• Santé - Biologie moléculaire, Mesure, Préparation, ADN

[Biologie Moléculaire] Mesure de pureté d'une préparation d'ADN aberrante?

[Biologie Moléculaire] Mesure de pureté d'une préparation d'ADN aberrante.  [...] C'est le premier TP où on prépare nous même de l'ADN, d'habitude il nous est donné tout prêt, donc une mauvaise manipulation est plus que probable en effet.  [...]

[Biologie Moléculaire] Préparation des PCR à l'avance?

Je dois cribler une banque de mutants en utilisant la pcr (un primer dans la region constante de mon tag et le second dans la partie variable et il y a 48 tags différents). Ayant plusieurs milliers de pcr à faire je souhaiterais préparer à l'avance mon mix (taq, dntp, eau, buffer et un primer commun à toutes les réactions) et le dispatcher en plaque 96 puits pour ajouter au dernier moment uniquement l'ADN et le second primer.  [...] mais savez vous pour quelle raison on vous a dit qu'il ne fallait jamais faire ça car si tout le monde prépare ses mix extemporanément il doit y avoir une raison mais je l'ignore.   [...]

[Biologie Moléculaire] Préparation de Solution Tris-HCL

La Qst est comment préparer une solution de Tris HCL 1M à Ph = 7.5 sachant que M = 121.14 g/mol.   [...] j'ai fait ci vi = cf vf avec cf = 1M et vf = 1000 ml et ci = 0.2M alors on cherche vi, mais on utilise pas la masse molaire M = 121.14 g/mol.   [...]

[Biologie Moléculaire] Préparation d'un tampon pour une PCR

[Biologie Moléculaire] Préparation d'un tampon pour une PCR.  [...] Juste pour le détail, le triton est un produit très visqueux. Ce que l'on fait en général c'est que l'on prépare un grande volume (50-100 ml) d'une solution stock de triton 10% ou 5%. Ceci afin de pouvoir mesurer plus facilement et plus précisément le volume de triton.  [...]

[Biologie Moléculaire] préparation d'une solution de phénol

bonjour, j'ai lu les postes qui ont traité la question du phénol mais ma question demeure sans réponse, je compte faire une extraction d'ADN à partir de cellules fongiques et j'ai buté pour la préparation du phénol, j'ignore avec quoi il doit être dissout et à quelle concentration, je cherche de mon coté mais si quelqu'un peut m'orienter ce sera chic.  [...] oui, je crois qu'il y a intérêt à suivre votre conseil, en fait je voulais gagner du temps et le préparer sans attendre notre fournisseur. merci beaucoup, c'est vrais que je manque d'expérience je plus à l'aise avec mes champignon avec toute leur intégrité moléculaire j'aurais souvent à vos sollicité au cours de mes manipulations.  [...]

[Biologie Moléculaire] Préparation d'un buffy coat ?!!!

je cherche une solution pour préparer un buffy coat à partir d'un échantillon de sang. Mon problème réside plus particulièrement dans le choix des paramètres à utiliser lors de la centrifugation.   [...] J'avais besoin d'aide pour la préparation d'un buffy dans le bur d'obtenir une bonne concentration d'ADN après extraction (comprise entre 25 et 50 microgrammes/200microlittres, ce qui correspond à 125-250nanogrammes/microlittres).  [...]

Acides Nucléiques

L'ADN est chargé négativement. La séparation se fait en fonction de la taille des fragments qui diffère d'un seul nucléotide entre chaque bandes les plus proches visible sur le gel.  [...] Salut. Au moment de la migration, la charge est identique pour chaque fragment d'ADN car la préparation de ton ADN pour l electrophorese sert justement a masquer la charge réel de tes fragments afin que ces derniers aient tous la même charge fictive et migrent uniquement selon leur poid moléculaire.  [...]

[Biologie Moléculaire] Préparation de solutions d'oligonucléotides lyophilisés

[Biologie Moléculaire] Préparation de solutions d'oligonucléotides lyophilisés.  [...] Je suis un peu perdue car d'un côté j'ai l'impression qu'il y a des infos inutiles (qu'est-ce qu'on peut déduire de la DO sans la longueur de la cuve et le coefficient d'extinction molaire ), et d'un autre côté je me demande s'il ne manque pas autre chose (volume final des solutions à préparer ).   [...]

[Biologie Moléculaire] preparation de phenol saturé par le Tris

[Biologie Moléculaire] preparation de phenol saturé par le Tris.  [...] bon ma question c'est à propos de la préparation de phénol saturé par le Tris.je sais qu'on l'utilise dans l'étape de.  [...]

[Biologie Moléculaire] Preparation d'une gamme étalon ou standard pour PCRq

relier ton Ct aux Ct d'ADN de concentration connu je ne suis pas sur que cela puisse se faire puisque x ng ou x nmol ne représente pas une quantité de transcrit (selon la taille des fragments), en plus de ca, dans les quantifications, les nucléotides libres sont aussi pris en compte, les primers aussi.  [...] Oui je sais a quoi correspond le code dégénéré, (enfin... pas par coeur ^^) mais c'est vrai qu'en biologie classique c'est plutot risqué, mais je n'avais pas vu que tu faisais de l'environnemental, effectivement si tu cherche non pas la sequence d'un individus mais de tout un ensemble, la souplesse qui est souvent négative dans l'utilisation des primers dégénérés deviens ici un avantage.  [...]