• Santé - Cellules, échantillon, Expérience

Marquage Annexine V/ PI Cytométrie: concentration cellulaire

Je veux évaluer l'apoptose et la mort cellulaire de mes cellules suite à différents traitements, le nombre de cellules vivantes sera donc différent d'un échantillon à un autre.  [...] Donc il vaut mieux que je compte mes cellules dans chaque échantillon pour être sûre d'en avoir assez/pas trop pour chaque expérience.  [...]

Le scénario de l'origine de la vie enfin déterminé ? - Page 3

Le papier de 2007 parle encore d'archées méthanogènes. La préférence accordée par Russell à la méthanotrophie est relativement récente. Mais ça montre que les détails de la théorie évoluent, ce qui est très encourageant il me semble. Ça permettra de tester son caractère prédictif grâce aux expériences en laboratoire, ce qui ferait de la théorie de Russell, un véritable modèle scientifique de l'apparition de la vie.  [...] Premièrement, la précipitation de cellules en FeS est chimiquement inconnue et a besoin d'une confirmation expérimentale. En 1997, Russell et Hall ont publié une telle expérience, mais selon Wächtershäuser, les cavités polygonales photographiées (10 à 20 µm de diamètre pour 2 à 3 µm d'épaisseur), sont un artefact dû à la préparation de l'échantillon.  [...]

[Microbiologie] Biofermenteur

On a fait une expérience qui consiste à mettre une solution de levures avec des nutriments(sucre) dans un bioréacteur puis on a commencé l'agitation et dans un certain temps soit 10 minutes après le début d'expérience on a prélevé un échantillon du milieu puis on l'a dilué au 1/50 pour lire la densité spectroscopique à 600nm.  [...] Alors le lendemain on a prélevé une autre fois un échantillon et on l'a dilué au 1/50 puis on a lu sa densité sur le spectro alors là, on a obtenu une valeur moins que la valeur de la premiere expérience.  [...]

[Biochimie] La Replication de l'ADN durant l'Interphase

On nous présente alors une expérience. Je l'ai bien compris. Ce qu'il faut en retenir, c'est que l'ADN est de plus en plus dense vers le fond de l'échantillon. Et inversement.  [...] Après deux cycles cellulaires, on observe d'après l'expérience la présence d'ADN hybride et léger. On peut alors exclure le modèle dispersif car chacun de ses brins contient un mélange de vieilles parties et de parties nouvellement synthétisées. chacun de ses brins contient de l'ADN hybride, il ne contient donc pas d'ADN léger.  [...]

[Divers] Crédibilité d'une expérience avec un petit échantillon

Il est vrai que c'est toujours mieux d'avoir plein d'échantillons. Mais ça coute des sous. Déjà pour les avoir, pour les entretenir, puis ensuite pour faire les analyses. Beaucoup de manips sont limités par cet aspect bassement matériel, mais ça fait aussi partie des problèmes de la recherche.  [...] Quand les résultats contiennent des statistiques, tu peux calculer l'intervalle de confiance. Et effectivement, quand tu as un petit échantillon, il est énorme. Mais bon... on part du principe que les auteurs sont honnêtes, même si certains aspects de manips peuvent être cachées pour ne pas brouiller le message à délivrer.  [...]

[Biologie Moléculaire] protocole extraction ARN (pas de kit, ni trizol)

J'ai fait des extractions d'ARN dans ma jeunesse avec du phénol Chloroforme-alcool isoamylique mélange 1/1 et ça marchait très bien. Problème c'est long, assez lourd et les quantités récupérées sont certes impressionnantes mais pas reproductibles.   [...] Ca dépend de l'échantillon, si c'est à partir d'une culture de cellules, oui surement, si l'échantillon est complexe, l'utilisation du temps devient utile. Et le nombre de lavages devient important.  [...]

observation métaphase

1. prélevez un échantillon foliaire (un bout le moins épais possible pour essayer d'obtenir une seule couche de cellules) et plongez le aussitôt 2 à 3 heures (maximum) dans la colchicine.  [...] 2. placer l'échantillon dans un milieu hypotonique (eau distillée) pendant 5min pour éclater le noyau et la vacuole des cellules et permettre une dispersion des chromosomes dans tout le cytoplasme.  [...]

Housekeeping gene (gene de ménage)

J'aimerais comparer le nombre de cellules présentes dans un certain volume de sang au nombre de cellules présente dans un échantillon de selle de même volume. Pensez vous que je puisse utiliser un housekeeping gene pour cette quantification.  [...] Oui mais est ce que justement on pourrait faire une normalisation, en se disant qu'une certaine quantité d'ADN génomoque correspondrait à une quantité de cellules donnée dans chaque échantillon.  [...]

biochimie

b) Après centrifugation en gradient de CsCl, l'acide nucléique natif conduit à l'obtention d'une seule bande correspondant à une densité de 1,77g/cm3 alors que l'échantillon provenant de l'expérience précédente fournit lui aussi une seule bande mais de densité 1,72g/cm3.  [...] d) La centrifugation en gradient de CsCl est maintenant réalisée sur un échantillon de l'acide nucléique de départ placé en milieu alcalin (pH 12) pendant 1 heure puis ramené à pH7. On retrouve alors une bande de densité 1.72g/cm3 même si l'on refait l'expérience (c) sur le contenu du tube.  [...]

[Biologie Moléculaire] Tampon de lyse extraction ADNg

Ensuite le volume à ajouter sur tes cellules est variable suivant le nombre de cellules, pour un nombre de cellules. 3.10^7 ajoute 0,3 ml de tampn de lyse et 1 ml si tu effectue ton extraction sur plus de cellules. Il te suffit ensuite d'incuber tes échantillon 12 à 18h à 50°C sous agitation dans des tubes bien fermés.  [...] Après tu ajoute 1volume équivalent (0,3 ou 1 ml suivant le nombre des cellules) de phenol/chloroform/alcool isoamylique. Centrifuge 10 min à 1700g. Après tu transfert la phase aqueuse dans un nouveau tube et tu ajoutes 1/2 volume d'acétate d'ammonium 7,5M et 2 volume d'éthanol 100%, l'ADN devrait précipité immédiatement.  [...]