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[Biologie Cellulaire] Compter les passages

je travaille actuellement sur des cellules HEK. J'aimerai savoir comment sont comptabilisés les passages Logiquement, on devrait repartir de P0 lorsque l'on décongèle un lot mais je ne suis pas sur que cela marche comme cela - j'ai lu un travail (Luo et coll, 2005) qui parle de l'extinction de certaines protéines avec le nombre de passage.  [...] J'imagine qu'après un certain nombre de passages lorsque l'on congèle les cellules puis les décongèle un peu plus tard, ces mêmes cellules n'auront pas retrouvé leur protéines disparues - à moins que ce qui importe soit la fatigue des cellules Il ne faudrait pas dépassé un certain nombre de passage avec les HEK par exemple.  [...]

[Biologie Cellulaire] Nombre de passages

Et enfin il s'avère qu'après une dizaine ou une quinzaine de passage (pour certaines cellules), quelques propriétés sont sujettes à variation comme la capacité de transfection par exemple. Ce qui montre que le fait de décongeler des cellules fraîches a une influence, malgrès le fait que le nombre de passage ne revienne pas en arrière.  [...] Non, pourquoi cette idée qu'on doitaller jusqu'à 100 passages Au contraire, comme le disait Vince, au bout d'un certain nombre de passages, certaines propriétés des cellules sont suceptibles de changer, sans compter le fait qu' au fur et à mesure, des cellules meurent et qu'on réalise une sorte de clonage ou seules les cellules les plus résistantes persistent.  [...]

[Biologie Cellulaire] Comportement étrange HEK293 EBNA transfectées

J'ai remarqué que cela intervenait après l'ajout de la pression de sélection. Donc la puromycine peut être en cause ou alors les cellules elles même, je me demande si elles n'ont pas subi un trop grand nombre de passages surement + de 60 des cellules non transfectées.  [...] Il est clair que le nombre de passages est énorme, à environ 40 passages je les jette... Sinon une chose simple, avez vous changé le modèle de vos boites de culture, sachant que les HEK ne sont pas des cellules qui adhèrent fortement au plastique je pense que ce paramètre peut avoir son importance.  [...]

[Biochimie] contamination culture importante

Un conseil. lorsque tu décongèle une ampoule, lors des passages qui suivent tu amplifies le nombre de cellule (tu les repiques toutes, tu n'en jette pas une seule). Quand tu en as suffisamment (10-20 millions) tu te refais un stock de cellules en les congelant.  [...] Ainsi si un problème survient ou que le nombre de passages de tes cellules atteint un nombre élevé (au-dessus de 40 pour les Cos je pense), tu pourras repartir sans débourser 400¬ à chaque fois.  [...]

[Biologie Cellulaire] Culture de myocytes ?

- je n'arrive à imaginer aucun rapport entre la dystrophine et la protéine mdr1 (qui est un transporteur membranaire qui servirait à excreter des drogues hors de la cellule).  [...] J'ai fait de la culture de cellules musculaires lisses humaines alors je ne sais pas quelles sont les cellules qui t'intéressent( cardiomyocytes, SMC) mais les SMC ne supportent que 6 passages en culture. J'espère que cela t'aide.  [...]

conseil culture cellulaire

tout depend du type de cellules... je dirais laisse leur quelques jours puis fais un passage (ca permet de selectionner les cellules parfois).  [...] En général, je les décongèle une semaine avant usage, et je fais deux passages (selon le type de cellules) pendant cette semaine.  [...]

[Biochimie] presse de french

Ceux sont des cellules bactériennes et c'est pour réaliser des incubations. Un autre problème est que l'échantillon mousse beaucoup et j'ai lu qu'il fallait éviter de faire mousser des protéines. Y a t il un moyen de diminuer ce phénoméne.  [...] je travaille sur les bacteries lactiques lactocoques et je trouve du mal a casser mes cellules afin de recuperer les proteines totales pour faire par la suides electrophoéses donc svp conseillez moi une technique efficace.  [...]

Structure et inhibition du récepteur à l'histamine

Attention quand même à ne pas confondre histamine et récepteur à l'histamine. Cà me file des boutons de lire que l'histamine est une protéine faisant partie de la superfamille des récepteurs à 7 passages transmembranaires.  [...] Son action sur le récepteur à l'histamine H2 (situé dans ce cas ci sur la membrane des cellules pariétales) induit (par couplage à une protéine Gs je crois) une élévation de la concentration intracellulaire en AMPc, ce qui mène à la sécretion d'HCl par les cellules parétiales de l'estomac.  [...]

[Biologie Cellulaire] "Lignée Cellulaire" c'est quoi ?

C'est une culture de cellules qui s'est développée à partir d'une unique cellule. En théorie, toutes les cellules d'une même lignée partagent le même patrimoine génétique. En pratique, certaines dérives peuvent être observées au fur et à mesure des passages successifs, mais disons que le phénotype reste globalement inchangé.  [...] La définition de TanguyE est exacte, mais il faut préciser que l'on parle de lignée pour définir des cellules immortelles, qui sont donc capables de proliférer indéfiniment. C'est le cas des cellules cancéreuses, c'est pour cette raison que les laboratoires de biologie cellulaire utilisent des lignées comme modèles pour travailler, puisqu'elles sont immortelles, plus simples à cultiver que des cellules saines.  [...]

[Biologie Moléculaire] culture cellulaire

Tout dépend de sa couleur. Si ton milieu devient jaune c'est qu'il s'acidifie car augmentation du nombre de cellules. En général je ne change jamais mon milieu entre deux passages.  [...] Cela dépend de la vitesse de prolifération de tes cellules. certaines poussent très lentement et d'autres très rapidement. Les HeLa poussent rapidement donc il faut les passer assez souvent. Pour les HEK c'est un tout petit peu plus lent.  [...]