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[Biologie Moléculaire] Taux d'expression de gènes et fonction des protéines...

Suite à une expérience incluant un traitement A et un traitement B sur des animaux, je travaille sur l'expression de gènes qui codent pour des protéines dont la fonction est connue. Je trouve des différences significatives entre les taux d'expression de gènes des individus ayant subi le traitement A et ceux ayant subi le traitement B.  [...] Ces taux d'expression sont bien plus importants dans une condition que dans l'autre. Or, quand je mesure ce que devrait avoir produit les protéines qui m'intéressent (=synthèse d'une coquille), je ne trouve aucune différence de croissance de la coquille entre les deux traitements.  [...]

[Biologie Moléculaire] Expression de protéines grâce au pGEX. DH5alpha ou BL21?

Conclusion. On peut produire des protéines en DH5alpha grâce aux vecteurs pGEX. Cependant la dégradation induite par les protéases ne semble pas négligeable. Le represseur LacI q du vecteur n'eteint pas totalement l'expression du gène chimère. Peut être un problème à prendre en considération pour les protéines toxiques.  [...] A priori pas de codon particulier. La conformation réelle de la protéine est inconnue, elle n'est homologue a aucune autre. Mon but est justement d'aller vérifier certaines hypothèses quant à sa structure/fonction.  [...]

[Biologie Moléculaire] Expression hétérologue de protéine : vecteur baculoviral

Je fais déjà une production cytoplasmique chez coli. Si je mets du KI c'est justement pour éviter au maximum les corps d'inclusion. Outre la structure, il me faut la protéine en forme pour les études fonctionnelles Donc, si je dois choisir entre jongler avec un tas de solutions chimiques qui l'agressent et jongler en bio mol pour la faire produire dans des cellules plus adaptées, je préfère la seconde solution.  [...] 107 kDa, c'est très gros pour une expression en bactérie. Parfois ça marche mais en général ça finit en corps d'inclusion ou en protéine non exprimée. Le passage en baculovirus me semble inévitable dans ton cas.  [...]

[Biologie Moléculaire] augmentation expression et diminution quantité protéine

En effet, la qRT-PCR me donne une augmentation de l'expression de mon gène et le dosage de la protéine me donne une diminution de la quantité de cette protéine.  [...] Hehe, grand classique. J'ai la même chose en ce moment. -40% de messager entre deux conditions, mais +200% en protéine. Il faut envisager des mécanismes qui modifient la stabilité du messager, la durée de vie de la protéine, des mécanismes de régulation de la traduction, etc.  [...]

[Biologie Moléculaire] augmentation du taux d'ARN mais non celui de la protéine

Je ne l'ai jamais fais donc je ne sais pas si ca fonctionne bien mais une astuce pour faire le tri serait d'utiliser un ARNi/morpholino antisens à ton ARNm pour faire un IHC sur tes cellules mutantes pour ta protéine. Le contrôle d'inhibition de l'expression de l'ARN endogène serait un northern ou une qPCR.  [...] Le phénomène se reproduit il dans une autre lignée Que se passe t il lors de la transfection avec un vecteur d'expression pour cette protéine.  [...]

[Biologie Moléculaire] [biologie moleculaire] Le code génétique

Car faut pas perdre de vue que purifier une proteine pour la sequencer c'est plus que fastidieux, c'est souvent extremement difficile etant donne le faible niveau d'expression de la plus part d'entre elles (et tu ne peux pas les sur-exprimer puisque tu ne connais pas le gene.). Et le sequençage de proteine ca coute cher.  [...] Ensuite tu oublies un peu vite que l'on ne connait pas la fonction de 10% des proteines presentent dans une cellules... Lorsque le premier genome eucaryote a ete entierement sequences, les chercheurs se sont appercu que par les technique de biologie moleculaire et de genetique et de biochimie, ils n'avaient identifies que 30% des genes (ce qui signifie qu'aucune fonction n'a pu etre attribuee à 70% des genes en laboratoire.  [...]

Cancer

Différencier les cellules cancéreuses des cellules en stress pour une toute autre cause ne se base t'il pas sur des procédés moléculaire ou des protéines spécifiques à certains cancer.  [...] Mais pour comprendre le cancer de façon exhaustive, il s'agit de la biologie cellulaire et moléculaire, c'est à dire le fondement de la vie humaine. 25000 gènes qui codent pour plus de 100000 protéines et soumis à un nombre exponentiel de régulations, qui est en plus un système fortement modulable en fonction de son environnement, et formant des réseaux moléculaires intégrant plusieurs informations à la fois pour donner des réponses biologiques finement régulées.  [...]

[Divers] Différence entre Biochimie et Biologie moléculaire

Si on s'intéresse à la fonction d'un gène au niveau physiologique, c'est plutôt de la physiologie moléculaire. Normalement, la biologie moléculaire reste à une échelle moléculaire tout comme la biochimie, d'ailleurs la biologie moléculaire et la biochimie ont en commun leur échelle supérieure qui est la biologie cellulaire (ou microbiologie pour ceux qui travaillent sur les procaryotes).  [...] Biologie moléculaire. Au sens strict, branche de la biologie qui vise à expliquer les propriétés biologiques des protéines et des acides nucléiques par leur structure moléculaire. Dans le langage courant, le terme se rapporte aussi à toute forme de manipulations de gênes (ex.  [...]

Obésité : amlexanox, le médicament brûleur de graisses

Plusieurs pistes ont déjà été empruntées mais aucune n'a pour le moment débouché sur un traitement miracle. Des chercheurs ont par exemple découvert que la stimulation cérébrale profonde pouvait influencer les comportements alimentaires. Plus récemment, une équipe de microbiologistes a montré qu'en contrôlant la flore intestinale on pouvait prévenir la prise de poids.  [...] Grâce à des techniques de biochimie et de biologie moléculaire, les chercheurs ont montré que chez les souris obèses, la protéine NFKB favorisait l'expression de deux gènes codant pour les enzymes IKK&epsilon. et TBK1. Cette activation réduit la capacité des récepteurs présents sur les adipocytes à répondre aux catécholamines et à brûler les graisses.  [...]

Définition | Western blot - Immunoblot | Futura Santé

Un western blot, ou immunoblot, est une méthode de biologie moléculaire qui permet la détection de protéines spécifiques sur une membrane.  [...] des échantillons protéiques sont déposés sur un gel d'électrophorèse et sont séparés en fonction de leur poids moléculaire. Pour cela, un courant électrique est appliqué dans le gel. Plus les protéines ont une taille importante, moins elles migrent vite.  [...]