• Santé - ADN, échantillons, Kit, Analyse

probleme DGGE

j'ai au préalable extrait l'ADN de mes échantillons grace à un kit commercialisé et fait pour l'analyse des sols, par la suite j'ai réalisé un produit PCR avec des amorces préalablement designé, j'ai également réalisé mon gel à gradient 45-65% d'acrylamide en suivant un protocoles pré-établi.  [...] Cependant lors de la migration seul le lader migre (seulement deux bandes...) mais les échantillons se diffusent dans les puits et ne migrent pas.  [...]

Les migrations humaines sous l'oeil de la génétique

Dix centres de recherche seront installés dans le monde pour effectuer les analyses génétiques de 100000 échantillons d' ADN collectés auprès des populations indigènes et de volontaires. Le public pourra volontairement participer au projet à travers l'achat d'un kit de prélèvements (les bénéfices éventuels serviront alors à des recherches additionnelles et des projets pédagogiques).  [...] les informations récoltées seront traitées et intégrées de façon totalement anonyme dans une base de données et les résultats mis à la disposition de tous.   [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ADN Hippocampe

Je compte utiliser le Kit Qiagen pour extraire l'ADN dans un premier temps, cependant mes échantillons sont de l'ordre de 7mg... Sachant que le kit demande un poids. 25mg je suis largement en dessous. Et j'ai peur de n'avoir pas assez de quantité d'ADN pour le traitement au bisulfite ( qui sera plus fragile donc tendance à vite se dégrader.  [...] ..). J'aimerais garder un maximum d'ADN pour obtenir par la suite une concentration de 250ng/20µL d'ADN avant son traitement au bisulfite.  [...]

[Biologie Moléculaire] pb migration ADNg sur gel

Sur le 2ème gel, (extraction sur d'autres échantillons avec le même kit), la patate est plutot décalée vers le bas. Il est possible que lors d'une resuspension j'ai cassé mon ADN.  [...] 2/ soit tu traites tes echantillons a la RNase pour 30 min, puis tu les passes soit sur une colonne du purif d'ADNg soit tu fais un phenol/chlo.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de PCR

On a fait amplifier de l'ADN de certains de nos échantillons et on faisant migrer les produits sur gel, il s'est avéré que y a eu contamination (révélation d'une bande sur gel correspondant au contrôle négatif).  [...] Pour savoir quel est le réactif de la PCR qui est contaminé, on a procédé à refaire une autre PCR mais cette fois ci sans l'ADN de nos échantillons. (Je sais qu'il est plus pratique de jeter les anciens réactif suspects d'être contaminés et refaire le travail avec un tt nouveau kit.  [...]

[Biologie Moléculaire] Amplification infructueuse

Merci, La précipitation du phosphate d'argent demontrera juste si il y a de l'ADN/ARN non pour ca je pense que le Nanodrop est plutot efficace, il y a bien de 'lADN dans mon echantillon, mais peut etre qu'il est pollué par autre chose qui empêche la polymerisation, mais ce quelque chose empechera pas l'hydrolyse je pense car c'est quelque chose qui a besoin de beaucoup moins de stabilité que l'action d'une pol.  [...] Ton ADN est bon, si on en juge les plaques - ça vient de tes échantillons je suppose. Par contre les enzymes du kit ont peut-être mal vieilli ou pas supporté un autre truc (transport, conditionnement, autre...).  [...]

[Biologie Moléculaire] Nettoyage d'ARNs & Transfert de protéines

Pour l'extraction d'ARN, la contamination vient bien du fait que j'ai utilisé du tissu congelé (jeté dans le tampon RLT à 20°C). Le commercial m'a conseillé de chauffer les échantillons juste 5 min à 30°C après broyage puis de bien vortexer pour dissoudre les sels.  [...] Cela dit j'ai le coup de main et je ne met que 5 min entre l'euthanasie et le moment où je snap freeze mes échantillons, et le tissu est disséqué à 4°C.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ADN par le Kit Qiagen

[Biologie Moléculaire] extraction d'ADN par le Kit Qiagen.  [...] je veux savoir si je pourrais utiliser le QIemp DNA Blood Mini Kit (Qiagen) pour extraire l'ADN à partir de tissu au lieu de QIemp DNA Mini Kit.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction d'ADN

je test actuellement plusieurs kit d'extraction d'ADN dont TaKaRa DEXPAT et un kit similaire édité par Macherey-nagel. ces kit permettent d'extraire l'ADN de coupes de tissu paraffiné.  [...] en fait je compare plusieurs façons d'extraire l'ADN à partir de coupes de tissus paraffinés. et pour l'instant j'ai essayé la technique classique au phenol/chlo et les deux kit précédemment cité.  [...]

[Biologie Moléculaire] Conservation de l'adn

Selon vous, combien de temps ces ADN peuvent être conservés dans un bon état, à -20°C, à 4°C Sachant que les ADN bruts sont dans le tampon d'élution du kit d'extraction, et les ADN dilués dans de l'eau DNase-RNase Free.  [...] Si tu as utilisé un kit il n'y a plus de nucleases donc le seul probleme est l'autolyse qui pour l'ADN n'existe quasiment pas a -20°C.  [...]