• Forum - Western, Techniques, Detection, ADN, ARN, Plantes

[Biologie Moléculaire] western blot/southern blot

[Biologie Moléculaire] western blot/southern blot.  [...] j'ai un exposé sur la technique de western et northern blot aucours duquel je dois présenter l'importance de ces techniques lors de ses utilisations pour la détection d'ADN et d'ARn chez les plantes. pour cela je cherche un article scientifique qui exprime l'une de ces techniques et spécialement chez les plantes tels que le riz, la pomme de terre.  [...]

[Biochimie] qPCR :

Si tu as accès à ce type de matériel, il pourrait être intéressant d'essayer un western blot sur tes cellules (détection de la protéine) ou un northern blot (détection des ARN).  [...] Je viens de remonter un peu dans le fil et n'ai pas vu le terme Blast...As-tu blasté tes primers Le profil dédoublé de la courbe de fusion m'oriente d'autant plus vers les amplifications non spécifiques qui parasitent ta PCR. Blaste tes primers et donne nous les e-value qui sortent, et surtout si c'est bien ton gène qui arrive en tête de liste l'idéal étant une e-value inférieure à 0.001.   [...]

[Biologie Moléculaire] Biologie moléculaire et médicament

Ma recherche vise à englober les différentes techniques qui permettent d'élucider ce mécanisme d'action au niveau cellulaire et sub-cellulaire.  [...] Outre les techniques de type Western blot, biopuces à ARN, cytométrie etc..., je creuse mais je tombe souvent sur le chemin inverse, à savoir. on a une cible et on veut développer un médicament dessus.  [...]

[Biologie Cellulaire] Southern Blot, Northern Blot et Western Blot

Salut à tous, je suis actuellement en PACES et j'ai vu en biologie cellulaire les trois techniques que sont le Southern blot le Northern blot et le Western blot alors voilà je sais que cela sert respectivement à l'étude de l'ADN, de l'ARN et des protéines.  [...] Petit exemple concret. admettons que tu travailles sur la maladie de Steinert, c'est une maladie musculaire (mais peu importe). Tu découvres une mutation sur le gène DMPK chez les patients qui ont cette maladie. Une question intéressante est de savoir si la protéine DMPK est présente chez ces patients malgré la mutation Pour cela tu peux prendre des cellules de patients et de personnes saines et faire un western blot pour comparer la quantité de protéine DMPK dans ces deux conditions.  [...]

[Biologie Moléculaire] Southern blot !!!

L'ADN de sperme de saumon permet, pendant le southern blot (et d'autres techniques comme le gel shift (EMSA)), d'empêcher les interactions non spécifiques avec la sonde (un peu comme la BSA ou le lait dans les western blot ou en immunohistochimie).  [...] je ne crois pas que l'adn de saumon soit en quantité saturante. Il ne faut pas oublier que ton fragment d'intérêt a migré sur un gel, et est donc concentré sur une petite surface, ce qui n'est pas le cas de l'adn de sperme. Je seche un peu quand même parce que c'est plus vraiment une technique d'actualité.  [...]

[Biochimie] Différence western blot / immunoprécipitation

Ce sont deux techniques qui n'ont absolument rien à voir. Le Western Blot consiste à révéler la présence d'une protéine sur une membrane grâce à des anticorp, tandis que l'immunoprécipitation consiste à isoler une protéine -éventuellement en complex avec d'autres protéines/RNA/ADN - à partir d'un lysat.  [...] Concernant l'association de ces deux techniques, c'est en effet souvent pour mettre en évidence la présence de complexes protéiques.  [...]

[Biologie Moléculaire] Réalisation d'un Southern Blot

Encore une question. hors mis un northern blot et western, quelle autre technique pourrait être utilisée pour détecter une séquence génique dans de l'ADN.  [...] Mais il me semble que tu fais une erreur majeur en considerant le northern et le western sont des techniques pour depister se que tu appel sequence genique.  [...]

[Biologie Moléculaire] Immunohistochimie/ Immunomarquage

Les techniques telles que Western Blot, Dot blot ou ELISA sont-elles comprises dans l'un des deux domaines précédent ou rien à voir.  [...] Dans le cas d'un western blot, c'est +/- le même principe détection à l'aide de deux anticorps sauf qu'on agit sur une membrane. Après avoir fait migrer ta protéine sur une membrane, tu la détectes à l'aide d'anticorps primaire et secondaire. Cependant cette technique est bien plus fastidieuse.  [...]

[Biologie Moléculaire] Western blot difficile d'une protéine de réparation de l'ADN

Dans le but de mettre en évidence des différences dans l'expression de la Poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) (une protéine de réparation de l'ADN) chez des cellules soumises à différentes concentrations de drogue X, j'effectue des Western Blots.  [...] Entre 7 et 10kDa (ou 5). Je ne me souviens plus très bien. Et je l'ai fait sous la direction d'un ancien du labo, donc je dois avoué que j'ai été assisté (ou l'assistant ). Donc je ne pourrai pas t'aider sur ce genre de détails. Et puis de toute façon, ma manip' m'avait donné des résultats négatifs, qu'on attendait (on ne détectait déjà pas d'ARN, alors...).  [...]

[Biotechnologie] techniques de détection

Dans mon cours j'ai étudié divers outils moléculaires de détection comme le southern et northern blots, random priming, etc etc, et j'aimerais savoir quand utiliser quel outil.  [...] Ce que je cherche ce n'est pas l'explication de ces techniques mais quand utiliser laquelle comment choisir en résumé. Et cela je ne l'ai pas trouvé sur internet.  [...]