• Santé - ARN, Protéines, Extraction, ADN

[Biologie Moléculaire] Extraction ADN, ARN et protéines

[Biologie Moléculaire] Extraction ADN, ARN et protéines.  [...] On c'est amusé à le faire une fois. C'était jouable. Cependant, pour une série de manip plus fréquente et plus grosse que quelques tubes je conseille aussi l'utilisation d'un kit. La manip est moins prise de tête et le résultat sans doute plus propre.   [...]

Extraction ADN phenol : température de centri

Je pratique des extractions d'ADN méthode phénol-chloroforme sur des produits alimentaires (bien gras et bien protéinés. C'est d'ailleurs pour cela que je ne prends pas des systèmes de kits et colonnes).  [...] Mais si quelqu'un pouvais m'éclairer sur le rôle de la température (par exemple sur la séparation d'avec les protéines, mais aussi l'extraction préférentielle de l'ADN vs ARN peut-être) ce serai super.  [...]

Extraction de l'ADN

S'il vous plait est ce que quelqu'un peut me dire si le Nacl permet l'élimination de l'ARN ou des protéines lors de l'extraction de l'ADN.  [...] L'ARNase sert à dégrader L'ARN il est utiliser au début de l'extraction Si on utilise un protocole de phénol chloroforme on peut grâce au phénol éliminer l'ARN degradé et les protéines.  [...]

[Biochimie] extraction ADN et ARN

J'aimerais avoir les rôles du tampon citrate-sel, le rôle de l'alcool à 95° sur l'ADN, le rôle du réactif de Dische, le rôle du TCA, de l'acétone, de l'orcétone (quelle différence entre l'orcétone acide et l'orcétone alcoolique) pour l'extraction de l'ARN.  [...] Pour l'éthanol, tout dépend de la technique d'extraction que tu utilises, si tu utilises des colonnes, ça améliore la fixation de l'ARN à la colonne (et sa sélectivité), j'imagine que c'est pareil pour l'ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ADN plasmidique

j'aurais une question a poser à ceux qui qui métrisent un peu les protocoles d'extraction d'ADN plasmidique.c'est la première fois que je manipule et et les bactéries sur lesquelles je travaille sont des lactobacilles et des lactocoques.  [...] Pour le phenol, il se trouve qu'avant il fallait le saturé soit même et maintenant il s'achète tout fait, enfin saturé quoi. Pour l'extraction d'ADN on utilise du phénol saturé avec du tris et pour l'extraction d'ARN avec de l'eau. A ce que l'on m'a dit, les ARN reste dans la phase aqueuse et les protéines resteraient dégradées à l'interphase.  [...]

[Biologie Moléculaire] solubilité ADN, ARN dans le phénol

En fait, il faut savoir que les ARN sont sensibles au pH alcalin et en général, l'extraction ADN se fait en phenol/Chloroforme/IAA à pH 8 et nous aurons l'ADN en phase aqueuse avec les ARN endommagés, ce qui ne gêne pas pour certaines analyses mais pas pour d'autres d'où l'action de RNase dans certains cas.  [...] Et bien en fait cela dépend également du but de ta manipulation. Si tu fait une extraction d'ADN pour faire une PCR conventionnelle derrière, le fait qu'il y ait un peu d'ARN n'est pas vraiment grave. Puisque seul les ADN seront amplifié (je grossis la chose).  [...]

Purif d'ARN par le tryzol

Donc en gros ca te sert a te debarrasser des proteines et des lipides qui sont present lors de l'extraction des ARN. CA inactive aussi les RNAse, ce qui est bien pratique si tu ne veux pas recuperer a la fin des nucleotides libres.  [...] Donc en gros ca te sert a te debarrasser des proteines et des lipides qui sont present lors de l'extraction des ARN. CA inactive aussi les RNAse.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction acides nucléiques totaux

En même temps, certains kits pr éconisent un traitement à la RNAse pour se débarrasser des traces d'ARN lors d'une extraction ADN. Mais les ARN sont-ils suffisamment nombreux dans ce cas J'avoue que je n'ai pas encore assez d'expérience.  [...] En faisant une extraction classique au phénol / chloroforme, on récupère tous les acides nucléiques. Maintenant il y a peut être des étapes spécifiques pour détruire les cellules végétales. Sans trop chahuter les ARN. De plus c'est (très) long et non reproductible.  [...]

[Biologie Moléculaire] les ARNs et extraction

En tout cas j'ai compris ça de l'extraction à la guanidine. Donc la phase supérieur c'est de l'eau à pH neutre avec l'ARN Par contre on aurait pu en effet utiliser des Dnases, c'est vrai. J'en prends note pour l'amélioration de la technique.  [...] merci piwi mais je n'arrive pas à avoir la publication il faut un login. Quelqu'un connaît t-il le rôle de l'extraction à la guanidine/NaCl + chloroforme seulement. j'comprends pas bien où sont les protéines, l'ARN et l'ADN. à priori vu que le pH est basique l'ADN restera préférentiellement dans la phase inférieure. merci.  [...]

[Biologie Moléculaire] Qiagen RNeasy trizol

J'ai trouvé un protocole d'extraction sur rneasy apres lyse trizol, et j'aurai voulu savoir si il y avait un risque de contamination des ARN par le trizol, ou bien si il est parfaitement lavé. On m'avait mis en garde un jour sur l'extraction au trizol, car cela serait assez fastidieux.  [...] Donc pour eux c'est l'extraction au Trizol qui marche bien. Il faut juste faire attention lorsque l'on pr élève les ARNs de ne pas contaminer avec la phase intermédiaire contenant les protéines et l'ADN. Après en dosant les ARN, grâce au rapport 260/280 tu sais si tu as des contaminations protéiques, grâce au rapport 260/230 tu sais si tu as une contamination phénolique.  [...]