• Santé - Cellule, Quantité, ARN

[Biologie Moléculaire] Q-CPCR encore !

Ce qui est important, c'est la quantité d'ARN qui sera présent dans la cellule ou a eu lieu la transcription pour permettre une traduction, donc les tissus environnant, qui font de la masse, ne participe pas à ce phénomène. Il faut donc trouver un moyen de ramener ta valeur à une valeur représentative du nombre de cellules dans ton tissu, et cela tu l'obtiens en regardant le niveau de ton gène dans X µg d'ARN.  [...] Mais, si tu t'intéresses au niveau d'ARN dans une cellule donnée, tu vas exprimer le niveau de transcription de ton gène par rapport à R. Comme tu ne connais pas R, tu vas utiliser un multiple de R (le même pour les 2 tissus pour que cela soit comparable), par exemple la quantité d'ARN que tu as utilisé pour faire ta RT.  [...]

[Bio Vegetale] Quantité ADN/ARN

pourquoi la quantité de l'ADN est inférieur à celle de l'ARN dans une cellule végétale.  [...] Question sans sarcasme... Vous tenez cette info de quelle référence.   [...]

Du poulet OGM pour enrayer la grippe aviaire

Présent en grande quantité, l'ARN va accaparer toutes les réplicases virales de la cellule, empêchant ainsi les enzymes de multiplier le virus.  [...] La création d'un tel animal est longue et coûteuse. Les scientifiques insèrent, dans le jaune d'un oeuf, le gène au moyen d'un autre virus vecteur (un lentivirus, comme celui employé en thérapie génique ). Si les cellules germinales (sexuelles) possèdent le gène, la descendance du poulet aura alors le gène dans la totalité de ses cellules.  [...]

[Biologie Moléculaire] Aide sur la qPCR

Euh, pour la quantité minimale d'ARN j'ai trouvé 3µg, mais je ne l'ai trouvé qu'une fois. Cette quantité vous paraît-elle raisonnable.  [...] Moi quand j'ai fait de la PCR en temps réel en M2 on partait de 1 µg d'ARN pour faire la transcription inverse. C'est largement suffisant vu que tu n'as besoin que de quelques ng d'ADNc pour la PCR.  [...]

Expression de gène

On sait que les ARN totaux d'une cellule correspondent à l'expression génétique puisqu'ils sont issus des gènes ADN (en fait on sélectionne les gènes par le produit de ceux-ci qui est l'ARNm). Le but est de transformer ces ARNm en ADN complémentaire (ADNc) par rétrotranscription et de les amplifier par PCR (chacun des ARNm est amplifié proportionnellement à sa quantité de départ dans la cellule).  [...] Et étant donné qu'on a un amplification proportionnelle des ARNm l'intensité de la couleur des spots suite à l'hybridation nous renseignera sur la forte ou faible expression de ceux-ci dans la cellule en comparant avec des témoins.  [...]

Différents types de RT PCR

Je voulais savoir si La qRT PCR en point final était utilisé pour faire une analyse qualitative, c'est à dire savoir si l' ARNm était présent ou pas dans la cellule tandis que la real time RT PCR servait à quantifier la quentité d'ARNm présent dans la cellule.  [...] ...donc tu en déduit que l'ARN1 était initialement pr ésent en plus grande quantité, par rapport à l'ARN2. on peut donc connaitre l'expression de ces gènes (correspondant aux ARN 1 et 2) et savoir lequel est le plus exprimé dans la cellule, pour une condition donnée.  [...]

[Biologie Moléculaire] Transcription ARNr/ARNm

Ceci dit, il est fort a parier que la quantité soit fluctuante et qu'une cellule en division active ait plus d'ARNm que la cellule en phase stationnaire.  [...] * d'un côté, comment peut-on établir une fourchette de quantités d'ARNm aussi étroite... Est-ce que l'on a pris en compte le type de cellule Est-ce une valeur arrondie faite à partir de plusieurs types cellulaires A plusieurs étapes du développement.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN

Ce qui peut limiter l'extraction c'est. la quantité de matériel de départ, la qualité de la lyse cellulaire, la concentration relative en ARN.  [...] sinon faire un mélange avec methanol-chloroforme (récupérer la phase supérieur) suivi d'un mélange chloroforme (récuperer la phase supérieur) suivi d'une précipitation à l'acetate de sodium et ethanol (0.3M finaux d'acetate de Na, avec 2.5V de ethanol 99%, une heure a -20°, centrifuger récupérer le culot et le laver avec 250 microlitres ethanol 70%, centrifuger evacuer l'ethanol et resuspendre en eau-DEPC ) permet normalement d'avoir une bonne qualité d'ARN sans trop de pertes.  [...]

[Biologie Moléculaire] couplage inverse ARNm - protéine ??

une qPCR n'a jamais indiqué une quantité d'ARNm, soit c'est une RT-PCR, soit une RT-qPCR mais il manque une précision dans votre énoncé.  [...] Pour confirmer des quantités d'ARNm, une seule solution. comparer avec la production d'ARNm dit de ménage, des ARNm transcrits de manière constante comme l'ARN 16S et reflétant ainsi l'activité de votre cellule. Si votre quantité d'ARNm varie différemment de celle des 16S, cette variation vient bien d'un mécanisme de régulation.  [...]

[Microbiologie] l'ARN viral

Ensuite l'ARN polymérase traduite va se servir de l'ARN + comme matrice pour synthétiser de l'ARN - (non reconnu par les ribosomes). Cette ARN - va à son tour servir de matrice pour synthétiser de l'ARN + en grande quantité. Cet ARN + sera encapsidé et on aura donc des virions ARN +.  [...] Pour les ARN - ce cycle sera légèrement différent. L'ARN - n'est pas reconnu par les ribosomes, donc le virus va apporter son ARN polymérase ARN dépendante au moment de l'infection. Le brin d'ARN - servira de matrice pour synthétiser une grande quantité d'ARN +.  [...]