• Santé - Biologie moléculaire, Taux, Expression, Fonction, Protéines

[Biologie Moléculaire] Taux d'expression de gènes et fonction des protéines...

Suite à une expérience incluant un traitement A et un traitement B sur des animaux, je travaille sur l'expression de gènes qui codent pour des protéines dont la fonction est connue. Je trouve des différences significatives entre les taux d'expression de gènes des individus ayant subi le traitement A et ceux ayant subi le traitement B.  [...] Ces taux d'expression sont bien plus importants dans une condition que dans l'autre. Or, quand je mesure ce que devrait avoir produit les protéines qui m'intéressent (=synthèse d'une coquille), je ne trouve aucune différence de croissance de la coquille entre les deux traitements.  [...]

[Biologie Moléculaire] Expression de protéines grâce au pGEX. DH5alpha ou BL21?

Par rapport à mon vecteur pGEX5x1 on peut aussi voir qu'il y a de l'expression de protéines même sans induction (contrôle. DH5alpha non transfectées). Au bout de 2h l'induction n'a pas franchement dépassé la production endogène. Au bout de 12h la différence est très nette montrant que l'induction active bien le plasmide.  [...] Conclusion. On peut produire des protéines en DH5alpha grâce aux vecteurs pGEX. Cependant la dégradation induite par les protéases ne semble pas négligeable. Le represseur LacI q du vecteur n'eteint pas totalement l'expression du gène chimère. Peut être un problème à prendre en considération pour les protéines toxiques.  [...]

Obésité : amlexanox, le médicament brûleur de graisses

Plusieurs pistes ont déjà été empruntées mais aucune n'a pour le moment débouché sur un traitement miracle. Des chercheurs ont par exemple découvert que la stimulation cérébrale profonde pouvait influencer les comportements alimentaires. Plus récemment, une équipe de microbiologistes a montré qu'en contrôlant la flore intestinale on pouvait prévenir la prise de poids.  [...] Grâce à des techniques de biochimie et de biologie moléculaire, les chercheurs ont montré que chez les souris obèses, la protéine NFKB favorisait l'expression de deux gènes codant pour les enzymes IKK&epsilon. et TBK1. Cette activation réduit la capacité des récepteurs présents sur les adipocytes à répondre aux catécholamines et à brûler les graisses.  [...]

[Biologie Moléculaire] Système d'expression de prot invitro (cell free)

Je dois produire une protéine grande environ 160 kDa avec un système de production transcription / traduction provenant de mais, homme, lapin et bactérie. Me protéine est une protéine de levure.Voilà ce que je pensais faire.  [...] Ma question est la suivante. Quelqu'un a-t-il déjà utilisé ce genre de kit pour un application similaire (grande protéine - GST - et levure) Si oui lequel avez vous utilisé.  [...]

Antigène

Les protéines recombinantes ne sont donc pas extraite de la nature mais synthétisées en laboratoire. Pour te donner un exemple que j'ai expérimenté, moi en thèse je travaillais sur la protéine d'un parasite très pénible à cultiver. J'aurais jamais pu cultiver assez de parasites pour ensuite faire 50 étapes d'extraction/purification pour arriver à un excellent taux en ma protéine d'intérêt dans mon échantillon, et en quantités acceptables pour mes manips.  [...] Du coup, j'ai fait exprimer ma protéine d'intérêt à une bactérie (E. coli). elle se cultive très facilement et je peux lui faire produire ma protéine en très grande quantité. C'est ce qu'on appelle le clonage moléculaire. Grâce à la transgenèse. Après expression de la protéine, je dois la purifier pour me débarrasser de tout ce qui appartient à la bactérie et me retrouver avec un taux idéalement avoisinant 100% de ma protéine d'intérêt.  [...]

[Biologie Moléculaire] cdk

Je crois que le taux de cyclines varie au cours du temps et permet d'adapter le passage des checkpoint. En revanche le taux de cdk reste identique. Et leur expression est régulée par des protéines d'association.  [...] Donc selon la cycline associée à une CDK, des protéines bien spécifiques seront phosphorylées, des protéines qui doivent intervenir à une étape précise. On comprend alors mieux (cela ne regarde que moi), comment la succession de cyclines coordonne si bien l'avancée dans le cycle.  [...]

[Biochimie] GDP-mannose...

Je viens de m'inscrire ici car je cherche à faire appel à vos lumières au sujet d'une traduction de l'anglais d'un nom de molécule.  [...] Ayant fait pas mal de biologie moléculaire et de biochimie dans ma vie d'étudiante je n'ai jamais entendu cette expression.  [...]

[Biologie Moléculaire] rrnB plasmide pMALc2x

Petite question de biologie moléculaire, j'ai ajouté mon gène d'intérêt dans le vecteur pMALc2x afin de produire ma protéine avec le tag MBP. Le promoteur est le promoteur tac inducible par IPTG pas de problème, mais à quoi correspondent les régions rrnB ce serait des terminateurs, mais pourquoi je ne les ai jamais vu sur les autres vecteurs d'expression type pET par exemple et surtout qu'est ce que cela apporte de plus, pourquoi avoir choisit un terminateur qui se compose de 2 régions.  [...]

[Biologie Moléculaire] augmentation expression et diminution quantité protéine

En effet, la qRT-PCR me donne une augmentation de l'expression de mon gène et le dosage de la protéine me donne une diminution de la quantité de cette protéine.  [...] Hehe, grand classique. J'ai la même chose en ce moment. -40% de messager entre deux conditions, mais +200% en protéine. Il faut envisager des mécanismes qui modifient la stabilité du messager, la durée de vie de la protéine, des mécanismes de régulation de la traduction, etc.  [...]

[Génétique] C'est inscrit dans les gênes

Les peptidases interviennent dans la digestion pour dégrader les protéines issues de l'alimentation. D'autres protéines interviennent dans la régulation de l'expression des gènes. tous les gènes d'un organisme ne sont pas exprimés partout ni tout le temps, ils peuvent s'exprimer au cours du développement embryonnaire uniquement, dans certains types cellulaires seulement (c'est ce qui explique que tes neurones et tes cellules sexuelles ou cardiaques soient différentes).  [...] ps. certains ARN sont dits non codants' en ce sens ou ils ne sont pas traduits en protéines mais possèdent d'autres fonctions, notamment la régulation de l'expression génétique, ou l'inactivation d'un chromosome X sur deux chez les femmes. Et j'ai oublié de préciser que le mécanisme moléculaire qui permet de synthétiser une protéine à partir de la séquence d'un ARN s'appelle la traduction.  [...]