• Santé - Amorces, ADN, Chaîne

lyse des cardiomyocytes par tampon de lyse et dilution du lysat cellulaire en protéine

J'ai lysé mes cardiomyocytes par le tampon de Karla j'ai mis 1ml par puits d'un plaque de 6 puits mais proteinés sont diluées dans le tampon de lyse je ne sais pas comment les concentré.   [...] Même si le culot n'est pas visible, il y en a souvent un - j'ai fait des centrifugations et redilutions d'amorces ADN à la chaîne fut un temps.  [...]

[Biochimie] rôle de l'ARN dans la replication de l'ADN

l'ADN polymérase ne sachant pas commencer une chaîne, c'est une ARN polymérase ou primase qui va frabriquer une amorce puis cette amorce va être allongée grâce à l'ADN polymérase qui va ajouter de l'ADN dans le sens 5'/3' et enfin les amorces d'ARN vont être hydrolysés et remplacer par de l'ADN grâce à l'ADN polymérase I et le tout est soudé par une ligase. C'est bien ça ou j'ai oublié des étapes.  [...] J'aurais une autre question je ne comprends pas exactement comment la primase peut faire une amorce et intégrer de l'ARN dans le brin d'ADN.  [...]

[Génétique] PCR, marqueurs moléculaires

Comme cela vous a été signalé dans un autre message, il est IMPERATIF de faire preuve de courtoisie dan iles messages, ainsi que d'utiliser des titres EXPLICITES. Ceci est un avertissement et les messages ne respectant pas ces consignes seront supprimés, à l'avenir.   [...] C'est très simple en faite, la PCR veut dire Réaction en Chaine de la Polymérase, quand tu souhaites amplifier un fragment d'ADN d'une certaine taille en kb, tu peux avec des amorces, les 4dNTP, une polymérase thermorésistante et l'ADN double brin et le processus qui s'en suit, obtenir après un certain nombre de cycle, ta molécule d'intérêt en grande quantité.  [...]

[Génétique] Adn et arn

Oui effectivement ce schéma est un peu bizarre, le brin retardé est reconnu par le fait que ce soit de petit fragments d'ADN en discontinu (et donc comporte plusieurs amorces), alors que le brin avancé est en continu et ne comporte aucune discontinuité (et donc comporte une seul amorce).  [...] Pour les deux brins, que ce soit le brin avancé et le brin retardé, il y a sunthèse d'une amorce d'ARN et c'est la primase qui synthétise ces amorces, et c'est l'ADN polymérase qui synthétise les deux brins (retardé et avancé) et qui a besoin d'une amorce pour fonctionnée (Toutes les ADN polymérases synthétisent l'ADN dans le sens 5'-3', chez tous les organismes vivants, et aucune n'est capable de commencer une nouvelle chaîne sans amorces.  [...]

amplification de l'ADN

Après, il est possible de synthétiser de l'ADN de novo en rallongeant une chaine (enfin je pense ). Ca doit être comme ça que sont faites les amorces justement. Mais là on ne parle plus de PCR, ou d'amplification d'ADN.  [...] ah ah. la, ca m'interesse. c'est bien de rallonger UNE chaine que je me pose la question. mais on peut le faire deux manieres. du couper-coller avec des oligomeres (ou amorces par ex- suite de 20 nucleotides) ou d'ajouter les nucleotides un par par...et la, j'en perds mon latin.  [...]

[Biologie Cellulaire] Quelle est la définition de la vie ? - Page 2

Alors si un virus est vivant, quand est-il de mes fragments d'ADN que je mélange avec l'ADN polymérase et des amorces pour faire ma PCR.  [...] Enfin, je précise que les virus, ce sont des acides nucléiques (ADN ou ARN) et une capside (avec parfois un tégument et une enveloppe).  [...]

synthèse d'une amorce

En fait les entreprises qui synthétisent les amorces d'ADN le font par synthèse chimique. Si un jour tu as la chance d'avoir des cours de synthèse chimique (indispensable pour un biochimiste je trouve) tu verras que quand on synthétise une molécule en ajoutant des groupements, on peut faire des protections et déprotections.  [...] En fait je posait la question pour les amorces, car je pensait que le procédé serait le même pour les longues chaines. Ce serait bien quand même cool une imprimante à ADN. Hé professeur, la cartouche d'adénine est vide. Je fais comment pour imprimer mon gène.  [...]

[Biologie Moléculaire] PCR classique - PCR en temps réel !

Est ce que le principe de la PCR en temps réel est le même que celui de la PCR classique, et la seule différence est au niveau de l'analyse des produits amplifiés ( les amorces de l'ADN) ou il y'a une autre différence ou que j'ai rien compris du tout et que j'avais l'impression.  [...] La PCR, polymerase chain reaction, est un ensemble de réaction visant à amplifier un fragment d'ADN recherché. Pour faire court, on prend des amorces (Brins d'ARN) qui iront s'hybrider au début et à la fin du fragment que l'on veut amplifier. Grâce à une polymérase (Taq.  [...]

[Génétique] Extraction, purification et analyse d'ARN (Nanodrop et bioanalyser)

Voilà, je me demandais si on utilisait des amorces ADN Dans le cas où on utilisait des amorces ARN, il faudrait les dégrader et les substituer par de l'ADN La Taq pourrait-elle faire cela.  [...] Pour les PCR classiques on utilise toujours des amorces ADN. C'est plus facile a synthétiser et a manipuler. In vivo pour la réplication il y a synthese d'amorces ARN par la primase qui sont ensuite remplacées par de l'ADN mais en PCR il n'y a pas de raison.  [...]

[Biologie Moléculaire] Pcr

Le principe de la PCR c'est la copie d'un gène par une enzyme. une ADN polymérase, la Taq polymérase. Elle s'accroche à des amorces (en anglais. primers) qui définissent les deux bouts du gène. Ces amorces sont de petites séquences de 20 nucléotides en générale qui s'accrochent par complémentarité à l'ADN.  [...] L'enzyme va copier l'ADN entre ces deux amorces. Elle a besoin de bases/nucléotides. dATP, dTTP, dGTP, dCTP. Elle ajoute donc bout à bout chaque base depuis l'amorce de départ jusqu'à l'amorce de fin. D'où l'utilisation de la Taq polymérase, des amorces et des dNTP.  [...]