• Santé - Antigène, Compétition, Anticorps

immunofluorescence

les 3 techniques sont bien utilisées toutes les 3 en elisa. celle en sandwich consiste a coaté une plaque avec un anticorps. ensuite tu rajoute ton antigène qui va se fixer a ton anticorps. tu rajoute ensuite un autre anticorps marqué avec un marqueur fluorescent qui va se fixer sur un autre épitope de ton antigène. tu n'as plus qu'à lire les résultats.  [...] la méthode de compétition. un anticorps (ou aussi un antigène) est coaté au fond du puit. mais tu rajoute ensuite 2 antigène dont un est marqué et de concentration connue et l'autre est celui recherché.  [...]

Anticorps polyclonaux pour ELISA

Je dois réaliser un ELISA en sandwich pour doser un antigène. Mon Ag sera pris en sandwich entre un Ac non marqué et un autre marqué par une enzyme.  [...] Vais je avoir une compétition entre mes deux anticorps mon dosage va t-il être spécifique de mon antigène.  [...]

[Immunologie] Elisa

le test par comptition. tu as coaté ta plaque avec un anticorps, mai la tu rajoute 2 antigène qui vont etre en compétition avec ton anticorps. sur l'un de tes Ag il y en aura un de concentration connu et marqué et l'autre sera celui recherché X. plus il y a de signal moin il y a d'AgX recherché.  [...] Qu'est-ce que la compétition apporte-t-elle par exemple Le taux d'anticorps devant être plus important, je suppose que ce n'est pas la limite de détection qui est améliorée.  [...]

[Biochimie] Mise au point ELISA qui pose probleme

Je suis parti sur ELISA par compétition, en coatant le peptide recombinant sur une plaque polysorp, puis en saturant avec du PBST BSA 3%. La compétition se fait avec échantillons et anticorps dilués dans PBST BSA 1%. Je dilue ma.  [...] S'il vous plait je veux optimiser l'ELISA compétitive pour quantifier un médicament. Pourriez-vous m'expliquer comment faire car je n'ai rien trouvé sur internet.  [...]

L'athérosclérose : nouvelles pistes

On ferait produire des anticorps dirigés contre ce récepteur en injectant une molécule ressemblant au récepteur, càd le récepteur (qui ne déclenche pas de réaction immunitaire car c'est du soi) + une molécule antigénique.  [...] Les anticorps se lieront aux récepteurs scavengers et il y aura compétition avec l'incorporation des LDL oxydés, de plus la liaison anticorps-récepteur étant spécifique alors les LDL oxydés seraient beaucoup moins internalisés = moins de cellules spumeuses.  [...]

[Biochimie] méthode à compétition pour un dosage

je me demande dans ce topic,comment à partir de la méthode enzymatique par compétition on peut avoir la concentration de l'antigène froid qu'on cherche,avec un simple marquage de la forme de l'antigène marqué par une enzyme..est ce que c'est l'activité enzymatique de cet enzyme qui nous permet de calculer la [antigène froid] si oui,est ce qu'on ajoute un substrat si oui.  [...] c'est quoi la relation entre l'activité enzymatique du complexe antigène-antic avec la densité optique car les courbe d'étalonnage qui permettent de déduire la [antigène froid] contiennent en génèral dans les ordonnées la densité optique,merci d'avance.  [...]

Matériels et méthodes | Dossier

Il est basé sur la compétition entre du thromboxane B2 non marqué présent dans le milieu et une quantité fixée de thromboxane marqué à l'iode 125. Il est ajouté un anticorps primaire qui a une haute affinité et spécificité pour le thromboxane B 2. Avec une quantité fixée d'anticorps et de ligand radioactif, la quantité de ligand radioactif lié reconnue par l'anticorps est inversement proportionnelle à la concentration de ligand non marqué additionné.  [...] Le thromboxane B 2 est repris par 600µl de tampon, et 50 µl sont utilisés pour effectuer le dosage. Pour chaque tube, 100 µl de tampon de dosage sont additionnés avec 50 µl d'échantillon, 50 µl de 125 I thromboxane B 2 et 50 µl d'anticorps primaire. Il s'ensuit une centrifugation à 800g pendant 3 minutes, puis les milieux sont incubés pendant 15 à 18 heures à 4°C.  [...]

[Immunologie] Mise au point d'ELISA Compétitive indirecte

S'il vous plait, je veux détecter des médicaments en utilisant la technique d'ELISA par compétition indirecte (anticorps de capture est polyclonal), j'ai fais plusieurs optimisation mais mais je n'arrive pas à obtenir une bonne DO, soit je trouve une DO= 0.  [...] Merci beaucoup pour votre réponse, j'ai essayé de varier les concentrations de l'anticorps de capture, et la molécules compétitive (Benzodiazepine-HRP) couplée à la hrp en même temps.  [...]

même marquage immunofluorescence dans le vert et le rouge

J'ai pensé que je m'étais trompé dans mes anticorps secondaires mais après vérification, il s'avère que non. donc je ne comprends pas d'où ça peut venir. Je précise que là j'ai utilisé des cellules de souris. J'avais réalisé les mêmes marquages (avec les mêmes anticorps) dans des cellules humaines et ça fonctionnait parfaitement.  [...] . Donc je pense que cette fois-ci j'ai du pioché le mauvais aliquot. lapin anti-souris rouge qui va être reconnu par mon autre secondaire chèvre anti-lapin vert et donc donner le même marquage. Ceci m'amène à une autre question. mon secondaire chèvre anti-lapin vert n'aurait-il pas du reconnaitre mon anticorps primaire quand même ou est-ce que ça peut s'expliquer par l'affinité et la compétition entre les deux anticorps.  [...]

Test ELISA ??

Salut, En immulogie j'ai vu la technique d'ELISA ici ca rappelle la méthode ELISA non compétitif appelé la methode indirecte. Je vais te donner le principe que j 'aui vu en immuno. On fixe les antigène sur une microplaque à puits, on ajoute le sérum contenant les anticorps a doser, on veut quantifier les anticorps circulant.  [...] ton test sert à quantifier la fixation d'une molécule sur un récepteur. C'est un test de compétition. on utilise un anticorps primaire dirigé contre le site sur lequel on souhaite évluer la fixation de la molécule. Si l'Ac I se fixe, la molécule ne se fixe pas et inversement.  [...]