• Santé - Biochimie, Conservation, Milieux de culture

[Biochimie] Conservation des milieux de culture cellulaire

Les milieux de culture les plus utilisés (DMEM et RPMI) sont colorés au rouge de phénol qui est jaune à pH acide (provoqué par le métabolisme des cellules en culture) ou violet (provoqué par la dégradation de la glutamine au cours du temps, ce qui génère de l'ammoniaque qui est basique).  [...] Ainsi, en regardant la couleur du milieu, on peut savoir à peu près quel est son état. D'ailleurs faire chauffer de manière prolongée le milieu de culture au bain-marie juste avant la culture a pour effet d'accélérer la dégradation de la glutamine et le milieu vire plus vite au violet.  [...]

Durée de conservation de milieux de culture type MS ou GAMBORG

Durée de conservation de milieux de culture type MS ou GAMBORG.  [...] A partir du moment où il est autoclavé, j'aurais tendance à dire plusieurs mois tant que tu ne dépasses pas la date de péremption du MS stock (si tu en utilises).   [...]

[Biochimie] conservation des protéines en milieu aqueux

Dans le cadre d'un TIPE, je réalise une expérience mettant en jeu des solutions eau-protéines (type albumine). J'aimerais être sûre que la concentration en albumine (initialement faible) de la solution soit toujours la même quelques heures plus tard, en sachant que l'eau utilisée est celle du robinet et que, par conséquent, elle contient des bactéries.   [...] en fait je souhaite juste conserver ces protéines en solution pour réaliser des dosages. Le problème est que les dosages ne pourront être réalisés que quelques heures après l'expérience... par conséquent, il me parait important de savoir si la dégradation des protéines aura déjà commencé.   [...]

[Microbiologie] milieux de culture

merci bcp, au fait je voulais dire pour combiens de tmps peut -on conserver des milieux de culture liquide déjà préparés. voilà.  [...] Concernant la conservation des milieux liquides, il a déjà été répondu que tout dépend de la recette milieu en simplifiant. Certains ont des ingrédients fragiles hautement prisés par les contaminants de tout poil, ou qui résistent peu aux conditions de préparation (mais suffisamment pour qu'on n'en perde pas la totalité).  [...]

[Biologie Cellulaire] solution congélation 90%SVF 10%DMSO

biensur, moi quand je sais que je pars pour une semaine de congélation, je me fais 500 mL de milieu de cryoconservation (moi c'est 80% SVF et 20% DMSO, mais bon sa marche aussi pour toi je pense). Et donc je stock à 4°C et je le sors quand j'en ai besoin. Mais je le garde toujours à 4°C au frigo ou en glace quand je l'utilise.  [...] Est ce un milieu de cryoconservation pour des cellules eucaryotes doit être différent pour des cellules bactérienne (Je vais congeler E.coli, en pensant que le glycérol trop visceux est fortement déconseiller dans mon cas.).  [...]

[Microbiologie] Streptomyces

Merci pour ta reponse Katie, mais en fait quand je parlais de conservation c etait dans le sens laisser dormir, arreter la croissance... Je me suis peut etre mal exprime.  [...] Maintenant en ce qui concerne la conservation oui il vaut mieux les mettre au frais afin d'éviter toute contamination du milieu de culture.  [...]

Culture cellulaire les détails

Et je ne comprends rien aux notes que mes amies ont prises, tout ce que j'ai compris c'est qu'on fait la culture cellulaire pour pouvoir avoir des cellules à porter de main pour l'analyser, il faut d'abord l'isoler puis le mettre dans un milieu adéquat. pH, température, facteurs de croissance, hormones dont l'oestrogène stimule la mitose.  [...] Et aussi, la conservation de ces cellules cultivées par cryoconservation, et la culture de cellules immortelles (enfin j'arrive pas à lire les notes).  [...]

[Biochimie] Conservation ADN à température ambiante

Sachant qu'il ne fait pas très chaud ces derniers jours, je voulais savoir s'il était possible que mon ADN ne soit pas complètement foutu.   [...] Si la PCR n'est pas trop grande (disons. 1-1.5Kb) oui, cela est tout à fait envisageable. Au delà il y a peut être un risque que les coupures soient trop nombreuses. Cela dit je le tenterais quand même (mettons jusqu'a 2kb.   [...]

[Biochimie] conservation d'echantillons au long terme

[Biochimie] conservation d'echantillons au long terme.  [...] je travaille sur le cancer colorectal, au temps normal je récupère mes colons dans de l'eau physiologique et je les conserves à -40°...sauf que je les utilises dans l'immédiat. Je voudrai conserver mes echantillons au long terme (l'indisponibilité de certain réactifs m y oblige) J'ai la possibilité de les conserver dans de l'azote liquide.   [...]

[Biologie Moléculaire] purif des proteines recombinantes apres coupure au facteur X

Non pas de meilleure idée. Un centricon YM20 me semble bien pour éliminer l'imidazole. Si vous voulez bien tout éliminer il suffira de compéter en buffer quelques fois avant de récupérer votre fraction (sans assecher la colonne bien entendu). J'imagine que l'on peut aussi faire ça en dialyse mais je ne l'ai jamais fais en pratique, je ne vous le conseillerai donc pas.   [...] mais j'ai eu un probleme au niveau de la conservation des clones utilisés (cryoconservation dans le glycerole à -80°C), quand je relance une culture (peu de temps apres) à partire du glyerole (le glycerole est fait à partire de la préculture dans laquelle je n'ai pas encore mis l'IPTG), là c'est surprise mes bacteries poussent (dans un milieu LB Ampicilline) mais ils produisent moins la proteine (on dirai qu'elles perdent l'induction par l'IPTG) est ce qu'il y a quelqu'un qui a deja eu ce genre de probleme.  [...]