d'argent permet de détecter des spots contenant 0,1 ng de protéines. Elle présente néanmoins certains inconvénients. la stSchiométrie de la coloration n'est pas totalement linéaire, la reproductibilité est difficile à obtenir et certaines protéines sont peu ou pas colorées par cette méthode.  [...] pour la linéarité. les colorations au nitrate d'argent sont sensibles, mais dépendent de la composition en acide aminés et donc ne sont pas linéaires. On ne peut pas utiliser cette méthode pour comparer des concentrations de protéines.  [...]

[Biochimie] Chromatographie d'exclusion sur colonne !

Après coloration par la méthode de Bradford (bleu de Comassie se colore en bleu en présence de protéines dans une solution acide) et mesure de l'absorbance du complexe formé à 600nm. on observe un pic d'absorbance pour la thyroglobuline et un pic pour le cytochrome C.  [...] Après coloration par la méthode de Bradford (bleu de Comassie se colore en bleu en présence de protéines dans une solution acide) et mesure de l'absorbance du complexe formé à 595 nm.  [...]

[Biochimie] test bradford et acides nucléiques

ainsi, dans ma solution protéique on observe bien une coloration bleue. Cependant, on observe également une légère teinte bleue au niveau de ma solution d'acides nucléiques. Par conséquent j'aurai souhaité savoir quels protéines pourraient être associées à ces acides et dont présentes dans ma solution.  [...] les acides nuléiques peuvent être associés à des histones, ils ont surement été purifiés avant et c'est pour celà qe t'as une légère coloration peu intense, c'est les protéines qui subsistent aprés purif (enfin je crois, si je me trompe, d'autres le rectifiront surement).  [...]

western blot

D'où déjà, nous avons pense au fait que le transfert total des protéines par semi-dry n'a pas eu lieu. Or nous avons observe le transfert partiel du marqueur. De ce fait nous avons utilise le gel transféré et avons refait le transfert par semi-dry et nous observons un transfert total.  [...] J'aimerais savoir comment faire pour transférer toutes mes protéines par semi- dry Est ce que le colorant (simple blue) a un effet sur le transfert total des protéines pour un semi-dry.  [...]