• Santé - Carte, Restriction, Sites, Enzymes

Enzyme de restriction

Bonsoir, lorsqu'on fait une carte de restriction, l'ADN (en rond) c'est bien celui de l'enzyme.  [...] Je crois qu'il y a confusion. Comment vois-tu une enzyme de restriction Quelle action de l'enzyme de restriction regardes-t-on lorsqu'on effectue la carte de restriction d'un plasmide Pour information, ce qui est représenté sur une carte de restriction ce sont les sites de coupure par des enzymes de restriction, et non pas les enzymes de restriction elles-mêmes.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction de l'ADN et digestion enzymatique

Je suis actuellement en train de rédiger mon compte rendu de TP concernant une extraction d'ADN et une digestion enzymatique par 3 enzymes (EcoRI, BamHI et HindIII), en faisant le TP, notre professeur ne nous a pas vraiment expliqué, je dirais même qu'il n'a donner aucune information.  [...] Le but de ce TP est faire une carte de restriction et sur une pGlo carte j'ai pu identifier les sites de restrictions de chaque enzyme et faire la carte de restriction mais la chose qui me pose problème, c'est de tracer la courbe étalon à partir des deux électrophorèses.  [...]

[Biologie Moléculaire] Choisir le bon vecteur?

2-Les sites de restriction doivent être localisé sur un marqueur de séléction. Donc si je prends comme exemple le vecteur pBR322, je peux utuliser les enzymes de restriction marquees sur la carte du vecteur, qui sont dans ce cas. PvuII, Sty I, BstZ I, Sal I, Sph I, BamH I, EcoR V, Hind III, EcoR I, Sca I, PvuI, PstI.  [...] Hormis certaines remarques faites ci haut,on doit prendre aussi en compte le fait que le clonage depend de l'objectif du travail.Si par exemple on veur cloner l'ORF tout entier,on fait le choix de 2 sites de restriction enzymes teste au prealable car les 2 sites,il ne faut pas que ils se retrouvent dans le gene,en plus pour l'orientation du gene et aussi en fonction de disponibilite des enzymes de restriction au laboratoire.  [...]

[Biologie Moléculaire] Carte de restriction électrophorèse

J'ai réalisée une digestion d'un plasmide bactérien inconnu afin de déterminer sa carte de restriction. Pour cela, je l'ai digéré avec des enzymes de restriction. BamHI et EcoRI. J'ai fait une digestion avec chacune des enzymes tampon E pour BamHI et tampon MC pour EcoRI et une avec les 2 dans le tampon MC (activité 75% pour bamhI et 100 pour ecorI).  [...] En faite l'objectif de ce TP c'est d'effectuer la carte de restriction du plasmide c'est à dire trouver à quel niveau du plasmide sont situé les site de restriction de mes enzymes.  [...]

Carte de restriction

Combien de sites de restriction avez-vous besoin dans le plasmide A pour générer les 2 fragments de 3000 et 500 bp avec une seule et unique enzyme de restriction.  [...] Qu'est-ce qu'une carte de restriction Reportez les résultats sous forme linéaire en indiquant les sites de restriction pour le plasmide A et B.  [...]

[Biologie Moléculaire] Electrophorèse

Tu es sur la bonne voie avec l'idée des sites de restriction Un site c'est un endroit de taille petite, une position Donc, les numéros marqués sous tes traits verticaux sur la carte sont des.  [...] Sinon, oui je sais représenter un site de restriction mais ce que je ne comprends pas c'est que pour l'ADN 2, je vois 6 sites de restrictions sur les résultats théoriques mais seulement 4 ont été représentés sur la carte de restriction.  [...]

Carte de restriction

Bonsoir, je n'arrive vraiment pas à comprendre la notion de carte de restriction, en fait il y a un exemple particulier qui me tracasse, disons que nous avons une portion d'ADN à étudier et que nous avons deux cas deux figures qui se présentent soit la formation soit l'abolition d'un site de restriction et nous allons faire une double digestion avec deux enzymes.  [...] Disons que l'enz 1 coupe aux deux extremités et le site de restriction sur lequel va agir une enz2 soit formé soit aboli va se trouver au milieu, d'apres ce que j'ai compris, si le site est aboli= pas de coupure au milieu par l'enz2 et nous aurons juste les coupures aux extremités par l'enz1 ce qui va former un seul fragment, maintenant si on l'hybride avec une sonde, qui s'hybride avec la partie vers le milieu de le séquence on aura logiquement un seul trait dans l'electrophorse non vu que la sonde va s'hybrider avec le fragment.  [...]

[Microbiologie] Taille de plasmide

j-ai les enzyme de restriction BamHI,EcoRI et PstI,COMMENT SAVOIR ESQ CES ENZYMES ONT DES SITES DE RESTRICTIONS POUR LE PLASMIDE pGEM-T ET SI C-EST OUI COMBIEN DE SITE SVP DES REPENCES SONT LES BIENVENUE.  [...] C'est facile pGEM-T est un vecteur de sous-clonage commercial. La carte plasmidique est disponible sur internet. A partir de là un enfant de 6 ans trouverai le nombre de site de restriction pour ces 3 enzymes.  [...]

Carte de restriction d'un plasmide

Ok, cela n'aide pas vraiment, dis comme cela, mais lorsque je devais faire une carte de restriction, le plus dur est de la commencer. Une fois que tu as les deux premiers sites, cela devient généralement plus facile. Je te conseille donc de tracer un cercle, placer le site EcoRI, puis son copain, BamHI.  [...] On a la correction que je vous ait aussi mis seulement j'ai dû mal à la comprendre. Mon problème est surtout lorsqu'il faut mettre les sites de restriction.  [...]

Enzyme et carte de restriction

Malgrès la lecture des quelques topics sur la question, je ne comprend RIEN aux enzymes de restriction et surtout à la facon de dechiffrer une carte de restriction. Pourriez vous m'expliquer simplement et si possible me donner des exos corrigés pour que je puisse comprendre.  [...] La carte de restriction va te permettre de determiner la presence et le nombre de chacun des sites sur un plasmide. Ce n'est que de la logique il n'y a besoin d'aucun connaissance en biologie pour y arriver.  [...]