• Santé - ADN, Principe, Méthode

[Génétique] Séquençage de l'ADN

on a étudier les différentes méthodes de séquençage de l'ADN. la méthode chimique de Maxam et Gilbert et la méthode enzymatique de Sanger ainsi que le séquençage sans clonage. j'ai pas compris le principe concernant cette dernière et non plus comment analyser les séquences selon.  [...] Peux-tu préciser ta question Quelle méthode n'as-tu pas comprise.  [...]

[Génétique] Petite question sur la CGH

Bonjour,en cours on vient de voir ce matin le principe de la CGH ( méthode permettant d'analyser les variations du nombre de copies dans l'ADN ).  [...] Cette hybridation se fait toujours par complémentarité des bases AT et GC. D'ailleurs la complémentarité des bases d'ADN est un des principes fondamentaux dans l'utilisation de la cgh.  [...]

[Biologie Cellulaire] Marquage à l'iodure de propidium pour suivi du cycle cellulaire

Si j'ai bien compris le principe de cette méthode, la perméabilisation des cellules entraîne la sortie des fragments d'ADN de 180 bp, ce qui fait que l'intensité de fluorescence des cellules en apoptose est inférieure à celle des autres cellules (puisque proportionnelle à la quantité d'ADN), d'où l'apparition d'un pic en subG1.  [...] Le fait est que les deux méthodes ne quantifient pas la mort cellulaire de la même manière et que de nombreux biais peuvent s'y ajouter. Pour le bleu trypan par exemple, deux explications majeures s'affrontent ou se complètent. La première dit que les cellules sont colorées à cause d'une forte perturbation de l'intégrité de leur membrane qui devient perméable au bleu trypan.  [...]

[Biochimie] Séquençage de ddN

c'est plutôt simple si on comprend la méthode de Sanger. L'incorporation de didésoxynucléotides (ddN) arrête la synthèse d'ADN. Habituellement, comment se déplace l'ADN sur un gel d'électrophorèse (n'oubliez pas que l'ADN est chargé négativement en raison des nombreux groupements phosphates) Sachant cela et le principe de base de l'électrophorèse, on peut savoir quel brin est le plus long et lequel est le plus court.  [...] pour la méthode de Sanger dans un tube on ajoute l'ADN à séquencer, UNE amorce, la polymérase, des dNTP et des ddNTP, on lance la réaction de séquence (semblable à la PCR). Ici c'est l'ancienne façon de faire (l'originale). On met la même chose dans le tube mais un ddNTP différents dans chaque tube donc au final un tube avec ddNTP A, T, C, G.  [...]

Arrêt du vieillissement : l'une des clés du succès ? | Dossier

Enfin, pour compléter ce tableau d'une impressionnante cohérence, l'équipe française de Martin Holzenberger et d'Yves Lebouc, chercheurs à l'Inserm à Paris, a récemment démontré que l'inactivation chez la souris de l'un des gènes codant un récepteur du type de celui de l'insuline (récepteur IGF1 pour Insulin Like and Growth Factor1 ) augmentait significativement sa longévité et sa résistance au stress.   [...] Un tel travail de titan fut entrepris chez Caernorhabditis elegans par la méthode déjà décrite des puces à ADN et des ARN interférents. Le principe de l'approche consiste dans un premier temps, avec les puces ADN, à identifier tous les gènes qui s'avèrent soit activés, soit inactivés par les mutations entraînant l'accroissement de la longévité du ver.  [...]

[Biotechnologie] Hybridation genomique comparative

je voudrais connaitre la différence entre la CGH et la CGH array. je ne saisis pas bien la notion de micro matrice d'adn ainsi que le principe de les méthode de ces techniques.  [...] ..) Pour chaque position on sait exactement à quelle région ca correspond. Apres sur la puce tu hybrides l'ADN du témoin marqué disons en fluo verte, et l'ADN du patient marqué en fluo rouge. La puce est lue dans un scanner, et pour chaque position, tu as le ration patient/controle.  [...]

[Biologie Moléculaire] Déterminer la masse d'ADN dans une bande après électrophorèse

Sur le principe je ne pense pas avoir compris de travers, c'est surtout sur la determination de la quantité d'ADN dans chaque bande du marqueur qu'il y a quelque chose qui m'échappe. J'essaie de faire logiquement mais à chaque méthode personnelle je trouve un truc différent au bout.  [...] La question en elle-même est donc. comment faire pour déterminer la quantité d'ADn présente dans chaque bande du marqueur PM.  [...]

Grippe H5N1 : un kit pour détecter toutes les souches virales

Il fonctionne grâce au principe de la RT-PCR, une méthode bien connue pour amplifier de manière exponentielle un brin d' ADN à partir de l' ARN viral, pour mieux le détecter. Quelques heures suffisent pour dévoiler le résultat. Selon l' Agency for science, technology and research ( A*Star ), qui a collaboré au projet, ce kit est le seul de ce genre sur le marché.  [...] Ces systèmes de détection sont très importants pour mieux contrôler et gérer les épidémies de grippe. Chaque variété virale a ses propriétés particulières, en pouvoir de contagion ou de pathogénicité par exemple. En identifiant la souche, les autorités sanitaires détiennent toutes les données en main pour proposer la politique de santé la plus adaptée à la situation.   [...]

[Biologie Cellulaire] Cycle cellulaire

La méthode la plus utilisée est l'analyse par cytométrie de flux (FACS). On récupère les cellules traitées ou non par les molécules étudiées. Je te passe les détails, mais le principe et de marquer l'ADN par un agent fluorescent (en général l'iodure de propidium).  [...] j'ai trouvé une difficulté dans la comprehension de principe du FACS et surtout comment ce fait le tri cellulaire et dans l'interpretation de l'histogramme (facs). nombre de cellules = F(quantt d'ADN). aidez moi svp.  [...]

[Biotechnologie] Principe de Test ADN en parenté et criminalité

Pour identifer un individu via son ADN on se base efectivement sur l'etude des mini-satelites, ce sont de petites répétitions de quelques nucléotides (type. ACG..) répété x fois mais de facon fixe. Par exemple pour notre répétition ACG elle peut etre présente 3 4 ou 6 fois (c'est un exemple), on pourra donc différencier deux individus qui ne possède pas autant de répétition de ACG.  [...] En couplant plusieurs mini-satelitte (une 50aine en général) on peut, de facon quasi certaines, déterminer de quel individu provient une molécule d'ADN. L'autre facteur etant pris en compte etant bien sur le sexe (chromosome Y present ou non) qui permet d'eliminer deja 50% des possibilités.  [...]