• Santé - BSA, Gamme, Protéines

[Biochimie] [TP Séparation de molécules par chromatographie d'exclusion sur colonne] Niveau L1S1

Les deux et troisième manip du TP consistent à établir la gamme étalon du cytochrome c par dilution d'une solution-mère à 0,5mg/mL dans différents volumes et mesure d'absorption à 408nm ainsi que la gamme étalon pour le dosage des protéines grâce à une solution de BSA (albumine sérique de boeuf) à 1mg/mL avec du bleu de coomassie (méthode de Marion S. Bradford).  [...] On a ensuite dû prélever 20micro litres des fractions 1 à 11 (la dernière contenant les dernières molécules de cytochrome c) et d'y rajouter 1mL de bleu de Coomassie permettant de mettre en évidence la présence des protéines. Avec la gamme étalon du BSA, on a pu obtenir la quantité de protéine pour ces fractions, en micro g.  [...]

[Biologie Moléculaire] Preparation d'une gamme étalon ou standard pour PCRq

Je voulais quantifier un gène par PCRq, d'après la littérature un chercheur à utiliser le même gène en utilisant des amorces dégénérées et il indique la souche utilisée pour préparer sa gamme standard mais pas plus de détails.  [...] Car c'est surement une mauvaise lecture de ma part, mais en te lisant j'ai eu l'impression que tu voulais une gamme pour relier directement a une quantité en ng ou nmol initiale de ton gène, un peu comme en biochimie on prépare une gamme de BSA pour obtenir une concentration de protéines.  [...]

[Biochimie] Dilution en cascade

Je doit réaliser une gamme étalon de la protéine standard BSA (Bovin Serum Albumin) pour doser les protéines de mes échantillons avec la méthode.  [...] Ben dans ce cas là tu prends ta solution solution mère à partir du tube précédent. C'est à dire que tu commences tout d'abord par créer ton tube 5 puis pour faire ton tube 4 tu prélèves dans le tube en l'utilisant comme solution mère puis tu complètes avec du PBS jusqu'à avoir un volume final de 100 uL.   [...]

[Biochimie] Role de la BSA dans une extraction protéique ??

Mais lorsque je dose ensuite mes protéines extraites, la BSA est utilisée dans la gamme étalon. Dans quelle mesure la BSA présente dans mes extraits (puisque dans le tampon d'extraction) ne va pas fausser la quantification des proteines extraites par la suite.  [...] oui 1% c'est pas rien. Faut tenir compte de ça. Ma seule idée c'est celle de l'extraction à blanc, comme ça tu récupères autant de BSA que dans les échantillons. Sauf si tu as besoin d'une activité relative ou dans ce cas tu ne prends pas en compte l'activité absolue en fonction de la quantité de protéine totale.  [...]

[Biologie Cellulaire] Extraction protéique pour western blot

o Dans un tube eppendorff 1,5ml, ajouter 1ml de réactif (A+B) et 5ul d'extrait protéique ou de gamme BSA. Ne pas oublier de faire un blanc pour les protéines (5ul de RIPA-N base + additifs ).  [...] S'il veut être dans une quantité de protéines raisonnable pour le dépot, il faut qu'il dose au moins une fois pour connaître la quantité moyenne qu'il récupère. Dans le tampon laemmli, comme tu l'as dit, on ne peut pas doser à cause du bleu (et encore, même sans bleu.  [...]

[Biochimie] Chromatographie d'exclusion sur colonne !

Après coloration par la méthode de Bradford (bleu de Comassie se colore en bleu en présence de protéines dans une solution acide) et mesure de l'absorbance du complexe formé à 595 nm.  [...] On a fait une gamme étalon de l'absorbance de BSA colorée au réactif de Bradford. mais c'est quoi le BSA quelle est son utilité il est censé représenter une protéine.  [...]

[Biochimie] Gamme étalon BSA

J'ai une question à poser sur la gamme étalon BSA, et j'ai besoin d'une réponse urgente. quand l'absorbance mesurée pour un extrait protéique à tester est trop importante pour rentrer dans cette gamme c'est-à dire que la valeur est supérieure à la valeur max de la gamme, (ex.  [...] ma gamme se termine à une DO de 0.2OO et on cherche une quantité protéique pour une DO de 0.500), comment fait-on Peut-on extrapoler en divisant la DO par 3 par exemple, on recherche la quantité protéique puis on remultiplie la valeur retrouvée par 3 Merci d'avance.  [...]

[Biochimie] TP activité de la phosphoénol pyruvate carboxylase, calcul vitesse initiale

Alors je suis de nouveau bloquée, on nous demande un peu plus loin de calculer l'activité spécifique de la PEPcarboxylase (en nmoles de PEPcarboxylé par min et par mg de protéines).  [...] J'ai calculé au préalable avec une gamme étalon de la BSA la concentration protéique pour chacune des deux espèces végétales mais je comprend pas ce qu'il faut faire pour calculer l'activité spécifique de la PEPcase.  [...]

[Biochimie] coloration nitrate argent

Mon problème est que je ne visualise pas mes protéines, je vois juste monter le bruit de fond sur le gel. (étant en phase de test je fait migrer de la BSA, et la partie éléctro en elle-même a été validée par coloration au bleu de coomassie).  [...] La révélation des protéines par le nitrate d'argent sur gel d'agarose est apparemment possible ( http.//cat.inist.fr/aModele=afficheN&cpsidt=3248811 ), il reste à savoir si vous utilisez effectivement le bon protocole.  [...]

role de la BSA dans la mesure de la concentration des protéines !!

j'ai lu un article et j'ai tombé sur cette phrase qui dit que la concentration des protéines a été mesuré en utlisant la Bovine serum albumin. j'ai pas compris comment ils ont fait. est ce qu'il y a un nom pour cette méthode parcequ'elle n'est pas mentionnée dans la bibliographie.  [...] En fait, cette méthode sert à quantifier des protéines inconnues en utilisant des protéines avec des concentrations connues à l'instar de la BSA. Avec cette derniére, tu crées une certaine plage de concentrations de sorte de pouvoir trouver la concentration de ta protéine inconnue en extrapolant les D.O.  [...]