• Santé - Acides, Protéines, Méthode

[Biologie Cellulaire] Dalton -> taille ARNm

Le poids moyen d'un acide aminé est de l'ordre de 130 -135 Da. A partir de là on peut calculer le nombre d'acides aminés dans la protéine. Cependant, à l'usage, cette méthode n'est pas la bonne parce que la répartition des acides aminés dans les protéines n'est pas aléatoire et les acides aminés légers sont plus fréquents que les lourds.  [...] ca te permet de determiner le nombre d'acide aminé de ta protéine. Ensuite il faut combien de nucléotide pour incorporer un acide aminé ca te permet de connaitre la taille de la sequence codante, qui est la taille minimale de l'ARNm puisqu'il manque toutes les sequences non codantes.  [...]

[Biochimie] Dosage spectrophotométrique des protéines

Il y a le nanodrop pour doser les protéines. Dans le principe, cela reste de la spectrophotométrie puisqu'on dose l'absorbance d'une goutte d'échantillon déposée sur une lentille qui émet un faisceau de lumière à 280 nm. L'avantage est qu'il n'y a pas besoin de cuve en quartz pour le dosage (à la différence des spectrophotomètres classiques pour le dosage de protéines sans coloration), il n'y a pas besoin de coloration, et surtout très peu de matériel biologique est utilisé pour le dosage puisque le volume de la goutte déposée pour le dosage est de l'ordre de 1 à 3 µl.  [...] Vous avez aussi le dosage par Warburg et Christian. Il permet la séparation des acides nucléiques et protéines selon un ratio propre à la méthode.  [...]

[Biochimie] Western blot sur Fractions polysomales

Pour chaque fractions, j'extrais soit les ARN totaux soit les protéines. L'extraction des ARN totaux se passent très bien malgré la présence de sucrose, mais l'extraction des protéines ne me donne pas de résultats satisfaisants.  [...] Bonsoir, voici une méthode qui permet de séparer les acides nucléiques des protéines, et qui devrait donc fonctionner sur tes fractions. Cependant je ne l'ai jamais tester sur des polysomes.  [...]

[Biochimie] méthode etude macromolécules

La spectrophotométrie est une méthode permettant de suivre la purification des protéines en faisant appel aux caractéristiques des acides aminés aromatique visible a 280 nm.  [...] Comme tu le dis il s'agit d'une méthode pour suivre la purification des protéines c.a.d observer la quantité de protéines (par exemple) à un instant T. Cependant, il faut d'abord purifier les protéines par exemple en colonne d'exclusion par la taille (ou toutes autres méthodes) tu récolte au fur et à mesure dans des béchers puis direction cuve de spectro pour avoir une idée de la quantité (il y a ou pas et en quelle proportion).  [...]

[Biologie Moléculaire] Déterminer le gène codant pour une protéine

J'ai pris l'habitude pour chaque cours, quand c'est possible, de me demander ce que je ferai si j'étais en labo de recherche et que je devais étudier le mécanisme présenté dans le cours. Ce matin j'étudiais les transporteurs protéiques de la membrane plasmique, je me demandais si il y a des méthodes d'études spécifiques, j'ai fais quelques recherches mais je n'ai rien trouvé de satisfaisant.  [...] Alors je me suis dis que j'analyserai le transporteur comme n'importe quel protéines (western blot etc). Mais je me demandais comment déterminer la séquence d'acides nucléique codant pour une protéine je me doute qu'il faut déterminer l'enchainement d'AA avec la méthode de sanger par exemple, mais je ne saurai quoi faire après.  [...]

Le RV du docteur Cocaul : le jeûne, fumisterie ou nouvel élixir de jouvence ?

Spécialiste de la nutrition, le docteur Arnaud Cocaul nous propose un rendez-vous mensuel pour des conseils avisés. Le sujet de ce mois. la mode du jeûne. Les scandales sanitaires répétés, les doutes actuels portant sur le sucre, le lait, y compris infantile, le gluten, le bio, l'abattage des animaux, l'épandage de pesticides, l'échec patent des régimes, la montée en puissance des maladies de société comme l'obésité, le diabète, les maladies cardiovasculaires, la volonté de revenir vers des bases saines, vers plus d'éthique.   [...] Oui, je me méfie du jeûne car souvent il a été mis en avant comme méthode amaigrissante. Or, nous savons qu'au bout de 1 à 5 jours de jeûne, l'organisme se sert au détriment des acides aminés et cela se fait non pas en puisant dans des réserves (inexistantes) en protéines mais bien au détriment de la masse musculaire, qui fond rapidement, avant que d'autres mécanismes moins péjoratifs ne se mettent en place.  [...]

[Biochimie] Coloration Bradford.

La méthode de Bradford est un dosage colorimétrique, basé sur le changement d'absorbance (la mesure se fait à 595 nm), se manifestant par le changement de la couleur du bleu de Coomassie après liaison (complexation) avec les acides aminées aromatiques (tryptophane, tyrosine et phénylalanine) et les résidus hydrophobes des acides aminés présents dans la ou les protéines.  [...] Cependant, je suis censé me référer à cette gamme étalon pour déterminer la masse totale de protéine dans mes tubes. Sachant qu'il s'agit de mélanges d'une 20ene protéines différentes provenant de blanc d'oeuf... je me demande si j'ai le droit de déterminer des masses de protéines d'oeuf presentes en utilisant une gamme étalon d'albumine de boeuf.  [...]

NaCl et acidose - Page 2

de la dilution, (de réactions chimiques entre les bases tampons (phosphates) l'hémoglobine et les protéines plasmatiques), et en outre,  [...] L'utilité du concept de stewart vient du fait que justement cette méthode du calcul de la constante électroneutralité permet d'isoler les concentrations de l'organisme en acides faibles (cad les systèmes tampons. HCO3-, protéines, phosphates).  [...]

[Biochimie] Chromatographie d'exclusion sur colonne !

Après coloration par la méthode de Bradford (bleu de Comassie se colore en bleu en présence de protéines dans une solution acide) et mesure de l'absorbance du complexe formé à 600nm. on observe un pic d'absorbance pour la thyroglobuline et un pic pour le cytochrome C.  [...] Après coloration par la méthode de Bradford (bleu de Comassie se colore en bleu en présence de protéines dans une solution acide) et mesure de l'absorbance du complexe formé à 595 nm.  [...]

Généralités sur la protéine Kinase C | Dossier

Il est à noter que la régulation de ces différentes kinases montre également peu de variations. Les régulations possibles sont au nombre de cinq. la première est faite par ajout d'un domaine ou d'une sous-unité en réponse à un second messager (AMP cyclique se liant au domaine régulateur de la protéine kinase AMP cyclique dépendante PKA), la deuxième peut être une liaison à une sous unité dont le niveau d'expression varie avec l'état physiologique de la cellule (régulation des protéines kinases cycline-dépendante par la cycline ), la  [...] rétrocontrôle (cas de la kinase à chaîne légère de myosine), la dernière méthode de régulation se fait par phosphorylation ou déphosphorylation de résidus d' acides aminés localisés sur des segments particuliers de la kinase (cas de la kinase calmoduline dépendante II) (Johnson L.N. et al., 1996).  [...] L'activité kinasique peut être directement régulée par de petites protéines liant le GTP, notamment par un site HR1 permettant la reconnaissance de protéines Rho liant le GTP (Flynn P. et al., 1998). Ce site HR1, appelé initialement Rho-binding, est composé de trois répétitions d'environ 55 acides aminés, il existe plusieurs variantes de ce motif permettant des interactions avec différents complexes GTP-RhoA sous leur forme active ou inactive (Mellor H. et al., 1998).  [...]