• Santé - Bactérie, Quantité, Glycérol

[Physiologie] phage lambda

si on introduit l opérateur droit du phage lambda dans une bactérie dont le milieu de culture contient du glycérol comme seule source de carbone,la protéine CI est elle synthétisée.  [...] mais si on introduit un plasmide contenant (le répresseur de l'opéron lactose(lac I),l opérateur de l opéron lactose (lac OP)et la répresseur de lambda(CI)) dans une bacterie dont le milieu de culture contient du glycerol comme seule source de carbone.  [...]

Carte de restriction d'un plasmide inconnu

Le deuxième problème est la concentration en glycerol. Généralement, les enzymes sont suspendu dans un tampon coupé à 50% de glycerol, afin d'éviter les cycles de congélation/décongélation, qui abimeraient l'enzyme. Cependant, le glycerol est très mauvais pour l'activité de l'enzyme, et communément, ont admet que la quantité d'enzyme (+glycérol) ne dois pas dépasser 10% du volume total de digestion.  [...] Elle ne coupe pas quand il y a méthylation et donc si tu ADN est très méthyler tu peux avoir des problèmes de coupure. Quand on l'utilise pour le clonage dans des bactéries ont utilise des bactéries dites dam- qui ne méthylent pas.  [...]

extraction et séparations des composants d'une membrane

L'éléctrophorèse va effectivement permettre de séparer les protéines (ne marche que pour les molécules chargées), ca pourrait peut etre marcher pour séparer les lipides non chargés des protéines mais ca a l'air difficile à mettre en oeuvre car on la pratique sur un gel avec de petites quantités non Or je recherche un méthode capable de fournir au moins 1 ml de solution de lipides (si ce n'est plus).  [...] Si ton but est de faire une membrane artificielle (sans protéines) le mieux est de partir de faire des phospholipides (glycérol + acide gras en quantité en défaut puis phosphorylation via kinase = ATP... = p-t un peu compliqué) ou une molécules apparentées (amphiphiles).  [...]

[Microbiologie] Congélation de souche

Si tu pouvais préciser au moins le genre ou l'espèces que tu souhaites congeler, il serait plus facile de répondre à ta question car cela dépend de l'organisme étudier. Personnellement pour la conservation de bactérie j'utilise du glycérol à 40% en concentration final, cela suffit amplement à la conserver.  [...] Cependant j'ai pu remarquer qu'une souche bactérienne congeler et conserver aux -80°C de cette manière depuis près de 15 ans avait plus de mal à se reveiller qu'une souche récement congeler.  [...]

[Biologie Moléculaire] Ligation

Comme a dis Franckeeuuhh, as tu bien vérifié la quantité de glycérol dans ton mix réactionnel C'est vraiment critique pour certaine enzyme, dont NotI (moins pour BamHI, qui est plus costaude). En général, on dit qu'il faut un µl d'enzyme pour 10µl de volume total réactionnel (dans le cas où tes enzymes sont resuspendu dans 50% de glycérol). A toi de calculer.  [...] j'ai fait des recherches sur le kit in-fusion. Je pense que je l'utiliserai bien en dernier recours. Avant tout j'ai pas envie de laisser tomber aussi facilement sans savoir ce qui cloche. Aussi j'ai une autre question qui va d'une observation. A chaque fois (plus de 10fois) que j'ai fait des ligations vecteur d'expression pET45b + inserts d'interet (1330bp, 1894bp et 958bp) après transformation des Top10 puis étalement sur boite j'obtient toujours moins de colonies bactérienne dans la transformation effectuée avec l'insert de 1894bp quand bien même j'ai mis la même quantité de vecteur dans chaque produit de ligation.  [...]

Bactérie

il y a de nombreuses couches de peptidoglycane qui représentent jusqu'à 90 % des constituants de la paroi bactérienne. Celle-ci contient aussi un feutrage (10 à 50 % du poids sec de la paroi) d'acides teichoïques (polymères du glycérol ou du ribitol phosphate) associés étroitement au peptidoglycane et faisant parfois saillie à la surface de la bactérie.  [...] il n'y a qu'une seule ou au plus deux couches de peptidoglycane qui ne représente que 5 à 20 % des constituants de la paroi bactérienne. Mais 3 polymères situés en dehors du peptidoglycane viennent compléter la paroi. des lipoprotéines, une membrane externe qui contient du lipopolysaccharide.  [...]

Que deviennent nos nutriments ???

Les triglycérides sont dégradé en glycérol et acides gras. Le gycérol peut être utilisé pour fabriquer du sucre (gluconéogenèse) et les acides gras sont métabolisés directement dans la mitochondrie pour faire de l'ATP (je rentre pas dans les détails...).  [...] Juste, apart pour le glycérol et les acides gras impaires (très petite quantité par rapport aux acides gras paires) qui peuvent se transformer en sucre.  [...]

[Microbiologie] Conservation des germes pathogènes

S'il s'agit de bactérie, le mieux c'est de préparer une suspension fraiche (en phase exponentielle), de prendre 1700µl de cette suspension dans un cryotube, ajouter 300µl de glycérol stérile, mélanger et conserver à -80°C sinon à -20°C. tu gratte un peu chaque fois que tu veux lancer une culture, sans laisser dégeler la suspension. à renouveler ta préparation une fois par an.  [...] le lendemain, dans un tube eppendirf stérile tu mets 200µl de la culture bactérienne et 800µl du glycérol stérile à 100% et tu conserves à -20°C ou dans l azote liquide s'il est disponible dans votre laboratoire.  [...]

[Biologie végétale] plastique amidoné et biodégradation

Je suis en première année de prépa PC et toute la suite concerne mon thème de TIPE.J'ai fabriqué il y-a peu un plastique à base d'amidon et de glycérol. Le glycérol, qui est à l'origine des mes problèmes, est donc le plastifiant. J'ai ensuite cherché à savoir si on pouvait le qualifier de plastique biodégradable en réalisant notamment l'expérience de Sturm qui m'a permis de mesurer la quantité de CO2 dégagée par le plastique lors de sa dégradation en présence de boues dans un milieux aqueux à PH neutre.  [...] 2)- Le glycérol est-il biodégradable Dans ce cas le plastique fabriqué serait directement biodégradable dans un milieu contenant des bactéries sans au préalable une quelconque détérioration physicochimique.  [...]

[Biochimie] Voies de production de l'ATP

Simultanément, ça stimule aussi la glycogénolyse par exemple dans les muscles, le foie, les reins. Si le jeun se poursuit, on se met à sécréter après du cortisol, qui active le catabolisme des protéines des muscles (protéases intracellulaires), la transamination des acides aminés et les enzymes de la gluconéogénèse (synthèse de glucose à partir de lactate, glycérol et pyruvate).  [...] L'activation d'une voie dépend de la présence ou non d'une hormone et la quantité de substrat. par exemple, s'il n'y a pas de lactate et glycérol (obtenus par fermentation lactique et lipolyse respectivement), on n'aura pas de gluconéogenèse.  [...]