• Santé - Cellules, Anticorps, Tubes

problème immunomarquage pour cytométrie

En cours on a vu un exemple nous disant qu'il été possible de réaliser un triple marquage sur des cellules leucocytaires pour regarder les monocytes et les Lymphocytes.  [...] Le prof nous a donné d'autres anticorps pour le même type de cellules et nous demande de faire les associations les plus judicieuses sachant qu'on peut pas mettre dans le même tube un même marqueur et j'avoue que je suis perdu….  [...]

Co-immunoprécipitation: à quoi sert le flowthrough?

Bonjour, j'ai récemment effectué un stage où j'ai fais une co-immunoprécipitation avec des billes magnétiques, sur des cellules lysées. Avant d'éluer les complexes billes -anticorps-antigènes, on a placé les tubes sur le support aimanté pour récupérer le surnageant que mon maître de stage a appelé flow through.  [...] Le flow through est censé ne contenir que les autres protéines cellulaires dont je n'ai pas besoin Si la co-pi a fonctionné je ne devrais rien avoir dessus au WB (ou montrerait les restes de protéines d'intérêt n'ayant pas lié) Cela sert à savoir si la liaison entre l'anticorps et la protéine est bonne ou mauvaise.  [...]

[Biologie Cellulaire] Noyau de cellule végétale

C'est pourquoi, ces tubes criblés sont toujours accolés à des cellules compagnes... Qui peuvent elles-même se transformer aisément en tubes criblés.  [...] Pour le comprendre, il faut imaginer que les cellules criblées forment une sorte de tubes longs, un tuyau en quelque sorte, qui devrait donc ne contenir rien qui entrave la circulation de la sève. Or, la présence de noyaux ou d'autres organites à l'intérieur de ces cellules (tubes) se considère comme des pièrres dans un canal d'eau par exemple, ce qui empeche ou ralentit la libre circulation des liquides.  [...]

[Biologie Cellulaire] Cellules eucaryotes sans noyau

Les tubes criblés du Phloème qui assurent la conduction de sève élaborée, sont constitués de files de cellules vivantes allongées, sans noyau. Ces cellules s'associent avec d'autres cellules sSurs dites compagnes = petites cellules collées contre celles-ci et très actives qui vont assurer le métabolisme des ces cellules énuclées en produisant leurs ARNm etc.  [...] Les tubes criblés du Phloème qui assurent la conduction de sève élaborée, sont constitués de files de cellules vivantes allongées, sans noyau. Ces cellules s'associent avec d'autres cellules soeurs dites compagnes = petites cellules collées contre celles-ci et très actives qui vont assurer le métabolisme des ces cellules énuclées en produisant leurs ARNm etc.  [...]

[Biologie Cellulaire] Coupe transversale de testicule (aide)

Ta photo est une coupe de tubes séminifères. En gros ce sont des tubes dans lesquelles des cellules vont se transformer en spermatozoïde tout en migrant de la paroi vers la partie centrale du tube (très claire sur la photo). Les points noirs (que tu pointes avec tes flèches rouges) correspondent au noyaux de ces cellules qualifiées de germinales parce qu'elles se transforment en gamètes.  [...] Pour en revenir aux cellules de Leydig, elles se trouvent entre ces sections de tubes séminifères. On ne les distingue pas aussi bien que les cellules germinales.  [...]

même marquage immunofluorescence dans le vert et le rouge

J'ai pensé que je m'étais trompé dans mes anticorps secondaires mais après vérification, il s'avère que non. donc je ne comprends pas d'où ça peut venir. Je précise que là j'ai utilisé des cellules de souris. J'avais réalisé les mêmes marquages (avec les mêmes anticorps) dans des cellules humaines et ça fonctionnait parfaitement.  [...] Mes 2 anticorps secondaires (avec 2 fluorochromes différents) reconnaissent un seul anticorps primaire (qui est celui produit chez la souris), ce qui suggère que les 2 anticorps sont anti-IgG de souris mais ce n'est pas ce qui est noté sur mes tubes (aliquots).  [...]

[Biologie Moléculaire] Aide Western Blot avec "taches" claires (marbrures de non marquage)

-Les incub d'anticorps se font dans des gros tubes (type Falcon 50 ml) sur un rouleur avec 5 ml d'anticorps. Le volume semble suffisant. j'ai toutefois déjà testé 10 ml mais ce n'était pas mieux.  [...] -La révélation des anticorps secondaires HRP se fait à l'ECL (1ml), à plat. Je surveille bien sa répartition pendant les 2 min d'incub. Je ne pense pas non plus que ça vienne d'une mauvaise répartition ici car si je remet de l'ECL plus tard les taches claires sont exactement aux mêmes endroits.  [...]

Matériels et méthodes | Dossier

Cette membrane est incubée pendant 1,5 heure avec une solution pour western blot (cf. annexe 1) contenant du lait à la concentration de 10 %, ceci permettra d'éviter des liaisons non spécifiques des anticorps utilisés par la suite. La solution pour western blot est ensuite employée pour laver la membrane 4 fois 10 minutes.  [...] La membrane est ensuite lavée 4 fois 10 minutes avant de mettre l'anticorps secondaire de singe (Nordic), marqué à la peroxydase, et qui est dirigé contre les chaînes lourdes et légères des anticorps primaires. Il est dilué 10 000 fois dans le même tampon que l'anticorps primaire, cette étape se fait pendant 45 minutes à température ambiante.  [...]

Cellules de Sertoli

Bonjour, je voudrais savoir tout ce qu'il faut savoir au niveau terminale sur les cellules de Sertoli. Arretez moi si je me tropme. elles se trouvent dans la paroi des tubes séminifères, sont stimulées par la FSH, ont une influence sur la spermatognèse (je ne sais pas comment) et sont la cible de la testostérone.  [...] Les cellules de Sertoli ont un rôle de soutient et se situe effectivement dans la paroi des tubes séminifères du testicule.  [...]

[Génétique] Combien la femme a-t-elle de gènes de plus que l'homme ?

Cela peut-il constituer un indice au fait que l'homme aurait été à l'origine une femme (ou plus exactement que nos lointains ancêtres mammaliens auraient été exclusivement des femelles se reproduisant par parthénogenèse).   [...] Si les cordons sexuels primaires possèdent le gène SRY, conjointement avec SOX9, le SRY est traduit et donne le facteur de différenciation testiculaire. les cordons sexuels se différencient alors pour former les tubes séminipares, et les cellules donnent des cellules pré-Sertoli, tandis que les CPG envahissent la paroi des tubes et donneront les spermatogonies.  [...]