• Santé - Bande, Migration, Puits

[Biochimie] Effet glycérol sur protéine (SOD)

J'ai effectué une migration de superoxide dismutase (SOD) provenant de différentes plantes... J'ai ajouté un tampon de sulubilistation modifié (plus de glycérol que le TS classique) dans deux puits contenant de la SOD de tabac, et je remarque une bande de migration beaucoup plus lourde dans ces deux puits, cela peut-il être lié au fait que le glycérol compact, voir cristallise la SOD.  [...] Les puits concernés sont les numéros 6 et 7 (sur l'image mise en lien avec le sujet) sachant que le puits noir à l'extreme gauche contient du kaleidoscope à 15€ les 10µl et qui ressort en noir, dû au MBT qui colore le gel s'il n'y à pas d'activité au niveau de la SOD.  [...]

[Biologie Moléculaire] Electrophorese gel d'agarose

pour faire une electrophorese sur gel d agarose on prend du gel d agarose auquel tu rajoute du bet (bromur d ethidium) on fait un puit dns le gel (dans lequel on mettra l echantillon) on met l ensemble dans une solution (un tempon de migration).  [...] Après migration tu observe une ou plusieurs bandes, tu compare la distance puits/bande à celle de ton ADN à celui du marqueur et tu peu déterminer sa taille.  [...]

[Biologie Moléculaire] élèctrophorèse (ADN)

Donc, si tu n'observes pas de bande dans un puits c'est que le poids moléculaire de l'ADN fragmenté n'est pas dans la fourchette de taille observable par le gel d'agarose calibré (autrement dit, ton ADN est tellement petit qu'il a pu passer a travers ce maille et que lors de la migration, il a carrément quitter le gel en migrant vers une électrode).  [...] Par contre, j'ai du mal m'exprimer, ce que je n'arrive pas à expliquer c'est pourquoi à T0 on voit une migration avec nottament une barre près du puits, à T1 la migration est de même longueur sauf que la barre près du puits apparait moins nettement, et à T2 la migration est bien visible aussi mais il n'y a plus de barre tout près du puits.  [...]

[Biologie Moléculaire] problème migration ARN gel agarose

C'EST EFFECTIVEMENT UNE ERREUR de frappe LE GEL EST BIEN a 1% et j'ai une migration aux UV sans détachement, pas de bandes distinctes, 2 puits emettant la ligne totale de migration aux UV.Quand la photo sera disponible ce sera + parlant.  [...] Mais si on part du principe que l'ARN n'est pas dégradé, alors le mire visible correspond aux ARNm et il faudrait une concentration monstrueuse en ARN total pour que les ARNm donné ce genre d'image.   [...]

probleme DGGE

Je suis actuellement en stage dans un laboratoire d'analyse du sol. J'ai pour but de faire migrer plusieurs échantillons de terre selon des conditions différentes à travers un gel DGGE.   [...] Cependant lors de la migration seul le lader migre (seulement deux bandes...) mais les échantillons se diffusent dans les puits et ne migrent pas.  [...]

[Biologie Moléculaire] PCR: dépôts qui restent dans les puits lors de la migration

Le problème que j'ai est que je ne parviens pas à obtenir de bande à découper sur mes gels (1% agarose dans TAE). mes dépots semblent rester dans les puits, quelque soit la condition considérée.  [...] Piste 3. Controle positif (50ng du plasmide contenant le gène wt). On y devine bien une bande au bon PM, mais celle-ci reste bien trop faible pour être purifiée (et le but est de purifier la bande pour l'ADN patient).  [...]

[Génétique] hybridation adn/adn : technique de southern blot

Ensuite, j'ai effectué une électrophorèse en gel d'agarose à 1%. la migration à duré 1heure environ, à 120volts. Le problème qui se pose est qu'à l'issue de la migration, les fragments des différents puits ont très peu migrés, puisqu'à peine 3 ou 4 bandes sont visibles en haut du gel.  [...] - contaminaton des échantillons (je précise que les cones n'ont pas été changés), mais je ne vois pas en quoi cela expliquerait la faible migration. A moins que dans ce cas là, la présence simultanée de plusieurs enzymes aurait engendré des fragments vraiments minuscules, ce qui expliquerait que ceux ci soit sortis du gel.  [...]

[Biologie Moléculaire] Déterminer la masse d'ADN dans une bande après électrophorèse

Ensuite il y a une extrapolation à faire pour déterminer combien il y a d'ADN dans la bande de marqueur à partir de la quantité de marqueur déposée dans le puits.  [...] On peut alors dire combien il y a d'ADN dans la bande du puits 1 ou 3 de même intensité, et sachant quel volume on a déposé dans le puits, on peut alors savoir quelle concentration on avait dans le tube, et donc la quantité d'ADN qu'on avait à la sortie de la PCR.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de migration électrophorèse (produits bloqués dans les puits)

Je dispose de protiste et les amplifications se déroulent correctement sauf ma dernière PCR où, après migration des produits par électrophorèse (gel agarose 1%, 100V, 1h) j'ai eu comme résultats, de nombreux produits apparemment coincés dans mes puits (voir photo jointe).  [...] Est-ce que la cuve de ton electrophorèse est propre Quand elles sont pas lavées depuis un moment ça peut créer des problèmes de migration.  [...]

[Biologie Moléculaire] électrophorèse en champ pulsé

j'ai coloré avec BET et j'ai bien orienté mon gel mais je vois de la fluorescance sur les puits sans avoir de migration par contre le marqueur de taille a bien migré.  [...] je ne sais pas est ce que c'est probléme d'enzyme condition d'incubation ou pas bien mélanger ou il n y a pas d'ADN déjà (plugs mal préparé) vraiment j'ai peur que ca soit question d'ADN a votre avis la fluorescance qui est dans les puits ca correspond a quoi et pkoi a votre avis il n y a pas de migration.  [...]