• Forum - Volume, Expérience, Quantité, ADN

Préparation d'ADN plasmidique

Calculer le volume V qui a été utilisé au début de l'expérience pour préparer une quantité totale de 10ug d'ADN plasmidique dans 1mL.  [...] les données sont nombreuses et certaines ne sont pas utiles (mon problème vient peut etre de là) Do initiale=0,1. Do finale (après 12h)=4.   [...]

[Biochimie] Calcul de la vitesse maximale

Vous avez donc avec Exao tracé l'évolution de %O2 en fonction du temps, experience répétée avec des qtés de substat différentes (lié à un volume d'eau oxygénée différent et donc d'une quantité d'O2 différentes).  [...] Ces 4 valeurs ne sont pas issues d'une formule, mais correspondent pour chaque expérience (avec une [S] différente) au coefficient directeur de la droite tangente à la courbe obtenue en exao, au début de la réaction (Il s'agit donc de la vitesse initiale Vi).  [...]

[Biologie Moléculaire] Interprétation PCRq en temps réel (SYBER Green)

J'ai confondu avec la différence de quantité relative d'un point de la gamme à l'autre qui elle, en toute logique, doit correspondre au facteur de dilution si ton efficacité est bien de deux.  [...] Le nombre de copie permet de revenir à une sorte d'unité internationale, car à partir des conditions expérimentales qui peuvent varier d'un manipulateur à l'autre (quantité d'ARN de départ, conditions de qPCR, mix utilisés etc...) les Ct peuvent varier. Après une normalisation par un gène de ménage défini et/ou l'utilisation d'une gamme étalon, on s'affranchit de ce genre de problème.  [...]

[Biologie Moléculaire] Amplification infructueuse

J'utilise la Taq de invotrogen, mais dans leur protocol ils prennent un volume total de 100 microlitres, cependant pour le template ils disent juste 1-20 microlitres, (ce qui en soi est une fourchette assez élevée) et ne donnent pas d'indication sur la quantité d'ADN en ng optimale a prendre,  [...] j'ai essayé d'augmenter la concentration finale de MgCl2 comme dans le cas de non-produit ca peut etre du a une trop faible quantité de Mg, ducoup jsuis passé de 1.5 a 2.5 (meme si 1.5mM devrait etre suffisant normalement) j'ai aussi augmenté ma quantité de dNTP qui etait 5x inferieur a ce qui était préconisé de 0.  [...]

[sauvetage d'animaux] Opération : sauvetage de moineau - Page 2

se que j'aurais du preciser, c'est que tous ces alimants je leurs en donne a faible quantité, et non a longueur de journée tout simplement pour pas qu'ils est une carence alimantaire, car ce n'ai pas tres bon de leur donner toujours la meme nourriture.  [...] Quantité. ne surtout pas dépasser en volume un quart d'une noisette. S'il a déjà des plumes sur le dos et quelques unes sur le ventre et des petites plumes sur la queue la quantité peut atteindre le volume d'une demi noisette.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction d'ADN par les sels (salting out)

11. Ajouter 2 volume d'Ethanol absolu 100% glacé et mélanger doucement par retournement jusqu'à apparition de la méduse d'ADN.  [...] Tu ressuspends au feeling. Plus ton volume est grand, plus ton ADN sera dilue. Dans tous les cas si tu veux etre precis tu dois quantifier. Perso j'utilise ni de l'eau ni du TE, mais du tris 10mM pH 8.0. L'EDTA du TE peut inhiber pas mal de reaction, c'est souvent un peu chiant.  [...]

[Physiologie] Physiologie rénale

ah bon si on multiplie le debit par la concentration on obtient pas la quantité.pourtant le debit ce n'est q'un volume par unité de temps.  [...] Si tu te rappelles le gros chapitre d'avant sur les compartiments extra- et intracellulaire, si vous l'avez vu, on dit que le plasma doit garder impérativement une même composition et un même volume, donc autant pour le nombre de soluté que pour la quantité.  [...]

Housekeeping gene (gene de ménage)

Ce que j'ai envie de faire c'est de d'amplifier un gène de ménage (spécifique à l'Homme) dans un volume d'échantillon de sang donné puis amplifier le même gène dans le même volume d'échantillon de selle, puis faire une normalisation par dilution des quantités d'ADN. Qu'en pensez vous.  [...] Mais dans votre cas, vous ne mesurez pas un transcrit, mais une quantité de cellules. Mesurer un transcrit (que ce soit d'un housekeeping gene ou de n'importe quoi d'autre) introduit un biais, car (par expérience) même un gène considéré comme référence n'est pas utilisable quand on compare des tissus différents.  [...]

[Biologie Moléculaire] qRT-PCR

J'ai extrait l'ARN total puis dosé par spectro. Mon problème est à l'étape de la RT. Mes concentrations sont d'environs 30µg/mL (dans un volume de 30µL d'eau). Sur tous les protocoles que j'ai pu voir, les RT sont effectués à partir de 1µg d'ARN dans un volume final de 20µL, je n'ai pas de tels quantité.  [...] J'ai vu que certain ne dosait pas leurs ADNc avant PCRq. Ils diluaient le mix de RT avec de l'eau et en utilisaient un certain volume pour la PCRq. Comment déterminer à ce moment là la quantité d'ADNc utilisée Est-ce-que 1µg d'ARN donne 1 µg d'ADNc lors de la RT.  [...]

[Biochimie] tampon phosphate

salut tout le monde.. voila j'ai un petit pb ac un exo de bioch, sa fait un bon bout de tps que je suis bloquée j'ai demandé a des amis de m'aider ms rien a faire...dc si vous pouviez m'aider un ti peu.   [...] - Tu connais le volume et la concentration (c'est à dire la quantité par volume) à laquelle tu souhaites faire ton tampon. Tu peux donc calculer la quantité de molécules (exprimée en moles) qu'il te faut dissoudre.  [...]