• Santé - ADN, Extrait, Protéines

Problème de traduction d'une recherche scientifique...

voila j'ai un problème concernant la traduction d'un mot dans une recherche scientifique... j'espère que des gens calé en la matière pourront m'aider.   [...] Tu prends un fragment d'adn correspondant à un gene cloné, des ribonucléotides tri-phosphates (atp, gtp, utp, ctp) donc un marqué radioactivement, et les protéines de la machinerie de transcription (ARNpolymérase II pour arnm) (extrait nucléaire ou protéines purifiées).  [...]

[Génétique] Retard sur gel

Ou alors comme tu dis un autre facteur de transcription à la place de la protéines couplé au FT. Mais dans ce cas dans les deux FT il y aurait un activateur et un inhibiteur car je vois pas l'intéret de 2 activateurs ou inhibiteurs si ils se marche dessus.  [...] En gros les retards sur gel sont assez chiant a interpreter, c'est pour ca que tu dois faire une piste d'ADN sans proteine, et differentes concentration de ta proteine. Sinon tu ne peux pas conclure grand chose.  [...]

[Biochimie] Casser des aggrégats

Tu dis que la protéine que tu veux voir forme des aggrégats mais cela dans des extraits cellulaires. A moins que des aggrégats ne se forment que dans des extraits de cellules surexprimant ta protéine et pas dans des extraits ne la surexprimant pas, tu ne peux pas dire que ces aggrégats sont ta protéine.  [...] En effet, la chaleur induit fréquemment la formation d'aggrégats pour les protéines surexprimées. Je pensais que ces aggrégats étaient visibles dans ton extrait cellulaire mais d'après ce que tu me dis tu les retrouves plutôt sur ton western donc ce n'est pas l'ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] Retard sur gel

Est-ce que dans une expérience de retard sur gel on peux faire interagir l'ADN avec tout un extrait de protéines Si c'est le cas comment peut-on savoir après de quelles protéines il s'agit.  [...] Sinon, en absence d'anticorps, on peut aussi utiliser un extrait protéique qui ne possède pas la la protéine en question (Knock down, ou KO s'il est disponible), et observer une diminution / absence du retard.  [...]

Identification des acides aminés d'une plante

Pour séquencer, effectivement il faut du matériel de départ. ADN ou ARN, ça ne donne pas les mêmes informations. SI tu t'intéresses aux protéines, il faut mieux travailler sur du cDNA obtenu a partir d'ARN. Ca n'est pas plus simple expérimentalement, puisque une fois l'ARN extrait (plus délicat que l'ADN), il faut le rétrotranscrire en ADN (réactifs assez onéreux) et ensuite le séquencer comme on ferait avec de l'ADN génomique.  [...] ==. Note. Pour enlever le surplus de sulfate d'ammonium qui fait précipité les protéines, il te faudra probablement faire des cycle solubilisation - centri - récupération du culot plusieurs fois de suite (la forte concentration en sulfate d'ammonium encore présent pourrait continuer a fait précipiter les protéines et gêner la suite de l'expérience.  [...]

[Biotechnologie] Principe de la PCR

La PCR est donc une technique de purification ou de clonage. L'ADN extrait à partir d'un organisme ou d'un échantillon contenant des ADN d'origines.  [...] la réaction de polymérisation en chaîne (détergents, EDTA, phénol, protéines…). La quantité d'ADN matriciel dans le milieu réactionnel pour initier.  [...]

[Biologie Moléculaire] augmentation du taux d'ARN mais non celui de la protéine

Ta protéine est une protéine nucléaire Est tu certaine de bien libérer toutes les protéines dans ton extrait protéique En particulier vas tu assez loin dans la concentration en KCl Si cela se trouve ta protéine reste fixée sur l'ADN.  [...] les extraits en WB sont des extarits de protéines totales pour chacun des traitements, pour le témoin positif et négatif. en WB je vois une grosse bande en 20% svf et rien dans les traitement.  [...]

[Biologie Moléculaire] protocole extraction ADN tissus formolés et non inclus en parffine

on me demande pour un cas particulier (nécropsie) dont l'ADN est surement dégradé, de tester une extraction d'ADN sur un tissus fixé au formol 10% et non inclus en paraffine.  [...] Pour les manips de ChIP, on extrait de l'ADN de cellules crosslinkées au formaldéhyde (formol si tu veux) donc ce genre de protocole pourrait coller. Si jamais tu t'orientes vers ce genre de protocole, attention à bien digérer à la protéinase K avant extraction de l'ADN.  [...]

de la tache de sang au profil génétique

j'aimerais savoir si quelqu'un peut m'aider à comprendre comment on extrait l'ADN d'une cellule et comment on le purifie pour ensuite utiliser la méthode PCR afin de dresser un profil génétique et identifier un criminel.  [...] Merci beaucoup pour vos réponses, ms je ne comprends pas très bien encore...à vrai dire il s'agit de mon sujet de TPE. Donc lorsqu'on explose la membrane cellulaire, le trizol permet-il de purifier ou d'extraire l'ADN Et qu'est-ce que le trizol exactement Je sais qu'une fois que l'ADN est purifé et extrait, on regarde sur les parties non codantes de l'ADN, les microsatellites.  [...]

Technique : RFLP

Après avoir extrait l'ADN de ces champignons, on va faire une RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) sur l'ADN extrait.  [...] tu as dis précédemment que l'adn était coupé en point x (car site de restriction) et cela donnait des fragments. Soit, mets tu dis que s'il y a absence de ce site alors il y a migration de fragments plus courts ce ne serait pas le contraire par hasard, car si présence de site de restriction alors ca coupe donc longueur moindre que s'il n'y avait pas de site.  [...]