• Santé - Cellules, Tampon, Phosphate

extraction ADN et tampon phosphate

Bonjour à tous, si on veut extraire de l'ADN des cellules, une des premières étapes est de prendre ces cellules auxquelles on ajoute un tampon phosphate et des les centrifuger. J'aurais voulu savoir à quoi servait ce tampon phosphate merci d'avance.  [...] C'est surtout pour conserver des conditions physiologiques en terme de concentrations ioniques je pense.   [...]

Lavage par un tampon PBS

Le PBS est considéré comme une solution physiologique (c'est à dire que le pH, l'osmolarité, la force ionique... sont proches de ceux du vivant). Le PBS, le plasma et la plupart des cellules ont une osmolarité proche de 300 mOsm/L.  [...] et puis le flux d'eau a l'intérieur de la cellule ça m'étonnerait, sinon cellules u937 c'est une lignée de cellules tumorales(leucémie)je crois en tout cas merci pour ta réponse.  [...]

Quantité d’ATP dans le corps humain et coup de gueule

- le dosage en lui-même, puisque si on souhaite doser les nucléotides (absorbance dans l'UV ), il se peut qu'on dose aussi de l'ADP, de l'AMP, voire des oligo-ARN, etc, et doser les phosphates n'est pas très parlant puisqu'il existe de nombreux P i libres dans le milieu intracellulaire, sans oublier qu'on a un à trois phosphates par nucléotide.  [...] Une bonne méthode consisterait à faire croître des cellules à partir d'un substrat où 100% du phosphate serait radioactif (attention à la casse quand même), puis laver les cellules avec un tampon non radioactif et pouvoir immédiatement après doser le volume total en phosphate de cette cellule par rayonnement.  [...]

[Biochimie] Protocole de purification d'une protéine, vos avis

On introduit un volume de tampon phosphate à notre solution de protéine afin que la protéine soit chargée négativement et qu'elle adhère au support de DEAE-cellulose chargée positivement.  [...] on réalise l'élution Elution des protéines non retenues par le support avec une solution tampon phosphate (on m'a parlé de pH décroissant ).  [...]

[Biologie Cellulaire] Fractionnement cellulaire

Tube 1. cyanure + succinate + cytochrome c oxydé + tampon phosphate (tube témoin du milieu réactionnel sans mitochondries).  [...] Tube 2. cyanure + succinate + cytochrome + tampon phosphate + fraction mitochondries.  [...]

[Biochimie] Malachite Green Phosphate Assay kit, avez vous déjà utilisé ce kit?

Je travaille sur une protéine qui hydrolyse le phosphate, il s'agit d'une actine like... je dois trouver une méthode pour doser le phosphate au cours du temps... mon plus gros souci c'est que ma protéine polymérise en un cart de tour est pour arriver à la purifier sous forme stable (mais pas longtemps.  [...] .) il faut impérativement ajouter de l'ADP (donc du phosphate) dans le tampon de cassage des cellules et celui de purification.  [...]

[Biochimie] Protocole de TP un peu flou

Donc préparer une telle solution. 10ml d'une solution de Phe (10mM) dans le tampon phosphate 10mM.  [...] Reviendrai à. Prélever 2ml de la solution de Phe, puis l'introduire dans une fiole jaugée de 10ml et de compléter le volume jusqu'au trait de jauge avec la solution de tampon phosphate.  [...]

colonne de Nickel et Tampon phosphate

mon problème est que dans ce tampon ma prot ne supporte pas la concentration avant chrommato d'exclusion, elle perd enorémént d'activité. dans la littérature j'ai trouvé que cette prot recombinante (venant d'autres organismes mais présentant un fort pourcentage d'identié avec la mienne) se concentre bien en tampon phosphate.  [...] PS. Ma prot n'aime pas beaucoup la dialyse non plus, c'est pour cela que je voudrais travailler en tampon phosphate dès le départ.  [...]

[Microbiologie] tampon phosphate

Pour une solution tampon à pH 5 je te conseil plutôt un tampon acetate (mélange d'acide acitique et d'acetate de sodium) avec la même logique de mélanger les deux au pHmètre.  [...] Et il suffit d'une minute de google pour soit trouver un protocole pour préparer un tampon, soit pour se rendre compte que ça n'est pas une bonne idée. Au moins je l'aurais mis sur la voie.  [...]

[Biochimie] SDS page

et pourquoi tu n'a pas commencer deja par une extraction des protéines totales avec le tampon phosphate.  [...] le tampon phosphate permet l'extraction des protéine totales d'une poudre vegetale, au moin tu sera sure de l'existance de votres protéines, en plus c'est un protocol trés simple.  [...]