• Santé - Boîte, Bactéries, ADN

[2nde] L'ADN...

Résultat du transfert d'ADN. La protéine GFP rend fluorescente les organismes dans lesquels elle est présente, lorsqu'on les soumets aux rayonnements ultraviolets. Sous une lumiere normale, il apparaît autant de colonies de bactéries dans les 2 boîtes ( ci-dessus il y à 2 boites, une boîte témoin et une boîte experience ).  [...] Puis on mélange la suspension de bactéries avec l'ADN en solution, ensuite on place la pipette dans une eau à 42O. Choc termique puis le milieu de culture est vesré dans le tout et on dépose dans une boîte...puis on étale les bactéries.  [...]

[Biochimie] Question sur la biotechnologie

En bio moléculaire, on parle de clones souvent pour parler de gènes. En gros on a un gène lambda, on l'insère dans un vecteur (grosso modo un ADN avec des gènes de machinerie d'expression ) et ensuite on insère ledit vecteur dans une bactérie pour faire multiplier le gène, par les divisions cellulaires successives, les cellules bactériennes issues de la même cellule mère étant sur le papier, identiques.  [...] Dans une banque tu as de nombreux clones différents. Ceux identiques sont ceux qui forment une colonie (=un clone) sur ta boîte (car il faut des millions de bactéries pour former quelque chose de visible à l'oeil nu). Sur une boîte de Petri tu peux avoir des centaines de colonies qui correspondent à un fragment d'ADN unique au sein de la banque.  [...]

[Biotechnologie] PCR Vs Mini-prep (faite vos paris...)

En faite on fabrique un vecteur recombinant avec 3 inserts de taille différente. On transforme des bactéries et on les cultives sur boite de petri et l'on regarde le phénotype (les fragments d'ADN s'insert dans LacZ' dans le vecteur pUC19). Ensuite on extrait les plasmides pour faire une PCR et on fait en même temps une mini-prep pour comparer les résultats.  [...] En faite après avoir fait la transformation des bactéries par les différents vecteurs recombinant on sélectionne une colonie de l'on récupère avec un cône de pipette que l'on plonge ensuite dans le milieu à PCR et ce même cône on le plonge après dans le milieu de culture pour la mini-prep.  [...]

Hybridations plasmides et sondes

je pense que tes plasmides étaient dans ta boite de pétri initiale dans laquelle il a aussi des bactéries sinon ca sert à rien et que ces plasmides étaient dans ces bactéries et que tu nous présente un protocole d'extraction d'ADN plasmidique.  [...] pour faire court tu construit un acide nucléique qui pourra etre ensuite encapsidé. Le phage est alors mis en présence de bactéries et il agit alors comme tout bon virus en injectant son ADN à l'intérieur de la bactérie qu il rencontre. Il présente l'intéret d'être un système d'injection propre tandis que avec les plasmides c'est un peu plus délicat.  [...]

PCR sur colonie après insertion chromosomique... ?

Tu n'es jamais sur de ce qu'il y a dans tes boites, il y a de nombreuses bactéries possédant des résistances antibiotiques, pour peu que tu ais manipulé du mieux possible mais qu'une bactérie qui ne vienne pas de ton étalement se soit retrouvé dans ta boite de pétri, tu as peut être une bactérie résistate a la kanamycine et qui ne vienne pas de ce que tu as transformé, qui se soit retrouvé en culture.  [...] deuxièmement, les mutations spontanées ça arrive, alors même si tu était en milieu stéril ++ et qu'aucunes bactéries externes ne s'est retrouvée dans ta boite, il y a tout de même un risque (très faibles, certes) que une de tes bactérie electroporée mais pour laquelle la transformation aurait pas réussi (donc qui ne contiendrai pas ton gène) se retrouve spontanément résistantes à la kanamycine (sans lien avec les résistances que tu insère avec ton ADN linéaire).  [...]

[Divers] Bactéries

Ca veut dire que tu dilues 10 5 fois ta culture de départ. On fait des dilutions de 10 en 10 pour voir à partir de quelle dilution il est possible de compter les bactéries sur la boîte. Parce que si tu dilues pas assez tu auras trop de bactéries pour pouvoir les compter.  [...] Et je t'assure que diluer 10 5 fois n'est pas de trop... Si tu a quelques millions de bactéries dans ta culture de départ, il faut au moins diluer 10 5 fois pour avoir quelques colonies sur ta boîte (on m'a dit que le nombre devait être de 30 à 300 colonies sur une boîte pour que ce soit acceptable ).  [...]

[Microbiologie] dilution et colonies de bactéries

Imaginons que l'on prenne 5ml avec une concentration de 10^8 bactéries/ml. On dilue en prenant chaque fois 0.5 ml ce qui donnera dans le prochains tubes 10^7 bactéries/ml, 10^6, 10^5 etc. On fait cela jusqu'à 10^3 bactéries/ml.  [...] Prenons maintenant un exemple. En étalant 0.1ml de la suspension du dernier tube de dilution sur une boîte (celui ou il y avait 10^3 bact/ml), nous observerons 100 colonies après incubation de la boîte. comment remonter à la concntration de bactéries dans ce tube.  [...]

[Biotechnologie] Concrètement c'est quoi une banque d'ADN

Par exemple, une boite de pétrie, dans laquelle il y a des souches bactériennes ayant incorporées des séquences d'intérêts, peut elle être qualifié de banque d'ADN.  [...] L'utilisation du vecteur Bac (bacterial artifical chromosome) qui permet d'integrer un graaand bout de génôme. Son petit truc en plus Elle possède le gène par permettant la bonne division de la bacterie dans deux cellules filles.  [...]

Chez les bactéries, il faut choisir entre nager et se protéger !

Les scientifiques ont posé des cellules de Pseudomonas aeruginosa au centre d'une boîte de Petri qu'ils ont placée dans un incubateur pendant 24 heures. Les bactéries se sont alors développées sous l'aspect d'un flocon de neige, ce qui est caractéristique de bactéries capables de former un biofilm.  [...] Ils ont alors prélevé un peu de ces bactéries et les ont disposées au centre d'une nouvelle boîte pendant 24 heures. Cette expérience a été répétée plusieurs fois de suite.  [...]

Nanotechnologies : une boîte faite de molécules d'ADN !

L'équipe a nettement dépassé le stade des petits dessins en réalisant une structure en trois dimensions et, qui plus est, un dispositif articulé. A partir de brins d'ADN viral et de 220 courtes séquences, les chercheurs ont obtenu une boîte cubique. Les petits brins se sont associés comme prévu à l'ADN viral car leur succession de bases a été déterminée précisément, à l'aide d'un ordinateur, pour qu'ils se fixent aux bons endroits sur le brin viral.  [...] Kjems pense également à l'électronique ou du moins à un système informatique. Puisque la boîte se présente sous deux états différents (ouverte et fermée) et que le passage de l'un à l'autre dépend de la présence de deux facteurs (les brins d'ADN complémentaire lâchés dans le milieu), elle se comporte comme une porte logique Et.  [...]