• Santé - ARN, ADN, Réplication, Plasmide

[Biologie Moléculaire] Régulation de la réplication bactérienne

D'après ce que j'ai lu, la réplication commence si l'ARN II entre dans la bulle de réplication au niveau de l'ori du plasmide et qu'il est clivé par la RNase H. Mais ceci arrive peu fréquemment. Dans la plupart des cas, l'ARN I va s'hybrider à l'ARN II et apparemment Rop (sous forme dimérique) facilite cette hybridation.  [...] Dans le mem registre si tu conaissais des trucs sur la replication plasmidique type rolling circle faisant intervenir DSO et SSO.  [...]

[Biochimie] Manipulation de l'ADN: plasmide

je suis actuellement en première année de licence en biologie et nous avons étudié les plasmides mais je n'ai pas tout compris notamment sur la carte de réstrction. Quelle est son principe et qu'est ce qu'un site de réstrction, une origine de réplication, un promoteur et un terminateur.  [...] Le plasmide étant constitué d'ADN tu as besoin d'une origine de réplication afin de permettre aux polymérases de le reproduire dans la bactérie. Si le morceau d'ADN ajouté code pour une protéine, la présence d'un promoteur et d'un terminateur te permettra d'activer la production de la protéine à partir du plasmide.  [...]

[Biologie Moléculaire] ARN interference

) dont nombreux sont encore à découvrir... On pourrait donc penser que la régulation par ARN antisens serait possible (par ex. bloquer la traduction d'un ARNm par hybridation d'un ARN@sens). mais cela serait également très risqué puisque le rôle @viral du RNAi chez les vertébré a été suplanté par la réponse interféront via PKR.  [...] taper Romby (IBMC, Strasbourg) et CopT sur pubmed) ou encore permettant d'amorcer la réplication du plasmide ColE1... ce sont donc les seuls organismes qui codent pour des ARN @sens, découvert à ce jour.  [...]

[Biologie Cellulaire] transfection

oui ms le plasmide il est capable de réplication autonome c'est pareil pr mon ptit ADN seul ce que je veux dire c'est que si je taggue un ADNc avec de la GFP par ex et que je transfecte tt ca, jvais bien obtenir une protéine tagguée avec la GFP.  [...] Il ne faut pas confondre ADNc (qui est issu de la retro-transcription d'ARN et qui est monocaténaire (simple brin)) et plasmide (ADN circulaire et bicaténaire).  [...]

[Biologie Moléculaire] La molécule mystère - Page 4

Je suis homodimère d'origine bactérienne.Possédant 3 fonctions, je possède en outre deux sites actifs à tyrosine. Mon role dans la réplication d'un ADN a été établis.  [...] Euh, ben là du coup, je suis un peu perdue. l'ADN plasmidique est répliqué par la polymérase de la cellule hôte, la condition à une bonne réplication étant les compatibilités entre son Ori et l'espèce hôte.  [...]

[Biotechnologie] ADN recombinant réplication dépend du cycle cellulaire ?

Le plasmide (vecteur) qui fait partie de l'ADN recombinant sera injecté dans le cytoplasme d'une bactérie comme e.coli et donc la réplication de l'ADN recombinant sera dépendant du cycle cellulaire ou non.  [...] Selon les bactéries et les vecteurs utilisés, la réplication plasmidique est indépendante de la réplication chromosomique.  [...]

[Biologie Moléculaire] ARN antisens à partir d'un fragment de gène

Dans un exon du gène. l'ADN complémentaire provient d'une rétrotranscription d'un ARNm, donc épissé, donc si on veut faire une sonde dans le gène, il faut que celle-ci soit au niveau d'un exon, si elle tombe dans un intron elle pourrait ne pas se retrouver dans l'ARNm et donc dans l'ADNc.  [...] Ce plasmide sera utile car fournisseur de sondes pour des Northern blot (Southern blot pour de l'ARN et non plus de l'ADN) ou de la transcription traduction artificielle comme expliqué ci-dessus.  [...]

CRISPR Cas9: Fabrication d'ARN en laboratoire

C'est la seule application qui n'est pas de la science-fiction (pour le moment j'entends). Les traitements contre les maladies génétiques et le SIDA n'en sont pas encore aux tests cliniques (du moins autant que je sache).   [...] Petite précision. bien souvent, l'ARN n'est pas produit de manière synthétique, en tout cas pour les applications communes en laboratoire. On a plutôt tendance à encoder sa séquence dans un plasmide (un morceau d'ADN qu'on donnera à la cellule pour qu'elle l'exprime), tout comme on le fait pour la Cas-9.  [...]

Définition | Plasmide | Futura Santé

Un plasmide est une molécule d' ADN circulaire double brin, qui possède obligatoirement une origine de réplication, afin qu'il puisse se répliquer de manière autonome dans la cellule et un gène de sélection pour qu'il ne soit pas perdu par l'organisme au fil des multiplications cellulaires.  [...] Les plasmides utilisés en recherche biomoléculaire peuvent être bien plus complexes, et notamment contenir également des cassettes de clonage, qui sont en fait des séquences courtes reconnues par des enzymes de restriction capables de couper l'ADN au niveau de ces séquences.  [...]

[Biologie Moléculaire] Question purification QIAprep

Si tu ajoutes du Cm ici c'est pour augmenter le nombre de copie du plasmide. J'imagine que tu dois l'ajouter quand tes cellules sont a DO 0.6-1.0 En fait le Cm va inhiber la traduction, du coup les cellules vont arreter de pousser, mais la replication de l'ADN va continuer.  [...] En fait le Cm va inhiber la traduction, du coup les cellules vont arreter de pousser, mais la replication de l'ADN va continuer. Ta DO va donc etre stable, mais la quantite d'ADN et donc de plasmide va augmenter. Du coup tu vas recuperer plus de plasmide tout en utilisant un kit pour une miniprep.  [...]