• Santé - Coloration, Enzyme, Substrat

Révélation enzyme au ROUGE CONGO

J'aimerais comprendre le principe de la révélation du rouge congo, sur quel groupement il se fixe et dans quels conditions, pourquoi telle ou telle enzyme se révèle mieux etc.  [...] Enfaite on utilise le rouge congo pour colorer le substrat qu'utilise notre enzyme. Là où il n'y a pas de coloration c'est l'endroit où l'enzyme a travaillé et a dégradé le substrat.  [...]

problème avec kit ELISA

- autre problème. Je fais un blanc, sans apport de la protéine à doser. Malgré ça à la dernière étape, lorsque j'apporte le substrat de l'enzyme, j'ai une coloration et pas des moindre.  [...] Etant donnée la faible concentration de la protéine à la dernière dilution (quelques ng/ml) je me demande si elle ne se fixe pas sur les parois du verre car il y a des puits où je ne détecte rien. Donc je me dis qu'il faut peut etre mettre de la BSA.   [...]

[Biochimie] rôle du blanc reactif et du blanc echantillon

Voilà j'ai un exercice à faire en Biochimie et j'ai un doute entre le rôle du blanc réactif et le rôle du blanc échantillon. Pourquoi ne pas en utiliser qu'un seul A quoi servent-ils exactement Je ne comprend pas très bien.   [...] Par exemple, si en présence du réactif R et de ton échantillon tu t'attends à une variation de la coloration de l'échantillon par la réaction enzymatique X (catalysée par R), tu dois d'abord t'assurer que ton enzyme R dans un milieu dépourvu de substrats n'induise pas, seule, une coloration et inversement, que ton substrat présent dans ton échantillon ne soit pas autocatalysé.  [...]

exercice: enzymes dans la lessive

Tube 3. l'interface entre la solution d'enzyme et la gélatine est descendue + bas et en mm tps le colorant est libéré et on obtient une coloration de la phase liquide.  [...] j'ai pas bien compris pour les couleurs.en fait moi j'avais marqué que.tube 1 et 2. pas d'enzymes donc pas de dégradation de la protéine.  [...]

[Biologie Moléculaire] Gène0 AOX1!!

2) Insertion du promoteur dans le plasmide et reapariment de base car notre enzyme de restriction est spécifique et a couper notre fragment au bon endroit.  [...] - Coloration à l'aide de l'opéron lactose, qui en présence d'un inducteur, le gène lac Z code pour une b- galactosidase qui a pour substrat le X- gal, lorsque ce dernier est clivé il libére la coloration bleue...l'introduction du gène d'intérêt va inactiver ce gène de b- galactosidase.  [...]

[Biotechnologie] beta galactosidase

Quand on utilise le gène de la beta gal comme gène rapporteur in vivo chez l'animal par exemple, quel est le substrat qui donne la couleur bleueEst-il endogène et peut visualiser la coloration in vivo ou faut-il faire une biopsie et mettre les cellules en contact avec le substrat ex vivo pour visualier les cellules transduites... Merci d'avance.  [...] Oui pardon, ils je ne sais pas qui sais mais c'est sur une présentation d'un de mes cours, et oui dans ce cas préis c'était sur l'homme, puisqu'il s'agissait d'un essai de phase clinique, mais le doute a surgi en moi et j'ai élargi la question à l'utilisation de ce gène rapporteur in vivo.   [...]

[Microbiologie] enzymes

Ensuite, une enzyme est spécifique à un substrat, elle ne catalyse qu'une seule réaction chimique par la reconnaissance de son substrat. Par exemple, ton amylase salivaire va degrader les polymeres glucidiques (tu as du faire le test avec de l'empois d'amidon non).  [...] - si tu mets ton enzyme amylase salivaire dans le même tube, la coloration sera évidente très rapidement (peut être avec un petit chauffage).  [...]

Purification et extraction des protéines....

OK j'avais mal compris la question. C'est la protéine qui a des capacités de réduction des ponts s-s. Dans ces conditions, votre idée est bonne et la mettre en Suvre n'est pas trop difficile en plus. Vous avez votre insuline, vous la mettez en présence de votre enzyme d'un coté et en présence de DTT d'un autre, et enfin en présence de l'enzyme + DTT.  [...] Vous éliminez votre enzyme sur colonne NiTA, vous concentrez le tout et vous déposez dans un gel non dénaturant puis coloration au coomassie. Vous montrerez ainsi qu'en présence de l'enzyme + DTT l'insuline est décomposée en ses 2 sous-unités (pourrait être démontré en faisant un WB avec des Ig dirigés contre l'une et l'autre d'entre elles).  [...]

[Biochimie] calcul activité enzymatique

On réaliser une mesure enzymatique de chaque fraction en introduisant 10 µL d'enzyme avec du pnitrophenyl acetate comme substrat du pnitrophénol se forme.  [...] c'est une enzyme capable de cliver le meme substrat que l'esterase mais qui est éluée à une concentration en sel superieure à celle de l'esterase.  [...]

Conséquence de la concentration d'un tampon électrophorèse sur l'intensité

Le kit utilisé permet simplement de montrer l'action des enzymes de restriction aux élèves de terminales S. L'alimentation utilisée est, selon le fournisseur, étudiée spécialement pour réaliser ce type de gels. J'imagine donc que c'est un problème de tampon.  [...] Si je me souviens bien, quand on digère de l'ADN génomique par une enzyme de restriction, on obtient une traînée (ou smear en anglais) après l'électrophorèse et coloration du gel.  [...]