• Santé - Cellules, ADN, Intérêt

[Biologie Moléculaire] La traduction

= le génome humain est constitué de 92 molécule d'ADN dont 46 sont différentes. N'est-ce pas.  [...] pourquoi 92 la grande majorité des cellules est en phase G0/G1, donc 2 chromosomes monochromatidiens x 23 (entre nous, ça n'a aucun intérêt de se demander combien de molécules d'ADN... c'est scolaire mais sans intérêt).  [...]

Définition | Transfection | Futura Santé

Lorsque le vecteur est viral, les cellules sont infectées par le virus qui porte le gène d'intérêt. Sinon, les cellules subissent un traitement chimique pour que leur membrane plasmique devienne plus perméable et laisse mieux entrer l'ADN. Il existe plusieurs façons d'introduire un ADN dans une cellule.  [...] par biolistique (en anglais gene gun ) avec des particules d'or ou de tungstène associées à l'ADN. Ces billes sont ensuite envoyées dans la cellule avec un canon à particules. Cette technique est souvent utilisée pour des cellules végétales.  [...]

[Biologie Moléculaire] BAC alignement

. L'intérêt de la manip étant de trouver des differentes séquences entre l'ADN de cellules germinales et somatiques.  [...] Je comprends pas du tout lorsqu'ils disent paired BAC end sequences from sperm DNA... ça veut dire qu'il prennent uniquement des séquences terminales Je sais pas comment marche un alignement ou comparaison de séquences avec des BAC et donc j'arrive pas à comprendre la phrase.   [...]

[Biologie Cellulaire] marquage au BrdU

Il est utilisé pour détecter les cellules dont la réplication de l'ADN est active puisqu'il vient s'incorporer en lieu et place de la thymidine lors de cette phase. Comme c'est un analogue de la thymidine, il n'est pas considéré comme aberrant par les mécanismes de réparation de l'ADN donc il reste incorporé dans l'ADN après réplication.  [...] Par ailleurs l'intérêt est de faire du suivi du devenir des cellules dans le temps. La BrdU est incorporée dans l'ADN et y reste. Vous pouvez donc suivre la différenciation des cellules et leur migration.  [...]

[Génétique] Production de souris transgéniques

Quand on fait de la recombinaison homologue, on transfecte des cellules ES avec l'ADN d'intéret. Par homologie, l'ADN s'intègre à l'endroit qu'on veut dans le génome. grâce à une sélection seules les cellules qui ont reçu le transgène au bon endroit survivent.  [...] Les FRT, c'est pas pour l'injection en elle même. C'est juste que si tu le souhaite, tu peux placer autour de ton gène d'intérêt des sites FRT. Ca permet, si tu fournis une source de flipase, d'induire une recombinaison site-spécifique et donc d'exciser le gène placé entre les séquences FRT.  [...]

[Biologie Moléculaire] question sur la QPCR

Logiquement tu dois avoir une gamme d'étalonnage, c'est à dire des puits où ont été mis des quantités connue d'ADN d'intérêt. Grâce à ces puits, on peut tracer une droite reliant les Ct et les quantités d'ADN. Avec la taille du génome et le nombre d'Avogadro, tu peux calculer combien de cellules il a fallu lyser pour obtenir cette quantité d'ADN (ce qu'on appelle équivalent génome).  [...] J'en ai encore une autre (désolée), pour calculer un nombre de cellules d'un mix étalon avec le nombre d'avogadro, dois-je utiliser la concentration.  [...]

[Génétique] Analyse ADN

Je pense que l'interet du prélévement est de récupérer quelques cellules de la personne à analyser, et ensuite d'en extraire l'ADN par des techniques assez standardisées et ensuite de faire l'analyse.  [...] Oui extraction d el'ADN du prélèvement et analyse, le plus souvent par PCR en amplifiant les microsatellites, ce qui permet d'établir une sorte d'emprunte spécifique d'un individu.  [...]

Mutagénèse insertionelle : gene-trapping

Dans quelques jours j'ai une présentation à faire sur les souris KO et donc je vais parler des techniques de mutation par insertion de fragments d'ADN exogènes dans un gène d'intérêt dans les cellules ES.  [...] Mais quand on utilise un vecteur plasmidique, comment peut se faire l'intégration Car pour les transfections stables classiques, on flanque notre séquence à insérer par des séquences homologues et le tour est joué, mais là, il n'y en a pas, et il ne peut pas y en avoir, donc.   [...]

Définition | Lentivirus | Futura Santé

Ils disposent également d'une enzyme, la transcriptase inverse, qui va alors générer le brin d' ADN qui pourra s'insérer dans celui de sa cellule hôte et ainsi générer de nombreuses copies du virus. Ils détruisent les cellules en enclenchant le phénomène d' apoptose.  [...] Par leur mode d'action, les lentivirus constituent de bons candidats au rôle de vecteur dans la thérapie génique. Il s'agit d'équiper un virus inoffensif d'un gène d'intérêt et de le laisser s'insérer dans l' ADN des cellules cibles.  [...]

[Biologie Moléculaire] Lyse cellulaire

Je voudrais savoir s'il est possible de lyser des cellules pour récupérer par co-IP une protéine liée à un lipide. Parce que forcément la lyse cellulaire va entraîner une rupture des interaction lipides-protéines et donc du complexe que je cherche à récupérer.  [...] non, un crosslinker = un produit qui fait des liaisons covalentes entre tous les trucs qui passent à sa portée. C'est utilisé pour fixer des liaisons labiles le temps de purifier une interaction. Par exemple on l'utilise en ChIP pour fixer les protéines sur l'ADN, avant de lyser les cellules et de récupérer l'ADN lié aux protéines d'intérêt (formaldehyde par exemple).  [...]