• Santé - ADN, Intérêt, Sonde

[Biologie Moléculaire] l'hybridation d'une sonde

S'il vous plaît pour quoi on utilise les sondes...et je n'ai pas compris la difference entre des sondes sur suppirt solide et liquide merciii d'avancz.  [...] De ce fait, l'ADN d'intérêt et ta sonde vont s'hybrider, c'est à dire se fixer l'un sur l'autre.  [...]

[Biologie Moléculaire] Southern blot !!!

Plus précisément, si on ne l'utilise pas, on a des intéractions nitrocellulose-sonde parce que la membrane est chargée positivement (liaisons hydrogènes ou électrostatiques ) et que la sonde est ainsi bloquée.  [...] Merci pour tes précisions Flyingbike, mais j'ai mal saisi un truc. qu'est ce que tu appelles interactions non spécifiques avec la sonde.  [...]

[Immunologie] [Cyto"gramme"] abs & ordonnée?

Arf, en fait je crois que je commence à comprendre l'intérêt de la manoeuvre. c'est nous faire toucher du doigt ce cycle cellulaire justement.. (que je ne comprends pas très bien, même s'il nous dit sans cesse que c'est élémentaire).  [...] Si je comprends bien c'est que la BrdU s'insère dans la double hélice en phase S, par l'intermédiaire d'une sonde, qui est une portion d'ADN... Et cette portion d'ADN-sonde qu'on a greffé en quelque sorte sur les ADNs natifs, on peut y adjoindre un des fluorochromes (via anticorps sur brome), avec par exemple en l'occurrence du FITC... (coloration verte.).  [...]

[Biologie Cellulaire] Contrôler la pureté des protéines

Cependant il est écrit que les auteurs ont produits les protéines. C'est bien que l'on ne parle pas de protéines endogènes. D'où l'intérêt de produire ça dans un lysat de réticulocytes et de faire un gel shift pour tester la capacité des prot à interagir (puisque c'est sur ce point que la demande insistait).  [...] Piwi je ne te suis absolument pas. Pourquoi vouloir changer de modèle Orilye veut savoir si les protéines exprimées dans son système sont fonctionnelles, quel intéret de prendre des réticulocytes C'est la fonctionnalité dans le modèle d'Orilye qu'est intéressant ici.  [...]

[Biologie Cellulaire] Exercices important!!

ce fragement est utilisé comme sonde ds une expérience de southern blot sur l'ADN génomique totale a partir duquel cette sonde avait été générée.  [...] NB. on considère que l'on est en phase exponentielle jusqu'à ce que les bactéries soient a une concentration de 10^8 bactéries/ml. l'origine d'une colonie il y a 1 bactérie.   [...]

Sequence 5' pour un ADNc en Southern Blot

Lors de l'etude de la plus frequente maladie hereditaire, l'hemochromatose, on remarque que la pathologie est du au gene HFE. On effectue alors un southern Blot sur l'ADNc et l'ADN genomique, expression du gene. Ils sont digeres par l'enzyme de restriction Hind III. Voila les resultats que l'on obtient.  [...] Et deuxieme question. Comment expliquer les differences de kb entre la sonde extremité 5 ' pour l'adn c et la sonde extremité 5' pour l'ADNg.  [...]

[Biologie Moléculaire] Marquage directe et indirecte d'une sonde ADN

[Biologie Moléculaire] Marquage directe et indirecte d'une sonde ADN.  [...] parce que selon les conditions le signal que l'on cherche a détecter est très très faible.   [...]

gel shift : hhhheeeeelllp !!!!!!!

je suis en thèse et je travaille sur une proteine dont on voudrait confirmer l'interaction avec un promoteur d'un géne... je dois faire du gel shift mais dans mon labo on ne peut pas utiliser de radioactivité... j'ai vu qu'il existe des kits qui ne necessitent pas de radioactivité, il y en a même un ou il n'y a meme pas besoin de marquer la sonde d'ADN, il suffit de colorer le gel apres migration avec du SYbr green et du Sypro, cela a l'air tres pratique.  [...] Je te recommande le kit de Roche DIG gel shift kit. J'ai eu a l'utiliser pendant ma these, le marquage se fait par la digoxigenine et la revelation est de type western blot. C'est un kit clef en main, c'est a dire que tu as tous les tampons pour faire ton shift de la permiere a la derniere etape.   [...]

Marche sur le chromosome

disons, lors de cette technique on utilise une sonde et cette sonde peut tomber sur l'ADN répété et comme on a des clones qui sont hybridés et hybridés entre eux dans d'autres endroits.Cela va probablement couper la marche.  [...] on possède une sonde marqué d'ADN du début de la séquence du gène que l'on veut séquencer. On possède aussi une banque avec les gène qui nous intéresse.  [...]

[Biologie Moléculaire] Ribosonde

Pouvez vous m'expliquer simplement la façon dont on crée une ribosonde Je ne comprends pas en effet ce que contient le vecteur au départ (de l'ARN ou de l'ADN), pourquoi on l'appelle ribosonde et pas sonde tout court. D'ailleurs, c'est de l'ARN la ribosonde Bref, merci beaucoup d'avance.  [...] Une ribosonde est tout simplement une sonde d'ARN. Comme elle est composée de RIBOnucléotides, on ajoute ribo devant sonde pour la différencier des sondes d'ADN.  [...]