• Santé - Activité, Promoteur, Influence, Mutations, Séquences, Régulation

[Biologie Moléculaire] co transfection??

Vous transfectez votre vecteur codant pour votre facteur de transcription avec un autre vecteur portant, lui, une séquence promotrice sur laquelle peut se fixer votre protéine d'intérêt et codant pour une protéine rapportrice dont vous quantifierez la présence de la manière qui vous semblera la plus appropriée (dosage d'activité enzymatique, ELISA, réaction colorée, etc...).  [...] en calculant le rapport B/A, tu peux avoir un reflet de l'activité transcriptionnelle de ton promoteur et tester l'influence de mutations sur certaines séquences que tu supposes impliquées dans la régulation transcriptionnelle.  [...]

[Biologie Moléculaire] promoteur sequence regulatrice et activité CAT

mon exo consiste en la transfection de cellules utérines par un plasmide contenant un gène CAT,un promoteur eucaryote et des séquences cis régulatrices en amont du promoteur.  [...] C'est l'effet de l'E2 ou de la progesterone sur l'expression du promoteur qui est étudié. L'interaction de E2 ou de la progesterone sur les séquences régulatrices cis peut entrainer une modification de l'expression du promoteur et donc de l'activité CAT (comme dans le cas de l'estradiol).  [...]

[Génétique] structure du gene, help!!

Un promoteur suivi quelques kilobases plus loin d'un terminateur. ce qu'il y a entre les deux peut correspondre à une séquence codante (le gène codera une protéine), ou non codante et on obtiendra un ARN non codant.  [...] Les opérons se retrouvent chez les procaryotes, cela consiste en un regroupements de séquences codantes sous le controle du même promoteur. Les opérateurs sont des séquences régulatrices qui servent à moduler l'activité du promoteur. Silencer= inhibition du promoteur, enhancer = stimulation.  [...]

[Biologie Moléculaire] Introns et régulation

Les introns sont des séquences non codantes à l'interieur d'un gène, il existe cependant des séquences non codantes extragéniques. Donc est-ce que toutes les séquences non codandes entre intergéniques interviennent dans la régulation et pour ceux qui le sont régulent-ils tous en tans que séquence (cis) est-ce que toutes les séquences régulateurs qui agissent par l'intermédiaire d'une protéine régulatrices sont des gènes (avec un promoteur terminateurs introns exons.  [...] Tout d'abord, non, toutes les séquences non codantes extragéniques n'interviennent pas dans la régulation (ex. les minisatellites). Il en existe cependant qui interviennent dans la régulation de façon cis. pour faire très simple, imagine qu'elles ont une séquence particulière à laquelle une protéine A pourrait se lier, et celle ci se lierait à une protéine B elle même liée au niveau du promoteur.  [...]

problème de génétique

Le promoteur permet l'initiation et la régulation de la transcription, il se situ juste avant les séquences qui doivent être transcrites.  [...] Par ailleurs, il y a probablement autant de tailles de promoteurs que de preomoteurs, donc de genes differents. C'est un peu exageres surement car certains genes sont regules de la meme facon...mais bon.  [...]

Mutation?!

euh je pense pas que j'ai bien compri,alors on recherche rarement les mutations sur le promoteur alors qu'elles sont trés fréquante a ce niveau.juste parcequ'elle sot difficilles à identifieril y aura pas d'influence sur le géne et le phénotype.  [...] Ce que j'y ai compris c'est que les mutations au niveau des séquences régulatrices subissent une assez forte pression de sélection. Càd que l'on ne peut pas accepter que les mutations surviennent trop et/ou trop souvent parce que changer le niveau d'expression d'un gène peut être mauvais pour l'organisme concerné.  [...]

[Biologie Moléculaire] Régulation cis et trans

Les éléments de régulation en trans sont des protéines qui se fixe à l'ADN (ex. sous-unité sigma de l'ARN polymérase chez les procaryotes).  [...] Cher les eucaryotes, de nombreux facteurs généraux de transcription se fixe au promoteur (boite TATA) et fixe l'ARN polymérase à l'ADN.  [...]

promoteur pro/eucaryotes

J'ai des questions peut-être trop précises sur les différentes boîtes (box) au niveau des séquences de régulation des gènes procaryotes et eucaryotes, mais j'espère trouver un passionné de génétique pourra sûrement me déméler les brins d'ADN sur les questions suivantes.  [...] Ces séquences recrutent le complexe d'initiation de la transcription, qui va lui fixer la polymerase. Ce sont donc des séquences cis- régulatrices qui fixent des facteurs trans-régulateurs et qui constituent le promoteur du gène. Il y a un autre type de séquence cis régulatrice, les enhancers, qui eux aussi fixent des facteurs pour activer la transcription, mais qui peuvent agir à distance et dont tu peux changer leur orientation (c'est pas le cas des séquences du promoteur qui sont située environ entre -100 et le site d'initiation de la transcription).  [...]

biologie cellulaire, transcription ARN

La fixation et l'activation de l'ARN polymérase sont contrôlées par des facteurs de transcription (éléments trans-régulateurs) qui se fixent au niveau de séquences cis-régulatrices spécifiques appelées enhancer et silencer, situées à des distances variables du site de démarrage de la transcription.  [...] Pour compléter d'un autre point de vue, la transcription se fera bien par l'action de trans-régulateurs (les facteurs de transcription protéiques) sur des séquences cis-régulatrices du promoteur (séquences d'ADN). Les séquences du promoteur peuvent être des silencer et être reconnus par des facteurs de transcription inhibiteurs, ou des séquences enhancer et recruter alors des facteurs de transcription activateurs.  [...]

Comment est fait un promoteur ?

un promoteur comprend le site d'initiation (sur lequel vient se fixer l'ARN polymérase II) ainsi qu'une séquence en amont (boîte TATA),sur laquelle vient se fixer un facteur de transcription.  [...] La deuxième partie du promoteur est le promoteur distal, c'est une région qui peut s'étendre jusqu'à 1OOO paires de bases en amont de l'initiation. C'est là où on a toutes les séquences reconnues par des facteurs transcriptionnels (répresseurs et activateurs), qui en intéragissant entre eux induisent un repliement spécifique de l'ADN, ce qui va provoquer une régulation très fine de la transcription des gènes.  [...]