• Santé - Anticorps, Sites, Protéine

[Immunologie] Recherche de modification de proteine par anticorps

- phosphorylation. il existe des anticorps reconnaissant spécifiquement votre protéine phosphorylée et il existe même parfois plusieurs anticorps différents si la protéine a possède plusieurs sites de phosphorylation. Si il n'existe pas d'anticorps vous pouvez faire une IP contre votre protéine et révéler avec un anti phospho tyrosine ou un anti phospho serine.  [...] - palmitoylation/miristoylation/farnésylation/.... la plupart des modification lipidiques peuvent être prédites par analyse de la séquence de la protéine étudiée. Souvent ces modifications peuvent s'observer en western-blot (comme la plupart des modification post-traductionnelles et on utilise des acides gras radioactifs comme l'acide palmitique marqué au tritium.  [...]

[Immunologie] VIH et CPA

On pourrait penser (mais il doit y avoir des limites a ce procédé) que injecter une souche morte pourrait déclencher une réaction immunitaire (phagocytose, création d'anticorps...), les virus étant morts, ils ne pourraient se défendre, et on peut imaginer selon un schéma logique que des macrophages deviendraient CPA (cellules présentant l'antigène) et que l'organisme trouverai seul des anticorps appropriés,  [...] le corps créé des anticorps aléatoires il me semble, avec des sites de fixation d'antigène (paratope) de structure aléatoires pour. au cas ou un de ces anticorps fixerais une protéine de l'antigène,  [...]

[Biologie Cellulaire] Test d'activité des kinases

Pour un Western sur des phosphorylations, il faut posséder des anticorps spécifique de la phosphorylation que tu recherches dans ta protéine. Hors si c'est un site de phosphorylation encore inconnu, aucun anticorps ne sera disponible. En plus il peut y avoir des croisements de reconnaissance.  [...] Car si le site est connu mais que sa séquence est la même qu'un ou plusieurs autres sites sur la protéine, l'anticorps ne pourra pas être spécifique d'un seul de ces sites, à moins peut-être si les épitopes sont conformationnels.  [...]

[Biochimie] Etude de la phosphorylation d'une protéine

je travail sur une protéine membranaire pour laquelle il n'existe pas d'anticorps dirigés contre la forme phosphorylée. De plus il existe de nombreux sites de phosphorylation théoriques (mais rien de très clair là dessus).  [...] En fait je pensais aussi faire un western sur ton gel avec des anticorps anti-Ser/Thr/Tyr phorsphorylées et anti- ta-protéine. Je n'ai jamais fait de 2D mais je sais que ça se fait. Et puis pour les grosses protéines ont peut aussi faire des gels d'agarose, au moins pour la première dimension.  [...]

[Biochimie] Bsa

Si c'est pour faire un dosage par ELISA par exemple, la BSA sert à saturer les sites non occupés par la protéine à doser. Ca évite que les anticorps se fixent de manière non spécifique sur les parois du puits.  [...] Immunochimiluminescence est un terme qu'on utilise pas très souvent (souvent pour faire joli ^^). Lorsqu'on fait un western blot ou un ELISA en utilisant des anticorps couplés à la peroxydase, c'est de l'immunochimiluminescence. Immuno parce qu'on utilise des anticorps, et chimiluminescence parce que l'anticorps est couplé à une enzyme (généralement une peroxydase) qui va transformer son substrat en une molécule qui va produire de la lumière.  [...]

[Biologie Moléculaire] Western blot

Elle se fixe aussi sur les sites spécifiques, mais l'anticorps a une affinité plus grand pour ces sites et déplace donc la protéine aspécifique pour s'y fixer. Ce qui n'est pas (moins) le cas avec le sites aspécifiques.  [...] La membrane ne peut plus coller de protéines aux endroits où des protéines s'y sont déjà fixées. Il reste cependant une surface importante encore adhésive où l'anticorps, qui est une protéine, se fixera. Pour l'empêcher on incube donc la membrane en présence de protéines, ainsi elle ne pourra plus scotcher l'anticorps, ce sera en quelque sorte comme si du ruban adhésif avait été souillé par de la poussière.  [...]

Immunomarquage de la rétine du macaque

puis on utilise un anticorps polyclonal anti la protéine d'interet, on rince et on met l'anticorps secondaire anti- anticorps de lapin, marqué par un marqueur fluorescent, dilué dans du PBS contenant 1% d'albumine de sérum bovin pendant 1h à température ambiante.  [...] Bref, ces étapes de saturation permettent de s'assurer que les sites non spécifiques sur la lamelle ne vont pas être détectés par notre anticorps (cela serai ennuyeux). On les recouvre donc avec une protéine bidon, l'albumine contenu dans le sérum.  [...]

Les anticorps, protéines du groupe des immunoglobulines | Dossier

Les anticorps sont la forme sécrétée de l' immunoglobuline de membrane d'un lymphocyte B, et on les retrouve dans le sérum et les humeurs. Chaque anticorps est capable de se fixer spécifiquement à l' antigène qui a déclenché sa production.  [...] Les anticorps sont des protéines du groupe des immunoglobulines (Ig). Les extrémités des bras du Y formé par la molécule sont variables et constituent les sites de fixation de l'anticorps sur l'antigène. L'anticorps ne reconnaît qu'une partie spéciale de l'antigène, appelée épitope ou déterminant antigénique.  [...]

Sida : un "bouclier" de sucres pour échapper aux défenses de l'hôte

Cette stratégie évolutive, fondée sur la variabilité génétique, se révélerait commune aux différents sous-types VIH. Le virus utiliserait la variabilité de sites situés sur les protéines de son enveloppe, destinés à fixer de grosses molécules de sucres complexes, pour échapper aux anticorps de l' hôte.  [...] En revanche, le gène env, qui code pour les protéines de l'enveloppe externe du virus, cibles des anticorps du système immunitaire, contiendrait des sites sélectionnés positivement. à l'endroit du génome où se situe ce gène, les mutations seraient maintenues car porteuses d'un avantage évolutif.  [...]

nombre sites action anticorps

Pourquoi un anticorps n'a que 2 sites d'action avec l'élément étranger alors que si on regarde l'extrémité aminoterminale, il a 2 domaines ( qui proviennent des 2 chaines légères ) et 2 des chaines lourdes, ça fait 4 non.  [...] Plus précisément, j'ajouterai que chaque site anticorps est en fait formé de 3 régions hypervariables (CDE). Donc un anticorps est constitué de 6 CDE, qui sont les sites de reconnaissance de l'épitope antigénique.  [...]