• Forum - Western, Haute densité, Marqueur, Baisse, échantillons

utilisation de logiciel image J

Je voudrai analyser mes résultats du western blot avec le logiciel Image J, j'ai une question pour les personnes qui ont déjà utilisé ce logiciel s'il vous plait,  [...] Comme j'ai 3 différents western ( mon Cruz marker = controle auquel je compare les densité de mes bandes ) a réagit différemment, d'habitude quand j'avais 2 différents western je prend toujours la plus haute densité de mon marqueur et je la divise par la plus baisse puis je calcule la densité adjustée de mes échantillons, comme j'ai 3 western différents je ne sais pas comment les adjuster.  [...]

[Microbiologie] Biofermenteur

On a fait une expérience qui consiste à mettre une solution de levures avec des nutriments(sucre) dans un bioréacteur puis on a commencé l'agitation et dans un certain temps soit 10 minutes après le début d'expérience on a prélevé un échantillon du milieu puis on l'a dilué au 1/50 pour lire la densité spectroscopique à 600nm.  [...] Alors le lendemain on a prélevé une autre fois un échantillon et on l'a dilué au 1/50 puis on a lu sa densité sur le spectro alors là, on a obtenu une valeur moins que la valeur de la premiere expérience.  [...]

[Biotechnologie] production industrielle d'interferon alpha-1

Avec les procedes utilisant E.Coli on atteint, grace à la fermentation en cultures cellulaires à haute densité d'excellents rendements.  [...] Comme exemple citons la production de l'IFN alpha 2a (Roféron A marque déposée )par les produits Roche (procede utilisant le passage en cellules E.coli K12) les cellules sont d'abord lysées par congélation. puis on les façonne en pelotes contenant les corps d'inclusions recombinants, facilement stockables,ensuite on reprend les pelotes par un tampon et on mélange pour en extraire les protéines avant de séparer le surnageant des débris cellulaires par ultracentrifugation.  [...]

[Biologie Cellulaire] etude du niveau de phosphorylation d'une protéine en WB

Le problème est qu'en western blot j'ai beaucoup de variation d'actine alors que les cellules ont été ensemencées à la mm densité.  [...] Pour l'extraction, si tu veux conserver les phosphorylations de ta protéine, il faut de l'orthovanadate de sodium (inhibiteur de phosphatase) dans le tampon et éventuellement d'autres inhibiteurs. Mais surtout garder les échantillons dans la glace le plus possible une fois l'extraction faite, cela limite d'autant plus les déphosphorylations.  [...]

Le cholestérol détruit les neurones ?

le cholestérol étant une molécule globalement apolaire, elle est transportée au sein du plasma (solution colloïde principalement composée d'eau) via des particules protéiques qui forment des navettes appelées lipoprotéines. On retrouve ainsi les liporotéines de basse densité (LDL, Low Density Lipoprotein), qualifiées de mauvais cholestérol, les lipoprotéines de haute densité (HDL), les VLDL, et les chylomicrons.  [...] Il a été démontré que certaines personnes ont un métabolisme dérégulé, associé à une accumulation de cholestérol et qui peut prédisposer à l'apparition de ces maladies neurodégénératives. Ainsi, les statines (inhibitrices de la HMG-CoA réductase, enzyme clé de la voie du mévalonate) apparaissent comme des traitements préventifs de ces maladies chez ces populations à risque.   [...]

Fatigue et qualité de sommeil: choix literie?

On dit parfois que les matelas à mémoire de forme doivent avoir une densité importante (j'ai vu quelque part que 80 kg/m3 était nécessaire). Que penser par exemple d'un matelas présenté comme doté d'une zone d'accueil à mousse à mémoire de forme, visco élastique, ondulée multizone 50 kg/m3 sur âme polyuréthane haute résilience 30 kg/m3.  [...] pour ne pas finir sur une note totalement negative les dernieres generations de mousse a memoire se font sur des plaques en guise de semelle a base de mousse hr (haute resilliance)minimum 38kg de densité voir 50 kg si possible genre bultex.  [...]

[Biologie Cellulaire] dosage d'une hormone

L'idée, comme pour tous les dosages, va être de trouver la concentration inconnue des échantillons dont j'ai obtenu la densité optique. En principe dans le cas de droite, une régression linéaire y=Ax+B je cherche X et je détermine avec excel l'équation de la droite.  [...] Mais là je dois trouver une équation de droite simple pour pouvoir avoir mes concentrations. Le fournisseur conseille de passer en échelle logarithmique et d'utiliser une règle de calcul à quatre paramètres.   [...]

[Biologie Moléculaire] Glycosaminoglycane et rétention de l'eau

En révisant mon cours j'ai lu que les Glycosaminoglycane (GAG) avaient une forte rétention de l'eau. Mais je me demande bien pourquoi. en cherchant sur Internet j'ai uniquement trouvé comme justification que c'était dû au fait que les GAG sont chargés, mais en quoi ça a un impact sur la rétention de l'eau Quel est le mécanisme.   [...] Les GAGs sont généralement fortement chargés négativement notamment parce qu'ils sont sulfatés (OSO3-). la haute densité de charge négative attire des ions + du liquide extracellulaire, en particulier le sodium. C'est le sodium séquestré qui est l'agent osmotique responsable de l'hydratation des GAGs.  [...]

Plasma d'aspect lipémique

Les échantillons de sérum ou de plasma sont quelques fois troubles à un degré variable dû à un contenu augmenté en lipoprotéines. On parle d'échantillons troubles, translucides ou à aspect laiteux. Le degré de turbidité ne dépends pas seulement du contenu en triglycérides, mais surtout de la présence de lipoprotéines.  [...] Comme les échantillons normaux ne montrent pas de turbidité excepté après un repas gras, l'aspect lipémique d'un échantillon est cliniquement significatif et doit être reporté par le laboratoire. Cela peut indiquer une hypertriglycémie due à une augmentation des chylomicrons, des lipoprotéines de très basse densité (VLDL) ou des deux.  [...]

[Biologie Moléculaire] vecteur

Les bactéries contenant les plasmides sont mises en culture dans un grand volume (jusqu'à 2 litres de milieu de culture). Quand la concentration bactérienne atteint une valeur suffisante, on traite par un antibiotique (comme le chloramphénicol) qui empêche la croissance bactérienne sans affecter la réplication des plasmides.   [...] On récupère les bactéries par centrifugation. Puis, on perméabilise la paroi bactérienne par un traitement doux permettant d'obtenir un passage en solution des plasmides qui sont plus légers que l'ADN bactérien. La purification des plasmides peut être ensuite réalisée par chromatographie liquide à haute performance ou ultra-centrifugation en gradient de densité.  [...]