• Santé - Apparition, Site, Restriction

[Biologie Moléculaire] polymorphisme de restriction

je suis entrain d'étudier les polymorphismes de l'adn et je n'arrive pas à comprendre la défintion du polymorphisme de restriction (rflp). Dû a une mutation entraînant l'apparition ou la disparition d'un site de restriction.  [...] Il existe différentes enzymes de restriction qui reconnaissent chacune une séquence différente.  [...]

[Biologie Moléculaire] Hybridation ADNc / ADNg : besoin de confirmer !

Ça se complique un petit peu, j'émets alors l'hypothèse suivante. sur notre ADNg il y a deux sites de restrictions NcoI adjacents qui donnent un fragment de 1,8Kb. Pour expliquer les 0,8Kb, j'ai pensé à un intron situé au centre de mon fragment d'ADNg NcoI/NcoI.  [...] Or notre sonde N d'ADNc de 1Kb (je rappelle NcoI/NcoI) ne possède pas de site de restriction pour HindIII donc il existe un site de restriction pour HindIII dans l'intron de 0,8Kb.  [...]

[Biologie Moléculaire] Polymorphisme génétique

Vous amplifiez une séquence de 300 bases d'ADN humain qui peut contenir un polymorphisme génétique responsable de l'apparition d'un site de restriction en position 50 pour une enzyme E.  [...] Donc, si tu es homozygote pour ces allèles, cela signifiera que les deux seront identiques. Etant donné que tu ne considères qu'un site de restriction par allèle, tu auras 2 sites pour deux allèles identiques.  [...]

[Génétique] Rflp

1) -. sur le chromosome, un frgament de restriction est-ce bien un fragment entre deux sites de restrictions ( la ou les enzymes de restrictions peuvent couper l 'adn ).  [...] 3) Un profil de restriction est ce qu'on obtient apres avoir digéré de l'ADN par des enzymes de restriction et l'avoir fait migrer sur gel. On obtient des bandes qui correspondent a des fragments de restriction. pour détecter les différences alléliques par cette méthode, il faut bien sur que la différence cause une modification, une apparition ou une disparition d'un site de restriction.  [...]

[Biologie Moléculaire] clonage petit fragment d'ADN

As tu des nucléotides libres de chaque côté de ton site de restriction Ou as tu dessiné ton amorce en rajoutant le site de restriction.  [...] Le produit PCR est effectué à l'aide d'amorces dont le site de restriction a été rajouté avec 3 nucléotides en amont. Celui-ci a été purifié à l'aide d'un kit de purification de produit PCR sans passer par une extraction sur gel car j'ai un produit bien spécifique.  [...]

[Biologie Moléculaire] comment faire une mutation par PCR?

Ce qui permet d'amplifier deux segments qui doivent chacun contenir un site de restriction unique dans le plasmide (attention, différent du site qu'on désire insérer évidemment).  [...] Ce qui permet d'amplifier deux segments qui doivent chacun contenir un site de restriction unique dans le plasmide (attention, différent du site qu'on désire insérer évidemment). La aussi je suis perdue, je comprends pas, l'histoire du site de restriction.  [...]

Primer de PCR

Sinon, dans une amorce dans laquelle tu rajoutes un site de restriction il y a une partie identique à ta séquence, ton site de restriction que tu dois faire précédé d'un triplet/quadruplet (voir plus) de nucléotiques pour assurer une restriction efficace (un site de restriction en extrêmité 5' d'une amorce, ce n'est pas top pour l'enzyme de restriction).  [...] ce sont effectivement ces 3 - 4 nucleotides qui precedent le site de restriction que mon enseignant appelle le Clamp.  [...]

Southern blot et séquençage - Interprétation

Question 2. Traduisez la region d'interet pour les deux individus en commenc'ant la lecture a la premiere base (Figure 2, NB. il s'agit du brin +), positionnez le site de restriction de Xho I sur la ou les sequence(s), donnez toutes les caracteristiques de l'evenement mutationnel en affinant votre reponse de la question 1.  [...] Et on remarque que la mutation (transversion) qui a transformé le A en C, a fait apparaitre le site de restriction de l'enzyme (CTCGAG) chez l'individu 2.  [...]

[Biologie Moléculaire] Sequence a ajouter avant un site de restriction

Il me semble qu'il est préférable d'ajouter quelques bases avant (dans le cas du 5') et après (pour le 3') les sites de restriction afin que l'enzyme puisse cliver les extrémités de l'amplicon.  [...] Je ne pense pas qu'il y ait une séquence type, veillez juste à conserver un %GC correct et a ne pas créer de site de restriction qui serait ennuyeux par la suite.  [...]

[Génétique] clonage orienté ou non

En fait, ma question était de savoir comment faire si l'enzyme B (pour reprendre la nomenclature ci-dessus) n'a pas de site de restriction au sein de la séquence de l'insert.  [...] Si tu sort ton insert par restriction, j'imagine que tu dois pouvoir trouver un site de restriction qui te detruise ton plasmide donneur. Mais il sera toujours preferable de bien purifier ton insert sur gel pour te debarasser au maximum du plasmide donneur.  [...]