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[Biochimie] Chromatographie d'exclusion stérique : deux pics pour une seule enzyme

J'ai un petit problème de compréhension. J'ai purifié une enzyme tout d'abord par chromatographie d'affinité puis par chromatographie d'exclusion stérique, et le chromatogramme pour cette dernière montre deux pics. Or, l'analyse des fractions obtenues pour ces deux pics par SDS-page montre bien qu'il s'agit de la même enzyme car même masse moléculaire. Est-ce parce-que l'enzyme possède deux formes.  [...] en y réfléchissant, je ne vois pas d'autre explication évidente que celle que vous proposez... pouvez vous tester l'activité enzymatique sur ces deux fractions.  [...]

Protéines pouvant "interférer" chez l'homme

Bonjour à tous, suite à un projet de production d'hormone de croissance, après plusieurs purifications, nous avons analysé nos fractions d'élution par MALDI TOF/TOF en bottom up. (digestion enzymatique à la trypsine des bandes obtenues après migration SDS-PAGE, analyse des peptides puis comparaison à spectres obtenus in sillico, Score Mascot...UniProt...etc).  [...] Je ne comprends pas très bien la finalité de cette question car pour moi, il peut y avoir des facteurs de virulence de la bactérie qui vont activer des mécanismes du système immunitaire mais je ne vois pas comment telle enzyme bactérienne identifiée ou tel facteur de transcription pourrait interférer chez l'homme après une injection IV.  [...]

Elaboration d'un protocole de TP

Je dois élaborer un protocole de TP sur l'extraction et la purification de la luciférase de Photobacterium phosphoreum mais je n'ai aucune idée de comment faire.   [...] 1- L'extraction des protéines à partir de cultures de P. phosphoreum que vous aurez à disposition par l'intermédiaire du Triton,   [...]

[Biologie Moléculaire] Dispase

L'objet de mon message est une enzyme habituellement bien pratique. la dispase. J'ai d'ailleurs été étonné de voir qu'il n'y avait pas de page sur wikipedia (c'est maintenant chose faite) ni sur futura sciences concernant cette enzyme, tant elle est couramment utilisée à mon labo. Ca doit être une coutume locale.  [...] Les concentrations utilisées sont très variable (selon la personne qui a préparé l'enzyme, ou selon la publi utilisée comme référence), les milieux également. H 2 O, D-MEM seul, D-MEM avec sérum, PBS... et parfois ca marche, parfois ca marche pas, avec une incroyable part d'aléatoire.  [...]

[Biotechnologie] La chimie dans le clonage thérapeutique ?? TPE 1ère S

De nombreux points pourraient être intéressants, faire de l'enzymologie (biochimie) ou une analyse structurale de l'ADN par exemple (plus coté biophysique). Le problème de ces notions, c'est qu'elles sont d'un niveau bien supérieur à la 1ere S.  [...] Ensuite ce qu'il peut etre intéressant, c'est d'expliquer les différentes méthodes d'analyse en biochimie (Chromatographies diverses, gel d'électrophorèse SDS-PAGE ou polyacrylamide...), comme en biophysique (fluorescence, cristallographie/Diffraction RX, spectroscopie infrarouge, RMN...).  [...]

Dents sensibles : tout savoir sur la sensibilité dentaire | Dossier

Dans son ouvrage intitulé Obstétrique, Jacques Lansac analyse ces changements par l' imprégnation hormonale [qui] entraîne une augmentation du nombre et de la perméabilité des capillaires de la gencive. L'hypersalivation fait varier le pH local, l'immunodépression favorise l'éclosion d'infection (page 108).  [...] L' anesthésie locale n'est pas contrindiquée de la même manière que seul le paracétamol pourra être administré en cas de douleur. En cas de radiographie, il est demandé de porter un tablier de plomb pour protéger le bébé des éventuels rayons reçus. Enfin, il est fortement conseillé de pratiquer un détartrage avant et après la grossesse pour prévenir tout risque d'infections.   [...]

[Biochimie] proteines

voilà, c'est la réponse c qui est juste, le B mercaptoethanol (ou dithiotrétol ou iodoacétamide) sont des agent réducteurs, empêchent l'oxydation des cystéines dans les protéines, donc rompent les ponts disulfures, avant d'utilisé cet agent, on a eu une bande de 120kda (deux bandes superposé de 120kda) parce que le PM de notre protéine est le double (240), puis juste après l'utilisation de notre agent réducteur, on a eu une bande de 60 Kda(donc 4 bande superposé de 60 kda) donc les 4 sous-unités sont liées par des ponts disulfure.   [...] dis moi stp, avant de passer à la PAGE, ils ont cité l'utilisation de l'urée ou formamide, ou même c'est une SDS-PAGE ou c'est juste une PAGE.  [...]

Dépistage du diabète et régime alimentaire | Dossier

De même, une analyse de tolérance au glucose, consistant en la prise d'une boisson riche en glucose suivie, deux heures après, d'une mesure de glycémie peut être demandée par le médecin.  [...] Prise de la tension artérielle, recherche d'une surcharge pondérale, auscultation du coeur et des vaisseaux ou encore examen des réflexes font partie du programme de chaque visite, de même que l'analyse du résultat du dosage de l'HbA1c (voir page précédente de ce dossier).  [...]

[Génétique] Production d'interleukine 2

Puis tu fais une culture sur boite de petri avec une sélection par un antibiotique correspondant à ton plasmide. De la tu repiques une colonie et tu fait une culture liquide à partir de cette dernière. A cette étape il est important de valider ta construction par un séquençage et une PCR, après avoir extrait une petite quantité de ton plasmide (ex.5ml de culture extrait par mini prep).   [...] L'Il2 étant sécréter, cela va te simplifier la vie... Après ta sélection, tu peux prendre ton surnageant de culture, le concentré un peu (centricon) et réaliser une analyse par électrophorèse SDS PAGE ou encore mieux en western blot afin de valider que tes cellules produisent ta protéine.  [...]

[Microbiologie] Microscope confocal et moisissures ?

Je suis actuellement étudiant en seconde année de DUT Génie Biologique. En fin de semestre 3, nous devons (par trinôme) rendre un rapport d'une dizaine de page sur le sujet Croissance des moisissures et analyse d'images. Pour l'instant, nous nous occupons uniquement de l'aspect croissance.  [...] D'après ce que j'avais trouver sur son fonctionnement, il permet, suite à un traitement informatique, d'obtenir une image 3D du produit analysé. On pourrait donc, à partir du x, y et z, calculer un volume non On le ferait à J0 puis plusieurs fois afin de comparer.  [...]