• Santé - Carte, Restriction, Plasmide

Carte de restriction

Qu'est-ce qu'une carte de restriction Reportez les résultats sous forme linéaire en indiquant les sites de restriction pour le plasmide A et B.  [...] Le même exercice donnera 4 cartes avec le plasmide B. Le positionnement adéquat des 3 sites de restriction dans le plasmide B génère 4 cartes de restriction possibles dont les 3 fragments de 500, 1000 et 2000 pb permet déjà d'exclure la proposition de Naomie avec son agencement initial en 5'-2000/500/1000-3' (3 sites de restriction aux positions 1, 2000 et 2500 (ou bien aux positions 278, 2278 et 2778, comme vous voulez...)).  [...]

[Biochimie] Plasmide de clonage et d'expression

je suis à la recherche d'un professeur de biochimie ou une personne pouvant me dire concrètement comment distinguer par l'intermédiaire d'une carte de restriction si [un plasmide est dit de clonage ou d'expression.  [...] Ces deux types de plasmides ont des caractéristiques communes et des différences. La simple carte de restriction, qui présente les sites de restriction (généralement limitée aux sites présentes une seule fois dans le plasmide) ne suffit pas à les distinguer.  [...]

Carte de restriction d'un plasmide

Ok, cela n'aide pas vraiment, dis comme cela, mais lorsque je devais faire une carte de restriction, le plus dur est de la commencer. Une fois que tu as les deux premiers sites, cela devient généralement plus facile. Je te conseille donc de tracer un cercle, placer le site EcoRI, puis son copain, BamHI.  [...] Bonjour à tous j'ai également un problème au sujet d'un exercice sur les cartes de restriction j'ai mis le fichier en question, il s'agit de la fin de l'exercice 1 de ce TD ou il faut donner la carte de restriction du plasmide pk rec.  [...]

[Biologie Moléculaire] Carte de restriction électrophorèse

En faite l'objectif de ce TP c'est d'effectuer la carte de restriction du plasmide c'est à dire trouver à quel niveau du plasmide sont situé les site de restriction de mes enzymes.  [...] En supposant que dans la double digestion mes 2 enzymes aient coupé au même endroit, je pense pouvoir multiplier 3090 par 2 soit 6180 pb pour la double digestion ce qui serait cohérent avec les autres résultats. Mais je ne comprends toujours par le résultat de cette double digestion, car selon moi j'aurais du obtenir les mêmes résultats que la digestion EcoRI sinon je ne peux pas trouver la carte de restriction de mon plasmide.  [...]

[Microbiologie] Exercice carte de restriction

Après j'ai regardé B+E. on remarque que les bandes de E et de B seules sont équivaut à B+E du coup je me suis dit que les sites de restrictions sont consécutifs, j'ai donc inséré EcoRI après le 2e site de B (en lisant dans le sens horaire) et l'autre E à 1300pb du 1er E (toujours en lisant dans le sens horaire) ce qui donne la seconde image.  [...] Qu'en pensez-vous sachant que le fragment d'intérêt (B1 B2) ne présente aucun site de restriction ce qui me paraît un peu bizarre (on ne peut pas vérifier si le fragment a bien été inséré sans digestion d'un site spécifique au fragment considéré).  [...]

[Biologie Moléculaire] Plasmide

Je dispose de deux enzymes de restrictions, une XhoI qui possède deux site de restriction dans la cassette de polyclonage. l'autre enzyme est MluI cependant sur le schema du plasmide je n'ai pas son site de restriction donc je ne sais pas ou elle coupe.  [...] oui tu peux, sous certaines conditions. Il faut un site de restriction dans le vecteur, et un autre dans l'insert (pas au milieu de l'insert). Selon que l'insert est dans un sens ou dans l'autre, tu auras deux fragments différents en taille. Pour l'histoire du plasmide natif j'aurais dit que c'etait le vecteur seul.  [...]

Confirmation de l'insertion d'un gène dans un plasmide

Comme sur un gel d'électrophorèse par exemple. J'ai pensé à ca mais je ne suis pas très sûre du résultat, je devrai visualiser juste une seule bande, sachant que la taille de mon gène est de ~880pb et le plasmide que j'utilise est de ~7900pb donc en principe j'aurai une bande de ~8700pb. Est¬ce une méthode correcte.  [...] Oui c'est toujours comme cela que l'on fait d'ailleurs. On établit la carte de restriction du plasmide en utilisant des enzymes de restriction. A minima, une enzyme de restriction qui ne coupe qu'une fois permettra de linéariser le vecteur et d'en trouver la taille en faisant migrer le produit de digestion dans un gel d'agarose.  [...]

[Biologie Moléculaire] Numérotation des sites de restriction

Bonjour à tous j'aimerais savoir comment on numéroté les sites de restriction sur un plasmide. Je dois numéroter les sites de restriction de l'insert d'un plasmide recombinant et je ne sais pas comment faire. Merci d'avance pour la réponse.  [...] Je n'ai pas compris votre réponse. Je vais essayer d'expliciter ma question. En fait j'ai un plasmide psp72 et un insert pst1 et entre le promoteur sp6 et le site de restriction pst1(l'insert) il y'a un écart ce qui est normal. Mais le site de restriction pst 1 porte le numéro 32 et je n'ai pas compris comment le prof a trouvé ça.  [...]

[Génétique] Construire un vecteur de transgenèse dérivé des transposons

D'où vient l'A Tout simplement, on l'a rajouté au niveau des oligos Tu peux carrément pousser plus loin si tu as besoin, en ajoutant des sites de restriction par le biais des oligos. Ca s'appelle PCR d'assemblage.  [...] Dis, pourquoi on coupe avec ces enzymes de restriction précisément est-ce que tu as sous les yeux la carte génétique du plasmide avec son MCS.  [...]

[Biologie Cellulaire] Clone du gène CRO d'un bacteriophage

En fait, on souhaite cloner le gène CRO du'un bacteriophage lambda dans un plasmide pLV236 et on me donne comme carte de restriction.  [...] Je ne vois pas quelle(s) enzymes(s) de restriction je dois utiliser pour le clonage de CRO, sachant que dans mon plasmide est deja present un P/O lac, une origine de replication, LacI et AmpR.  [...]