• Santé - Cellules, Protéines, Culture

Radioactivité (.. ?? ..)

Puis on ns dit. On met en culture des cellules normales et des cellules énuclées. On ajoute au milieu de culture un acide aminé radioactif. Les cellules sont ensuite lavées (élimination des acides aminés radioactifs non incorporés dans les protéines) puis photographiées par une technique permettant de localiser la radioactivité, qui apparaît sous forme de points noirs (autoradiographie).  [...] Déterminez le lieu de la synthèse des protéines à partir de l'exploitation des résultats expérimentaux présentés ci joint.  [...]

[Biochimie] western surnageant culture

je souhaiterais avoir des renseignements afin de détecter par western blot une protéine contenue dans le milieu de culture de cellules. Faut-il concentrer (précipitation, ultracentri, chromato,...) les protéines présentes dans le surnageant de la culture Comment procéder.  [...] Sinon sur ce forum, Gorben parle souvent d'une précipitation au TCA qui permet de concentrer les protéines. Ca devrait aussi pouvoir vous intéresser.  [...]

[Biologie Cellulaire] Endocytose d'une protéine

Deux protéines A et B marquées à l'125I peuvent pénétrer dans les cellules en culture, bien que leur membrane plasmique ne possède aucun système de transport transmembranaire spécifique de ces substances. Quels seraient les mécanismes possibles d'internalisation de ces protéines.  [...] Non spécifique. j'approuve. Mais je ne sais pas si une protéine puisse être internalisée par ce mécanisme puisqu'il ne permet que d'ingérer de petites gouttelette (de lipides par exemple) ou des liquides extracellulaires. Les protéines ne sont-elles pas trop grosses.  [...]

[Biologie Cellulaire] Expression des protéines

1. Quand les cellules commencent à exprimer les protéines dans un milieu de culture ( surtout les protéines mitochondriales et celles de la matrice extracellulaire pour les myotubes, lignée C2C12 ) je crois après 48h mais je voudrai confirmer cette infromation.  [...] En fait ce que je pense à faire est. une inhibition exogène par un anticorps dans un premier lieu et une induction exogène par une protéine recombinante pour voir les variations de mes protéines d'intérêt ( mitochondriales + MEC).  [...]

cytologie

pour les selectines je crois que c'est des protéines transmembranaires,elles interviennent dans. l'inhibition de contact (Dans une boite de culture, on remarque que les cellules arretent de proliférer lorsque toute la surface de la boite est remplie. Cela signifie qu'un méssage peut passer de cellules en cellules afin de stoper la prolifération, ce message est envoyé par les selectine),  [...] Ces proteines testeuses, dans le cadre des cancers sont modifiées et envoient en intracellulaire des signaux de repression des intégrines. Les têtes de fixation de ces intégrines spécifiquement flexibles pour l'adhesion extracellulaire se replient, et les intégrines sont inhibées.  [...]

La stratégie à double tranchant du virus Ébola

Les scientifiques ont construit des souches mutantes du virus possédant des versions inactives de la protéine VP35, puis ont réalisé une infection virale de cellules épithéliales humaines en laboratoire. Leurs résultats montrent que la protéine PACT induit une réponse antivirale seulement si elle est infectée par les virus mutants.  [...] Les scientifiques ont poussé l'étude un peu plus loin et ont artificiellement augmenté la quantité de PACT dans les cellules humaines en culture. Ils ont ensuite réalisé une infection de ces cellules modifiées avec le virus. Leurs résultats montrent que les protéines PACT non liées à VP35 sont capables d'induire la réponse immunitaire.  [...]

[Biochimie] La synthèse des protéines !

Cellule nuclée et énuclée. des acides aminés radioactifs (leucine h3) ont été ajoutés au milieu nutritif des cellules en culture. Certaines cellules sont normales, d'autre ont été énuclées ( extraction du noyau) avant l'introduction de h3 dans le milieu. Cette technique d'autoradiographie permet de localiser la leucine incorporée dans les proteines.  [...] Si j'ai tout compris, tu vois qu'il y a incorporation de leucine marquée dans les protéines de toutes les cellules, même les énuclées.  [...]

[Biochimie] leucine radioactive et leucine non radioactive

Les acides aminés sont les briques de base des protéines. Donc forcement si le mileu de culture cellulaire contient de la leucine radioactive, il y a de très fortes chances qu'elle soit retrouvée dans toutes les cellules... Ce qu'on repere dans la cellule, c'est des petits grains qui correspondent aux protéines possédant la leucine radioactive.  [...] Dès qu'on change de milieu, et qu'on a plus que de la leucine NON radioactive, les nouvelles protéines qui seront synthétisées ne seront PAS visibles par autoradiographie.  [...]

Des artères biosynthétiques à partir de cadavres

Concrètement, tout commence sur un cadavre humain (ou un chien ). Des cellules musculaires sont prélevées et mises en culture dans un bioréacteur, sur une surface cylindrique constituée d'un polymère biodégradable ( acide polyglycolique). Les cellules musculaires synthétisent une matrice extracellulaire, constituée de collagène et d'autres protéines naturelles, qui remplace peu à peu le polymère.  [...] Suivant le diamètre, le tube de collagène pourrait être utilisé pour des pontages coronariens ou créer des courts-circuits artérioveineux chez des patients sous dialyse. Seul bémol, dans le cas du pontage, l'injection de cellules endothéliales du patient pour coloniser l'intérieur du vaisseau serait nécessaire, et mènerait donc à une utilisation beaucoup moins prêt à l'emploi que prévue.  [...]

HB19, un anticancéreux prometteur et bientôt à l'essai

On sait que HB-19 se lie de manière forte à la nucléoline qui se trouve sur la membrane de la cellule. Ainsi chevauchée, la protéine quitte son poste et pénètre dans le cytoplasme où elle est détruite. Pour en tester les effets, les chercheurs ont utilisé différentes cultures de cellules tumorales.  [...] Sur les cellules en culture, les chercheurs ont observé la diffusion de la molécule HB-19 liée à la nucléoline. Il est clair que seules les protéines présentes sur la membrane des cellules sont détruites. La nucléoline du noyau n'est pas affectée, ce qui constitue un bon point pour une utilisation en tant que médicament.  [...]