• Santé - Anticorps, Intérieur, Cellule

[Biologie Cellulaire] Immunofluorescence

donc si j'ai bien compris pour mettre en évidence la présence d'une protéine nucléaire, on utilise des anticorps contre cette protéine et des intercalants de base et donc si on a un mélange des 2 cela vaut dire que la proétaine est présente dans le noyau.  [...] En immunocytologie on a une étape de perméabilisation au triton (X-100) qui permet justement de perforer les membranes afin que les anticorps puissent accéder à l'intérieur de la cellule et des organelles. Si vous ne faites pas cela vous avez raison, les anticorps ne pénètrent pas dans la cellule et encore moins dans le noyau.  [...]

[Biologie Cellulaire] Perméabilisation cellulaire

La manip fait intervenir du paraformaldéhyde pour fixer les cellules, puis du Triton X pour perméabiliser les membranes. On ajoute ensuite les anticorps un à un... etc.  [...] Et qu'entend-on réellement par perméabilisation Est-ce que les anticorps passent à l'intérieur de la cellule par diffusion.  [...]

[Immunologie] Médiation humorale ou cellulaire ?

Par exemple si un virus a réussi à infecter une cellule (entrer dedans) la cellule infectée va exprimer des peptides antigéniques à sa surface en association avec des molécules du CMH I. Cela sera reconnu par un LT8 pré-cytotoxique. En même temps des macrophages pourront phagocyter les virus et exprimer des peptides antigéniques à leur surface via le CMH II, reconnu par un CD4+ qui se transformera en Lth1.  [...] En même temps une réponse à médiation humorale peut avoir lieu si un lymphocyte B reconnait un antigène d'un virus circulant (pas à l'intérieur d'une cellule) et présente des peptides antigéniques à un CD4+ via le CMH II. Les lymphocytes B se différencieront alors en plasmocytes producteurs d'anticorps grâce aux Lth2, anticorps qui iront neutraliser les virus.  [...]

[Divers] Microscopie à fluorescence et confocal

Pour comparer avec l'épifluo, si tu as une cellule (ou disons plutot une racine pour que l'exemple soit parlant) a l'épifluo, du fait de l'épaisseur tu pourras pas focaliser et obtenir juste la fluo qui est à l'interieur, en plein milieu, si tu veut juste voir la zone en plein milieu tu vas devoir passer par une découpe au microtome afin d'avoir une fine tranche, tu peux mettre les sondes fluo (ex anticorps-FITC) sur cette tranche et tu verra cette zone là qui t'intéresse,  [...] Je parle de racine car c'est assez gros et on comprend mieux la notion de plan focal (à l'interieur) quand c'est gros, mais c'est pareil pour une cellule, situ veux voir de manière précise en un plan de la cellule et pas la fluo totale qui se trouve dans la cellule entière, avec un confocal tu peux obtenir la fluo de cette tranche.  [...]

Des anticorps "intelligents" à des fins diagnostiques

La qualité des anticorps dépend de leur spécificité pour les protéines. Leur capacité à détecter des protéines à l'intérieur des cellules représente également un avantage. Si, à ce jour, on sait fabriquer des anticorps, puis les humaniser, l'enjeu est maintenant de réduire leur délai d'identification qui s'élève actuellement à plusieurs mois et d'améliorer encore leur sélectivité pour qu'ils puissent reconnaître les moindres distinctions entre les protéines.  [...] C'est la première fois que des anticorps synthétiques d'origine humaine sont à la fois sensibles à la conformation des protéines et peuvent être exprimés directement dans les cellules vivantes. Ce qui permet aux chercheurs de suivre Rab6 en temps réel et uniquement sous sa forme active à l'intérieur des cellules.  [...]

comment simuler une cellule ?

est ce qu'il y a un autre microscope plus puissant que le microscope optique, et et qui peut voir l'intérieur de la cellule vivante.  [...] je me demande est ce que le microscope électronique peut observer l'interieur d'une cellule vivant en activité sans l'assècher.  [...]

Potentiel d'équilibre

Le problème c'est que si le potassium qui a réussi à sortir de la cellule, c'est-à-dire celui qui n'a pas été refoulé par répulsion électrostatique, ne re-rentre pas dans la cellule (vu que la pompe ne fait pas rentrer le potassium) alors on perd obligatoirement des charges positives, même s'il y a beaucoup plus de potassium refoulé vers l'intérieur de la cellule, il y en a toujours un tout petit peu qui sort et qui ne sera jamais récupéré dans la cellule (la pompe ne le faisant pas rentrer sur du court terme).  [...] Ce que je ne vois pas c'est par où rentre le potassium dans la cellule. Comme il y en a plus à l'intérieur de la cellule il faut alors obligatoirement un transport actif, or les canaux de fuite c'est du transport passif donc les K+ extracellulaires ne rentrent pas via les canaux de fuite.  [...]

[Physiologie] Les équations de Donnan, Nernst et GHK

Si on considère que la concentration de cations et d'anions est égale de part et d'autre de la membrane, l'ion Cl- va diffuse vers l'intérieur de la cellule, suivant son gradient et l'ion K+ l'accompagne de manière à préserver l'électroneutralité du côté de extracellulaire.  [...] De plus, si on additionne les concentrations de tous les ions, il y aura plus de particules osmotiquement actives à l'intérieur de la cellule.  [...]

[Physiologie] Potentiel d'action

Enfaite je ne comprend pas le moment où il dise Il est donc nécessaire de retenir que l'intérieur de la membrane cellulaire c'est-à-dire l'intérieur de la cellule est de charge négative alors que l'extérieur de la cellule est de charge positive. Ceci s'explique par le fait suivant qui est très important.  [...] Donc si l'intérieur de la cellule est chargé négativement c'est parce-que les ions K + sorte plus que les ions Na + ne rentre, et ceci grâce au canaux de fuite K +, et donc les ions K + se répartissent selon leur potentiel d'équilibre qui est de 70mV, ainsi le potentiel de repos est de -70mV.  [...]

Ddp transmembranaire

Le plus important c'est de ne pas oublier les grosses protéines chargées négativement (ou autres gros anions) dans le compartiment intracellulaire, qui ne franchissent donc pas la bicouche lipoprotéique malgré un gradient de concentration énorme entre les milieux intra et extracellulaires, ce qui maintient le potentiel membranaire négatif à l'intérieur de la cellule.  [...] Et ce qui fait que c'est négatif dans la cellule par rapport à l'extérieur c'est bien la présence de ces gros anions, ça aurait pu être le contraire, positif à l'intérieur par rapport à l'extérieur, mais non c'est comme ça, c'est l'origine du truc si on veut.  [...]