• Santé - Anticorps, Intérêt, Référence

[biologie moléculaire] Petit (?) problème en ChIP

Je fais en ce moment du ChIP (chromatin immunoprecipitation) et à ma dernière manip, j'ai eu un petit souci. j'ai obtenu un signal hyper fort dans mon tube sans anticorps pour mon gène d'intérêt mais pas pour le gène de référence (beta actine). Et je ne me l'explique pas du tout, d'autant plus que lors des manip précédentes je n'avais eu aucun problème.  [...] Si c'est arrive qu'une seule fois, te prend pas la tete, jette les tubes et recommence. Tu pourras commencer a te poser des questions si ca te le fait a tous les coups.   [...]

Traitements des données en QPCR

Dans une première manip, je vais faire deux courbes standart (une pour le gène de référence et une pour le gène d'intérêt) et je vais mettre tous mes échantillons (ADN immunoprécipité, plus le tube sans anticorps ) avec chacun des deux couples de primers.  [...] Elle s'assurait juste que les valeurs Ac/Sans Ac pour le gène de référence et pour le gène d'intérêt étaient similaires dans ses cellules contrôles (non traitées).  [...]

Brucellose : vieille menace, nouvelles réponses | Dossier

D'autre part, la protection acquise entraîne la synthèse d' anticorps qui sont précisément ceux que détectent les tests de diagnostic. Il est donc impossible de distinguer un animal vacciné d'un animal infecté. De ce fait, la brucellose est encore un véritable casse-tête en termes d'échanges commerciaux internationaux du bétail, explique Alastair MacMillan du Laboratoire de Référence sur la Brucellose de Weybridge (UK), coordinateur d'une action de coopération européenne COST sur ce thème.  [...] Notre but était de concevoir un couple test/vaccin capable d'induire la protection des animaux vaccinés et de différencier les animaux infectés des animaux vaccinés. Nous avons produit une souche Rev.1 conservant ses propriétés vaccinales, mais n'exprimant plus la protéine BP 26, dont la présence a été récemment identifiée pour le diagnostic de l'infection, explique Laurence Guilloteau de l'INRA.   [...]

[Immunologie] ELISA coating et conservation

Pensez-vous que selon l'anticorps de coating utilisé (même référence, mais pas même fournisseur), la congélation peut être efficace ou non.  [...] Mais dans ce cas, je ne comprends pas pourquoi les tests réalisés l'année dernière ont tous parfaitement fonctionné Rien n'a changé (température du congélateur ou autres). il n'y a que l'anticorps qui n'a pas été acheté chez le même fournisseur, mais la référence est exactement la même.  [...]

[Biochimie] Western Blot? Principe de la méthode?

J'ai lu, qu'une étape de transfert entre le gel et une membrane avait lieu, et ensuite une étape de detection avat lieu (anticorps...).  [...] EN gros quelle est la différence entre une electrophorese, et un western Blot qui utilise le principe de l'electrophorese, quelle est sa spécificité ( si ce n'est de s'interesser aux protéines).  [...]

Gène de ménage (gène de référence...)

Donc si tu calcules la différence, le Delta Ct = Ct(gène d'intérêt) - Ct(contrôle), ça te donne une estimation de la quantité relative de cDNA (donc de transcrit) de ton gène d'intérêt par rapport au gène de référence.  [...] Ensuite, tu peux comparer ton Delta CT entre plusieurs tissus différents (ou bien plusieurs conditions...) et ainsi mettre en évidence des variations dans l'expression de ton gène d'intérêt, toujours par rapport au gène de référence, qui théoriquement ne doit pas bouger.  [...]

[Immunologie] Isotype en cytométrie

Je me lance dans la cytométrie en flux, et donc je m'organise dans les différents anticorps et surtout les isotypes. Mais je n'arrive pas à savoir quelle caractéristique doit avoir un isotype pour être utilisable pour l'anticorps de référence.  [...] Par exemple, je veux utiliser un anticorps anti-CD62L réalisé chez le Rat et anti-Souris, avec le fluorochrome APC, un isotype IgG2 a,k et clone MEL-14.  [...]

[Biologie Moléculaire] qPCR et quantification relative

1+E c'est ton efficacité (si ton efficacité est de 99% ce sera 1.99) (1E au numérateur c'est celle de ton gène d'intérêt, et 1+E au dénominateur c'est ton gène de référence).  [...] Donc on a plusieurs colonnes faites par des binômes différents (d'où, je suppose, les différences d'efficacité), pour faire la q-PCR de l'actine 1 & 2 et du gène d'intérêt (j'ai noté ADN) 1 & 2.  [...]

Allergie au gluten

S'il n'y a pas élévation du taux d'anticorps, cela signifie que votre organisme ne réagit pas contre la molécule testée, et qu'il n'y a donc pas de réaction allergique envers elle. D'autre part, une fibroscopie gastrique réalisée chez un sujet atteint de cette allergie montre une atrophie villositaire, qui c'est vrai est mieux diagnostiquée par l'anapath, mais selon l'habitude de l'opérateur, même une vue macroscopique peut suffire.  [...] Mon médecin à effectivement mis de côté la possibilité d'une allergie au gluten, sous réserve d'autre examens complémentaires.   [...]

[Biologie Moléculaire] Un anticorps marqué par un fluorochrome peut-il se fixer à un acide nucléique?

Cependant il existe des anticorps capable de reconnaitre non pas les bases natives mais des analogues comme la bromodeoxyuridine.  [...] Tu as une référence de ce dont tu parles Cela dit les anticorps anti-ADN existent bien.  [...]