• Santé - Bande, Protéine, Résultat, Exposé, Bactérie, Témoin

[Biologie Moléculaire] difference de detection

je voudrais savoire aussi pourquoi je ne vois pas tres bien voir pas du tous la bande de la proteine recherché sur resultat gel exposé au bleu de coomasie alors que la bacterie a étè induite alors que pour le temoin + QUI LUI AUSSI A étè induit on la voit trés bien.  [...] on a ensuite preparé 2 TUBE DE 15 UL davec ajout de 5 ul de bleu de charge POUR FAIRE DEUX GEL.UN EST EXPOSé a la coloration coomassie et lautre pour faire le transfere.Le problème est que pour les résultats au comassie on voit rien.c'est a dire pas de bande pour notre protéine qui normalement devrait être surexprimé.  [...]

[Biochimie] Comment lire et interpréter un Immunoblot ?

Les bandes d'actine ont un rôle de témoin. Par exemple, pour pouvoir comparer les deux conditions dans le gel A il faut que les deux bandes d'actine est la même intensité (ce qui veut dire que les quantités de protéines sont a peu près égales entre les deux conditions).  [...] actin. c'est le témoin de charge qui permet d'estimer l'intensité de chaque bande et d'évaluer le niveau d'expression de chaque proteine.  [...]

[2nde] L'ADN...

Résultat du transfert d'ADN. La protéine GFP rend fluorescente les organismes dans lesquels elle est présente, lorsqu'on les soumets aux rayonnements ultraviolets. Sous une lumiere normale, il apparaît autant de colonies de bactéries dans les 2 boîtes ( ci-dessus il y à 2 boites, une boîte témoin et une boîte experience ).  [...] Mais en fait les 2 boîtes proposent le même nombre de bactéries, en fait tout ceci est le résultat d'une éxperience du principe de réalisation d'un transfert d'ADN dans un laboratoire de recherche, au départ on a une suspension de bactéries. On verse une solution perméabilisante dans un culot de bactéries.  [...]

[Biochimie] Ratio de Western Blot

En western blot, après quantification, on ne peut comparer deux bandes entre elles que s'il s'agit de la même protéine, révélée par le même anticorps primaire et secondaire et que la quantification est normalisée par le témoin de dépôt.  [...] Pour ton exercice, tu ne précises pas si les bandes comparées concernent la même protéine donc difficile de te répondre. Est-ce que le témoin E-cadherin bouge entre les deux pistes.  [...]

[1ere S] L'importance de l'électrophorese

Pour être un peu plus précis, des molécules différentes, aux caractéristiques différentes, ne se déplacent pas de la même manière sur la bande. Certaines iront plus loin que d'autres. En cessant leur migration, chaque type de molécule laisse une tache à un certain niveau de la bande, ce qui permet son identification par rapport à une bande témoin.  [...] cette méthode se prète bien à la séparation de différentes protéines dans un mélange et/ou leur identification à partir de témoins dont on connait les caractéristiques de la migration.  [...]

[Biologie Moléculaire] augmentation du taux d'ARN mais non celui de la protéine

les extraits en WB sont des extarits de protéines totales pour chacun des traitements, pour le témoin positif et négatif. en WB je vois une grosse bande en 20% svf et rien dans les traitement.  [...] Par rapport au paradoxe des résultats, ce ne serait pas la premiere fois qu'un ligand active la dégradation d'un messager ou de sa protéine alors que l'on note une légère augmentation de la trancription. En fait, concernant l'ARNm tout réside dans ce qu'elle appelle taux d'ARN (voir mon post précédent).  [...]

[Biochimie] extraction protéine d'une huile ou d'une cire pour quantification

l'huile étant insoluble dans l'eau il m'est impossible de solubiliser le peu de protéines présents, (je tiens à préciser que le dosage est réalisé sur des quantités exprimées en ng de protéines/mg d'échantillon) donc j'ai très peu de matière.  [...] Cela ma permis d'obtenir des début de résultat mais, mon extraction témoin ne ma permit de récuperer que 40% de mon ajout protéique.  [...]

Sida : le dépistage du VIH | Dossier

Le western blot est une technique très utilisée en biologie. Elle consiste à séparer les protéines d'un échantillon en fonction de leur taille par électrophorèse. Dans le cas du VIH, cette méthode est utilisée et recommandée pour confirmer un test Elisa positif, mais aussi pour déterminer si l'infection est due au VIH-1 ou au VIH-2, sachant que les traitements sont un peu différents.  [...] En faisant migrer les protéines d'un échantillon sanguin par électrophorèse sur un gel de polyacrylamide et en comparant avec une bande témoin, on peut mettre en évidence plusieurs protéines virales, telles la gp120, l' intégrase ou les sous-unités de la transcriptase inverse.  [...]

[Biotechnologie] L'ADN mystère !!!

s'il s'agissait d'une contamination de l'un des réactifs, on aurait cette même bande pr ts les autres puits, ce ki n'est pas le cas, celles des échantillons étant largemt + faibles. Et s'il sagissait d'une contamination entre tubes test et tube témoin, l'intensité aurait été plus faible ou au pire identik à celles des tubes test.  [...] Elle est d'environ 240 pb qq (comme celle du test). J'ai demandé, mais le coût du matériel et des réactifs a refroidit la curiosité de mes partenaires lol et surtout du prof. du coup on en est resté sur le fait ke si c'était l'un des réactifs contenus dans le témoin, on aurait retrouvé la bande dans les tests vu kon avait utilisé les mm réactifs (y compris l'eau stérile).  [...]

[Microbiologie] Quelle souche d'E.coli pour préparer des cellules compétentes?

On utilise aussi souvent les BL21 quand on veut faire des inductions d'expression proteiques par l'IPTG (certaines protéases sont inhibées dans ces bactéries). Elles poussent pas mal.  [...] La compétance est à tester sur boite en transformant les bactéries avec une quantité donnée d'un plasmide temoin. En général, par cette méthode on a un résultat qui va de 10 5 à 5.10 6. ce qui est largement suffisant pour vos besoins.  [...]