• Santé - Cassette, Résistance, Antibiotique

Mutagenèse dirigée : un Nobel pour des souris mutantes

La construction des fragments d'ADN injectés dans la cellule a alors été pensée pour permettre une sélection en deux temps. En plus du gène muté, on ajoute un gène de résistance à un antibiotique (appelé cassette NEO, il confère une résistance à la néomycine), ainsi qu'une cassette TK (TK pour thymidine kinase, confère une sensibilité au gancyclovir).  [...] Le gène de résistance sert à trouver les cellules qui ont bien reçu le transgène. les cellules sans transgène meurent en présence de néomycine (figure 1). Ainsi on pourra les laisser se multiplier et augmenter les chances de survenue de la double recombinaison.  [...]

[Biotechnologie] Technique de wanner

Je suis en train de faire mon stage de deuxième année de BTS biotechnologie et je dois me servir de la technique de wanner. Malheureusement, je n'arrive pas à comprendre le principe.   [...] Je pense qu'il s'agit en effet être cette technique. Il s'agit d'une méthode pour déleter un gène en utilisant un plasmide, et en criblant les transformants avec une cassette de résistance à un antibiotique. J'avoue avoir du mal à comprendre le mécanisme, les seuls documents que j'ai trouvé sont en anglais, ce qui me pose quelques problèmes.  [...]

mutagénèse classique

par intégration dans les souches kanR, via la conjugaison bactérienne, d'une seconde cassette de résistance à un second antibiotique (comme la streptomycine par exemple). souches kanR strR.  [...] Dans certains cas, des bacteries de labo ont été modifiée genetiquement et une cassette de resistance Kan a été integré dans un gene. Pour faire sauter cette cassette, tu peux soit selectionner sur un phenotype KanS soit sur le phenotype restauré du gene interrompu.  [...]

[Biologie Moléculaire] No hablo ingles or just a little

Alors je ne suis pas certain (j'ai pas lu l'article en detail) mais ma version c'est que la cassette est juste un fragment d'ADN que tu peux inserer dans le chromosome, conferant une resistance Sm/Spc. Dans ton article, ils s'en servent pour faire des mutants selectionables.  [...] tortuga. Alors je ne suis pas certain (j'ai pas lu l'article en detail) mais ma version c'est que la cassette est juste un fragment d'ADN que tu peux inserer dans le chromosome, conferant une resistance Sm/Spc. Dans ton article, ils s'en servent pour faire des mutants selectionables.  [...]

[Biochimie] Clonage après purification sur gel

Je dois cloner mon insert dans un phagemid en lieu et place d'une cassette de résistance à la tétracycline (j'ai une autre résistance).  [...] J'ai une petite idée qui vaudra ce qu'elle vaudra. Pour enlever ta cassette de résistance, as-tu pensé à amplifier ton vecteur par PCR en prenant des amorces qui excluent la cassette de résistance (et qui incluent en 5' de tes amorces les sites de restriction plus quelques bases en 5' de chaque site de restriction pour pouvoir les cliver par la suite) Si ton vecteur provient de bactéries, il sera méthylé.  [...]

[Biologie Moléculaire] Recombinaison homologue plasmide

je pense que les gènes que tu étudies, ont été inactivés pas l'insertion du gène de résistance à l'antibiotique à la place. Ce gène de résistance devait porter en 5' et 3' des séquences du gène à inactiver. Ainsi la recombinaison homologue pouvait avoir lieu et l'insertion du gène aussi. du coup ton gène devint inactif.  [...] Pour inactiver un gène comme c'est décrit dans ton énoncé, on fait une inactivation par cassette portant un marqueur. en l'occurrence, le gène de résistance à la kana. Ce que tu fais est donc construire cette cassette d'une manière telle que le gène de résistance à la kana est entouré par des séquences (5' et 3' respectivement) identiques à celles des extrémités 5' et 3' du gène que tu souhaites inactiver.  [...]

[Génétique] Blocage d'expression d'un gène

Alors ça se fait de plusieurs manières par exemple il est possible d'insérer une cassette d'antibiotique dans les gène, enfin c'est l'une des méthodes que je connais, il s'agit de produire une mutation seulement.  [...] Peux tu m'en dire plus sur la cassette d'antibiotique J'en ai jamais entendu parler. (tu peux juste m'envoyer un lien, histoire d'en savoir plus pour que je travail dessus).  [...]

[Biotechnologie] Interférence à l'ARN

- soit une simple cassette de gène de résistance à un antibio par exemple = méthode knock-out.  [...] Si tu fais du knock-in, il faut en plus de ton gène X, un marqueur de sélection comme un gène de résistance aux antibio ou un gène pour l'auxotrophie.  [...]

Plasmide recombinant

En fait, dans le plasmide, on place souvent un premier gene de resistance à un antibiotique dans la région de recombinaison. Ceci pour pouvoir selectionner les vecteurs recombinants. Faciel et instinctif je dirais.  [...] On selectionne deja sur la résistance les cellules portant le plasmide. On a donc dans le lot des cellules qui portent le plasmide et des cellules qui ont recombiné. Ce que l'on veut maintenant c'est n'avoir plus que les cellules qui ont recombinées. Du coup on va les tester avec le gène de sensibilité à l'antibiotique.  [...]

Deux groupes sanguins viennent d'être découverts : Junior et Langereis

Un groupe sanguin consiste en une classification du sang en fonction de l'absence ou de la présence de substances antigéniques à la surface des globules rouges, c'est-à-dire des molécules qui peuvent être reconnues par les anticorps du système immunitaire.   [...] À l'origine de ces nouveaux groupes, deux protéines nommées ABCB6 et ABCG2, appartenant au vaste ensemble des transporteurs ABC ( ATP-binding cassette ), dont le rôle est de faire traverser la membrane plasmique à un certain nombre de substances. Ces deux molécules sont également en ligne de mire dans la résistance aux traitements contre le cancer.  [...]