• Santé - Biologie moléculaire, Extraction, ARN

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN total sur fourmi unique

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN total sur fourmi unique.  [...] De plus, le culot d'ARN est d'une couleur marron très foncé. J'ai essayé de purifié avec une colonne de kit, mais le problème ne s'améliore pas, alors que ça marche sur d'autres organismes. Je suppose que mon problème provient de la cuticule de la fourmi (je filtre mes échantillons sur colonne Qiashredder pour éliminer les gros débris avant la séparation de phase), et j'aimerais savoir si vous aviez des idées pour améliorer mon protocole.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction protéique/ARN du foie (souris) avec Omni bead Ruptor

[Biologie Moléculaire] Extraction protéique/ARN du foie (souris) avec Omni bead Ruptor.  [...] Je suis assistante ingénieur en Biologie. Nous avons reçu un nouveau Homogéneiseur à billes bead ruptor 12 avec lequel nous voulons réaliser des extractions ARN et proteique sur le foie sauf que nous avons aucune idée du programme et la vitesse qu'il faut utiliser (en gros le protocole de la machine).  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction des ARN par la méthode phénol/chloroforme

[Biologie Moléculaire] Extraction des ARN par la méthode phénol/chloroforme.  [...] Le seul rôle que je connais pour le chlorure de césium, c'est la centrifugation par gradient mais ce n'est pas une obligation pour une phénol / chlo.   [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN ethanol 70%

Je prépare des TP de biologie moleculaire à la fac, dont un sur l'extraction des ARN. Après avoir extrait l'ARN des cellules avec du TRIZOL, on obtient 2 phases, la phase organique (phase inferieure avec phénol et chloroforme) et une phase aqueuse avec les ARN.  [...] De façon un peu plus moléculaire, l'ADN précipite car il n'est pas soluble dans l'alcool car celui-ci le déshydrate, tandis que les sels que l'on ajoute pendant l'extraction neutralisent les charges négatives de l'ADN (l'apport de charges positives permet la création de solides).  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction des acides nucléiques

J'ai un petit problème en TP de biologie moléculaire, c'est lors de l'extraction de l'ADN et de l'ARN. Mes questions.  [...] 2-pourquoi on utilise ph basique lors des extraction des acides nucléiques.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction de l'ARN+ RT-PCR

Je suis nouvelle dans le domaine de la biologie moléculaire. Je vais faire l'extraction de l'ARN à partir des biopsies et des cellules pour faire par la suite une RT-PCR. Je n'arrive pas a choisir le Kit d'extraction d'ARN et de la RT-PCR. En se basant sur votre expérience pouvez vous me recommender les kit qui me permettent d'extraire mon ARN (en bonne qualité) et pour faire ensuite RT-PCR.  [...] Je connais quelqu'un qui utilisait le kit de MP (ex-Qbiogen) Pro RNA avec la machine FastPrep, réputée pour sa grande efficacité dans la lyse des tissus les plus robustes, pour obtenir des ARN de cellules de poumons et autres tissus humains. Les ARN obtenus sont de bonne qualité (Confirmé par analyse Agilent) et en bonne concentration, les protocoles rapides (moins qu'une colonne par contre) et on peut faire des analyses transcriptionelles précises derrières.  [...]

[Biologie Moléculaire] DNAse est elle essentielle à l'extraction d'ARN (pour qPCR)

Je fais une extraction trizol-bcp puis je précipite à l'isopropanol, puis à l'éthanol.Je resuspend dans de l'eau. Je traite à la Dnase Rq1-Buffer puis je reprécipite à l'isopropanol puis l'ethanol et hop mon culot est transparent, tout petit et je fais tout à l'aveuglette.  [...] Oui quand j'en faisais après une extraction phénol chloroforme (et oui c'est surement la pire manip de bio mol), le traitement DNase était fait après. donc je dirai que oui.  [...]

Extraction du plasmide

EUh oui désolé j'avais a l'esprit inhibiteur de RNase dont on se sert souvent en biologie moléculaire, je venais juste de finir une extraction ARN avant de rentrer chez moi et voir cette question, ^^, c'est effectivement pour avoir juste de l'ADN, merci pour la rectification.  [...] Je connais pas tous les kits, mais je sais qu'en général l'ADN est fixé sur la colonne en présence de fortes concentrations en sel, du coup j'aurai tendance à dire que le tampon d'élution va permettre de diminuer les concentrations en sel pour que l'ADN se décroche et retombe dans ton tube (comme la gentille petite molécule qu'il est.).  [...]

[Biologie Moléculaire] biologie moléculaire

Bonsoir, en biologie moléculaire nous avons étudié l'extraction de l'ADN, l'ARN et des plasmides. Bon l'ADN c'est facile mais l'ARN et les plasmides ça n'est pas très claire, j'ai fait des recherches sur le net mais ça ne m'a pas vraiment aidé,si il y en a parmi vous qui aimerait bien m'expliquer comment se font ces 2 extractions, je leur en serais très TRES reconnaissante.  [...] Les deux techniques les plus employées en laboratoire pour extraire de l'ADN plasmidique (je ne sais pas s'il y en a d'autres) sont. l'extraction au phénol-chloroforme et l'extraction à l'aide de kits industriels, type OMEGA, Sigma-Aldrich...etc. La première permet de récupérer une plus grosse quantité d'ADN plasmidique que la seconde, mais est plus délicate à réaliser.  [...]

[Biologie Moléculaire] protocole extraction ARN (pas de kit, ni trizol)

Essaye un protocole d'extraction d'ADN classique, lyse avec un détergeant, puis précipitation a l'alcool. Si tu manipules proprement alors tu auras de l'ADN et de l'ARN.  [...] J'ai fait des extractions d'ARN dans ma jeunesse avec du phénol Chloroforme-alcool isoamylique mélange 1/1 et ça marchait très bien. Problème c'est long, assez lourd et les quantités récupérées sont certes impressionnantes mais pas reproductibles.  [...]