• Santé - Azote, Liquide, Cellules

[Biologie Cellulaire] Maintien des cellules en vie.

Si vous désirer conserver par exemple des cellules durant des dizaines d'année, il reste alors la congélation à très basse température ( comme pour les banques d'adn, les reserves de spermes et cellules souches à -196° dans l'azote liquide. Cela permet de stopper l'action enzymatique susceptible d'endommager les cellules.  [...] Ex. pour congeler des cellules, on va préferer l'azote liquide, mais on ne va pas mettre les cellules dans leur milieu directement dans l'azote, on les met dans un solvant qui permet d'éviter la formation de cristaux qui endommageraient les membranes cellulaires, par exemple le DMSO ou le glycérol.  [...]

durée de vies des spermatozoïdes?

Une congelation rapide dans l'azote liquide evite la formation de critaux de glace qui detruisent les cellules. une fois congelé les cellules peuvent etre conservées pendant tres longtemps.  [...] Juste pour compléter ce qui a déjà été dit. L'étape la plus délicate lorsque l'on travaille sur des cellules congelée dans l'azote liquide (ou à moins 80), c'estla décongélation parce qu'on reprend les cellules dans du milieu de décongélation (milieu de culture additionné d'autres éléments) mais il faut faire attention à prendre uniquement le glaçon de cellules.  [...]

[Biologie Cellulaire] Effets de la congélation

Une réfrigération brutale, par exemple en plongeant l'échantillon dans l'azote liquide les cristaux sont microscopiques et c'est la raison pour laquelle des cellules comme les spermatozoïdes supportent la congélation sans être détruits.  [...] lors d'un test sur des cellules de lignée NB4, nous avions avec mon groupe de TIPE comparer 4 cas avec les mêmes conditions de congélation et de décongélation en terme de vitesse, de gradient et de méthode de congélation (vapeur d'azote liquide à -80°C). On vérifiait après décongélation l'intégrité des cellules avec du bleu Trypan, un colorant qui normalement ne rentre pas dans la cellule.  [...]

[Biologie Cellulaire] Utilisation du FACS

Ils nous ont aussi conseillé de fixer nos cellules soit en formol 2% soit en PAF 4% et de congeler azote liquide pour conserver. J'imagine bien évidemment qu'il faut rincer les cellules fixées avant de les congeler... La congélation est elle obligatoire, j'ai fait de l'immunoloc sur cellules et je n'ai jamais congelé j'ai toujours conservé mes préparation à 4°.  [...] Ma cinétique se déroulerait sur 40 jours et ça va être très difficile de le faire sur cellules fraiches. D'où la mise au point d'une methode de fixation/congélation la moins dénaturante possible. D'après ce que j'en sais la congélation à l'azote liquide devrait vitrifier l'eau ce qui n'endommage pas les cellules au moment de la décongélation mais c'est vrai que j'ai quand même quelques craintes.  [...]

[Biologie Cellulaire] Qu'est-ce que la cellule subit dans le Formaldéhyde ?

Certains hommes ont voulu se faire cryogéniser par l'Azote Liquide pour être conservés et, selon eux, pouvoir être ramenés à la Vie quand la Science aura le pouvoir de le faire mais quel est le traitement qui permettrait de garder les cellules dans un état convenable.  [...] La cryogénisation à l'azote liquide est une mauvaise idée, surtout sans agent protecteur. Ce qui est mortel pour les cellules, ce n'est pas le froid, mais les cristaux de glace qui vont se former. Ces cristaux sont bien méchants, car ils percent les membranes cellulaires =.  [...]

[Immunologie] Séparation des PBMCs

Au cours d'une séparation des cellules mono nuclées du sang, j'ai sur-estimé le nombre des lymphocytes.Les cellules ayant été mises au -80°C durant 72H,puis dans l'azote liquide, j'aimerais savoir si elles ne risquent pas de mourir au cours de la décongélation.  [...]

Du corail cryopréservé ?

La cryopréservation est déjà bien maîtrisée. aujourd'hui, on l'utilise pour conserver des cellules isolées ( globules rouges, spermatozoïdes, etc.) ou carrément des amas de cellules ( embryons humains et animaux, vaisseaux, etc.). Elle consiste à conserver des éléments vivants à très basse température dans de l'azote liquide.  [...] Il s'agit ici de la vitrification, un procédé rapide de congélation qui préserve les tissus, le tout étant d'éviter la formation de cristaux de glace qui endommageraient les cellules. La solution Eliminer l'eau présente dans la planula pour la remplacer par une sorte d'antigel spécifique connu sous le nom de cryoprotecteur.  [...]

[Biologie Cellulaire] Expérience cryogénie.

Notre expérience va donc consister à congeler des cellules de levures puis à comparer les résultats à ceux qu'on pourrait obtenir sur cellule humaine. (Bonne idée ) Le premier obstacle survenu est que faire venir de l'azote liquide pour congeler les cellules serait trop coûteux, nous devons donc soit en fabriquer à partir d'azote gazeux, soit trouver un gaz à même effet.  [...] Second obstacle. nous ne sommes pas sûrs que l'expérience va fonctionner et que nous allons pouvoir ramener à la vie les cellules, ce qui serait un peu génant pour la suite du TPE ^^' est ce qu'on peut avoir la certitude que ça va fonctionner.  [...]

[Biologie Cellulaire] cultures cellulaires primaires

selon lemode opératoire, ils ont congelé les cellules par l'azote à -80 C°, puis ils ont utilisé du réactif DMEM avec un sérum bovin et des antibiotiques pour le milieu de culture.  [...] C'est à dire que oui, j'en fais tous les jours de la culture primaire de cellules humaines. Après, le protocole de culture ne varie pas par rapport à la culture de lignées.  [...]

congélation décongélation cellules

Le mieux est de tester une des ampoules que tu as congelé, une fois qu'elle est passé par toutes les étapes (-20°C, -80°C puis azote liquide), et de voir si tes cellules repartent.  [...] Concernant la réponse cellulaire, cela peut venir de la densité initiale d'ensemencement. Certaines cellules ont besoin des copines pour pousser. Si les 20% DMSO ont induit une mort cellulaire trop importante, tes cellules se sont peut-être épuisées rapidement.  [...]