• Santé - Agent, Réducteur, Protéine

[Immunologie] Purification des IgY.

selon moi, l'échantillon sans agent réducteur sert à évaluer approximativement la taille totale de la protéine soit l'Ac IgY. Alors que l'échantillon avec agent réducteur permet de savoir le nombre de sous-unités qui forment les IgY purifiés.  [...] Salut, perso je vérifie en général l'intégralité de mes anticorps en faisant un SDS-Page en condition non réductrice, je regarde s'ils ne se sont pas dégrades avec le temps. Je pense que l'intérêt de la condition réductrice est un plus pour vérifier que tu visualises bien tes chaines lourdes et légères.  [...]

Liaison entre acide aminé

Si le milieu est réducteur, cette réaction n'interviendra pas. Pour étudier et éviter l'agrégation de protéine riche en cystéines, on utilise donc des agent réducteur (TCEP ou DTT la plupart du temps).  [...] A noter que le nom de l'acide aminé change lors de cette réduction. deux cystéines liées sont en fait des cystines selon la nomenclature.  [...]

[Biochimie] proteines

Sans traitement au B-mercaptoéthanol on obtien une seule bande de 120 kDa et après traitement par le B-merpcaptoéthanol on obtien une seule bande de 60 kDa. Sachant que la protéine native a une maisse moleculaire totale de 240 kDa,  [...] voilà, c'est la réponse c qui est juste, le B mercaptoethanol (ou dithiotrétol ou iodoacétamide) sont des agent réducteurs, empêchent l'oxydation des cystéines dans les protéines, donc rompent les ponts disulfures, avant d'utilisé cet agent, on a eu une bande de 120kda (deux bandes superposé de 120kda) parce que le PM de notre protéine est le double (240), puis juste après l'utilisation de notre agent réducteur, on a eu une bande de 60 Kda(donc 4 bande superposé de 60 kda) donc les 4 sous-unités sont liées par des ponts disulfure.  [...]

[Biochimie] chaine polypeptidique

Les sous-unités représente la structure quaternaire de la protéine, c'est l'assemblage de plusieurs struture tertiaire (qui lui est le repliment des structure secondaire dans l'espace).  [...] Dans une électrophorèse, c'est un peu compliqué, il faut être en condition dénaturante (avec du SDS par exemple) et utiliser du beta-mercaptoéthanol qui est un agent réducteur des ponts dissulfure. Cela va permettre de complètement dissocié la protéine. Cependant, selon ce que vous connaissez, il y a plusieurs démarches.  [...]

[Biochimie] electrophorese

je voudrais juste avoir un éclaircissement. la SDS page avec agent réducteur pont disulfure. est effectuer pour connaitre la masse molaire des protéine de mon échantillon, mais comme les protéines ne migrent pas intact à savoir qu'elles sont dénaturées ce sont les chaines polypeptidiques qui migrent selon leurs masses moléculaires.  [...] autre éclaircissement on dit que l'électrophorese sert a la séparation des macromolécules biologiques. je n'ai vu l électrophorèse qu'associer a la séparation de protéine. Mais pour les lipides ou glucides je ne voit pas comment se passe l électrophorèse.  [...]

[Biochimie] electrophorese

PS. quelques précisions pour interpréter un gel, chaque bande constitue une sous-unités protéique, bien sur, il faut voir si ta protéine a des ponts disulfure et que durant la manip, il y a eu utilisation d'un agent réducteur (le beta-mercaptoéthanol qui réduit les ponts disulfure).  [...] C'est pour ça que j'insiste sur le fait de savoir ou non si il y a un agent réducteur car les résultats peuvent être interpréter différament.-D.  [...]

[biologie moléculaire] Identification d'une molécule

Pour la suite, cette macromolécule est chauffée en présence de détergents et d'un agent réducteur des ponts disulfures. Le mélange est séparé par élctrophorèse et visualisé à l'aide d'un colorant spécifique. Quelles sont les macromolécules visibles par cette technique et quels leurs éléments constitutifs.  [...] Il a raison de parler de protéine car les expériences qui ont été faites après l'identification de la phosphatidylsérine sont typiques d'une analyse de protéine. En effet, s'il n'y avait que des lipides, où serait l'intérêt de traiter avec un agent réducteur des ponts disulfures et de faire migrer sur électrophorèse.  [...]

Membrane Plasmatique

Me voilà devant un qcm dont l'énoncé est. Si une membrane plasmatique d'une cellule eucaryote se soumet à l'action d'un agent réducteur.  [...] agent réducteur est une substance utilisée dedans cela réduit une autre substance. De cette manière, il devient oxydé. Une autre définition peut être formulée comme - un agent de réduction est dans a oxydation-.  [...]

[Biologie Moléculaire] protocole pour rendre des levures compétentes

Par exemple, je sais que le DTT est un agent réducteur et qu'il permet de réduire les ponts disulfure dans les protéines. Mais je ne comprends pas son rôle pour rendre des levures compétentes.  [...] Le sorbitol n'est pas fermentescible par les levures, mais il a un grand pouvoir de fixation pour l'eau. Je suppose qu'on veut éviter une dessiccation cellulaire par fuite des ions lors de l'électroporation. Le sorbitol diffuse peut-être au sein de la levure via les canaux protéiques dénaturés, à moins qu'il ne s'agisse d'inactiver un transporteur d'élimination du sorbitol intracellulaire.  [...]

[Biotechnologie] [sels] dans un tampon

En chromato d'affinite au metal comme cobalt ou nickel avec TAG histidine, le sel n'influe pas sur la fixation TAG. -. resine, en revanche cela permet de limiter les fixations non specifiques de tes proteines (dues au charges).  [...] Le TCEP est un agent reducteur tout comme le DTT, suivant le pH de tes tampons l'un est preferable a l'autre. Mais les deux sont la pour eviter l'oxidation de tes proteines (notamment des cysteines).  [...]