• Santé - Clonage, Fragment, ADN

[Génétique] clonage

est ce que on peut changer gène de résistance par fragment d'adn dans le clonage.  [...] il va falloir être un peu plus precis... ca n'a pas de sens en l'état.   [...]

Clonage dans un vecteur

bonjour. je voudrais savoir comment peut-on augmenter l'efficacité du clonage des fragment d'ADN d souris dans les vecteurs.  [...] Merci de ne pas poster plusieurs fois le meme messages a des endroits différents et de créer une discussion spécifique plutot que de poster vos messages dans des discussions sans rapport. Yoyo.   [...]

[Biologie Moléculaire] [biologie moleculaire] Le code génétique

Tu oublies que la plupart des gènes et des protéines avec lesquels nous travaillons (enfin du moins moi) sont issus d'un clonage à partir de la protéine (séquençage de la protéine puis recherche du gène). Si un système à 4 bases par codon existait, il y aurait eu un bug dans cette méthode.  [...] 1. recherche d'homologie -. 2. clonage du fragment d'ADN cense contenir le gene -. 3. analyse de l'expression de ce gene (deletion, expression etc..).  [...]

[Divers] clonage et maths

Personnellement, je trouve que faire une expérience en lien avec le clonage humain est quelque chose de très délicat quand on a 16 ans (et quand on a davantage, d'ailleurs.). Le problème avec le clonage est qu'il faut être un spécialiste de la question pour en faire et ne pas être radin, parce que c'est extrêmement coûteux.  [...] Une chose intéressante peut survenir pour vous au moment où l'on fait migrer nos fragments pour diverses vérifications. On les fait migrer dans un gel d'agarose en principe et la migration se fait non pas en fonction de la taille des fragments mais du log de la taille des fragments.  [...]

Définition | Plasmide | Futura Santé

Un plasmide est une molécule d' ADN circulaire naturelle ou modifiée artificiellement dans le but de l'utiliser en recherche biologique.  [...] Les chercheurs utilisent les plasmides pour y insérer un fragment d'ADN d'intérêt, grâce aux cassettes de clonage. Ils peuvent ainsi cloner des gènes, afin d'exprimer les protéines ou les ARN et les analyser.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de clonage

J'essaie en vain de cloner en quantité suffisante un fragment ADN pour mon stage de M2. Le soucis est que lors de mon clonage (préculture et culture), la DO est bonne mais quand on dose la quantité d'ADN plasmidique, elle est très faible et très variable (de 10 à 300 ng/µL).  [...] Si ta DO est correcte et que tu n'as pas de contaminations il faudrait peut être deja voir comment améliorer l'extraction En général dans les kits tu peux modifier les volumes selon si tu es en high copy ou low copy... J'essaierais avec les conditions de low copy.   [...]

[Biologie Moléculaire] clonage petit fragment d'ADN

après criblage j'obtiens des clones mais une PCR à l'aide d'amorces spécifiques de mon fragment montre qu'il n'y a pas d'insert dans le plasmide.  [...] Sinon une purification sur gel après la digestion peut permettre de savoir si la digestion a bien eu lieue (mettre le produit non digéré et digéré sur un grand gel d'agarose 2% que tu fait migrer sur la nuit a ~ 60 V ça permet d'avoir une assez bonne résolution pour les fragments de cette taille).  [...]

[Génétique] marche sur le chromosome

J'aurais aimé savoir si quelqu'un pourrait m'expliquer en quoi consiste et comment on effectue la marche sur le chromosome lors du clonage positionnel. J'ai trouvé des choses sur le net mais je ne comprends toujours pas comment on procède.  [...] Dites moi si j'ai bien compris. on cherche à mettre bout à bout des fragments d'adn ( BAC, YAC..) jusqu'au moment de trouver un fragment qui contiennent les 2 marqueurs chromosomiques et le gène muté. On peut donc de cette manière restreindre la partie contenant le gene à un BAC ou YAC ce qui facilitera la prochaine étape du clonage positionel.  [...]

[Biotechnologie] Principe de la PCR

notamment en quelques heures le clonage acellulaire d'un fragment d'ADN grâce à un système automatisé, alors qu'il faut plusieurs jours avec.  [...] Sur des systèmes automatisés, on utilise aujourd'hui un analyseur de fragment. Cet appareillage utilise le principe de l'électrophorèse capillaire.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de ligation

LA seule solution trouver est de sous cloner ton fragment dans un plasmide (genre pBC-SK) à un site franc. C'est simple et rapide car tu as une selection bleu /banc. Ensuite tu ressors ton insert par HindIII et tu le clones dans ton plasmide final.  [...] Refait le clonage à partir de ton fragment sorti de PCRTopo mais sans déphosphorylé ton plasmide. La CIP ou la shkink abime parfois les extrémités de l'ADN rendant impossible toute ligation.  [...]