• Santé - Cellules, Résistance, Sensibilité

Screening avec librairie d'ARNg + cas9

On fait ensuite un séquencage du génome des cellules cancéreuses survivantes pour voir si certains ARNg seraient plus ou moins présents que d'autres afin d'en déduire l'importance de certains gènes dans la résistance ou la sensibilité à la destruction des lymphocytes T spécifiques des tumeurs.  [...] En gros l'idée c'est que tout se fait dans un seul tube, le seul truc pour que ce soit valide c'est de s'assurer d'avoir 400 cellules par gRNA pour faire en sorte que statistiquement 1 seul gRNA soit transduit par cellule. Ensuite il s'agit de mesurer l'enrichissement ou la déplétion de certains gRNA dans la population de cellules, synonyme de résistance ou de sensibilité respectivement.  [...]

Plasmide recombinant

On selectionne deja sur la résistance les cellules portant le plasmide. On a donc dans le lot des cellules qui portent le plasmide et des cellules qui ont recombiné. Ce que l'on veut maintenant c'est n'avoir plus que les cellules qui ont recombinées. Du coup on va les tester avec le gène de sensibilité à l'antibiotique.  [...] Si le gène est encore sur le plasmide, elles sont sensibles et meurent. Si il est recombiné, les cellules ne sont pas sensibles à l'antibiotique et résistent.  [...]

Mutagenèse dirigée : un Nobel pour des souris mutantes

La construction des fragments d'ADN injectés dans la cellule a alors été pensée pour permettre une sélection en deux temps. En plus du gène muté, on ajoute un gène de résistance à un antibiotique (appelé cassette NEO, il confère une résistance à la néomycine), ainsi qu'une cassette TK (TK pour thymidine kinase, confère une sensibilité au gancyclovir).  [...] Le gène de résistance sert à trouver les cellules qui ont bien reçu le transgène. les cellules sans transgène meurent en présence de néomycine (figure 1). Ainsi on pourra les laisser se multiplier et augmenter les chances de survenue de la double recombinaison.  [...]

Mutagenèse mercure

ca te permettra aussi de savoir quelles doses utiliser. Cependant il faut faire attention qu'idéalement tu souhaites 1 mutation par cellule ce qui est faible donc faut pas non plus faire une trop forte mutagenese sinon il est impossible de trouver le gene apres.  [...] Apres mutagenese tu etales tes bacteries sur un milieu contenant une dose lethale de mercure (attention c'est toxique) et tu espere que quelques clones vont resister. Ensuite il y a la batterie de tests a faire pour savoir si ces mutants ont un phénotype dominant ou recessif par rapport au sauvage.  [...]

Diabète : les cellules de la graisse ont besoin de sommeil

Tout le temps de l'expérimentation leur alimentation a été contrôlée de façon à rester identique dans les différentes situations. À la fin, un test de résistance au glucose a été mené afin de déterminer la sensibilité du corps à l' insuline.  [...] Ces écarts sont tout à fait analogues à ce que l'on observe quand on compare la sensibilité à l'insuline des cellules adipeuses d'une personne mince avec une autre obèse ou d'un patient diabétique avec un individu ne présentant pas la pathologie.  [...]

bactéries

1°) Quel est le constituant cellulaire (ribosomes, chromosomes, autres constituants du cytoplame,...) des bactéries résistantes responsable de transformation (ex. bactéries résistantes (tuées) contaminent les bactéries sensibles).  [...] 2°) De quoi dépend la sensibilité ou la résistance d'une bactérie à un antibiotique.  [...]

[Génétique] [M1] Résistance des levures au 5-fluoro-uracile

en TP nous avons étudié la résistance de 6 souches de levures au 5-fluoro-uracile (un analogue toxique de l'uracile), sur 7 boîtes, chacune avec une concentration différente en 5FU (de 0M à 5. 10^-4M). Le but étant d'estimer à quel niveau de la voie de biosynthèse des pyrimidines chaque souche est mutée (la mutation entrainant la résistance = absence de sensibilité au 5-FU).  [...] Nous avons utilisé, selon les groupes, soit du milieu complet, soit du milieu minimum, pour couler les boîtes. Et nous avons étudié la croissance (ou arrêt de croissance) selon les souches et les concentrations en 5FU.   [...]

[Biologie Cellulaire] adaptation protocole confocal à cytométrie en flux

il faut tester, des cellules en suspension n'auront peut être pas la meme sensibilité que des cellules adhérentes. A mon avis la meilleure méthode c'est de perméabiliser et de faire les marquages apres avoir détaché les cellules.  [...] - De plus comme je viens de le dire pour obtenir un marquage spécifique dans mon modèle cellulaire, je dois réaliser de nombreux lavage avec du PBS + détergent (pour déstabiliser les liaisons non spécifique) pensez vous que cela soit compatible avec la cytométrie en flux, j'ai un peu peur que les manipulation successive des cellules ne les abîmes trop et les rendent inexploitables.  [...]

[Divers] resistance pesticide

La meilleure alternative consisterait à utiliser un troisième produit et d'utiliser 2+3, afin de faire baisser les résistants à 1 en évitant l'apparition de résistance à 2 ou à 3.  [...] Mais il existe aussi l'inverse. la résistance à une famille confère une grande sensibilité à un autre produit. C'est un cas très rare (dommage.) mais bien connu pour certains fongicides par exemple.  [...]

[Biochimie] Glycémie

Ou alors c'est parce qu'il a une insulinorésistance (c'est-a-dire que les récepteurs a insuline sont insensible a cette dernière), car il existe un autre facteur d'hyperglycémie, notamment chez le diabétique de type 2, qui est une moindre sensibilité des cellules vis à vis de l'insuline, c'est surement ça.  [...] ah je suis bette j'ai vu ça dans mon cours c'est parce qu'il a une insulinorésistance (c'est-a-dire que les récepteurs a insuline sont insensible a cette dernière), car il existe un autre facteur d'hyperglycémie, notamment chez le diabétique de type 2, qui est une moindre sensibilité des cellules vis à vis de l'insuline, c'est surement ça.  [...]