• Forum - Volume, Concentration, Enzyme

[Biochimie] Activité Spécifique

La concentration d'enzyme initiale est de 60¼M, le volume réactionnel 3mL et le volume d'enzyme utilisé 100¼L. La masse molaire de l'enzyme est de 40kDa.  [...] Certaines personnes ont calculé l'AS (UE/mg), d'autres ont appliqué la formule Kcat=Vm/[E] i = Vm/(C x V d'enzyme x MM). Mais je ne comprends pas, car le Kcat n'est pas l'activité spécifique mais l'efficacité catalytique... C'est la même chose.  [...]

[Biologie Moléculaire] Dilution PCR

Après le souci de la suspension des oligo que j'ai, heureusement, finalement compris je n'arrive pas à trouver la quantité de l'enzyme (herculase pour mon proto) à mettre dans mon mix de 50ul. si la concentration de l'enzyme est de 5U/ul et qu'il me faut 5U pour mon volume total de 50ul je dois mettre 250ul.  [...] si la concentration de l'enzyme est de 5U/ul et qu'il me faut 5U pour mon volume total de 50ul je dois mettre 250ul. à quoi correspondent les 250U d'enzyme en volume (ul) c'est dire combien de ul je dois prendre avec la pipette.  [...]

[Biochimie] Dosage des sucres

J`ai pese 0.1g d`Arabidopsis, dans un volume total de 50mL (tampon+enzyme). J`obtiens en concentration max 380microgrammes/mL (absorbance de mon echantillon divisee par la pente de la droite etalon). Ensuite, j`ai multiplie cette concentration par 50 (dilution au 50eme avec les 50mL d`enzyme et tampon), et encore multiplie par 10 (0.  [...] 1g pese). J`arrive donc a une concentration de 0.19 grammes de glucose pour 1g d`Arabidopsis hydrolyse, ce qui me parait enorme (20% en MS).  [...]

[Biochimie] Problème pour un exercice ...

On me demande de tracer la courbe de Lineweaver Burk avec un substrat ( Km=9,5.10^-6 et kcat=3600) pour une quantité d'enzyme de 0.3microgrammes dans un volume réactionnel de 1mL.  [...] Pour moi il te manque le volume réactionnel et la concentration de enzyme dans ce volume (après j'affirme rien).  [...]

[Biochimie] TP hydrolyse de l'amidon

Tu dois calculer la concentration de l'amidon dans ton tube sachant que tu as mis x mL de solution d'amidon à 10 grammes par litre c'est ca.  [...] Oui dans ce cas tu fais C0V0=C1V1 et tu trouveras la quantité d'amidon, et pour V1 tu comptes biensur la volume total, en comptant le volume d'enzyme aussi (mais pas sa concentration si tu n'as pas a la calculer ).  [...]

[Biochimie] enzymologie

De plus le volume réactionnel et de 10mL contenant 0.2mL d'enzyme à une concentration initiale de 10mg/mL et la longueur du trajet optique et de 1cm.  [...] Il est possible de la calculer à partir de l'Activité Enzymatique (micromoles de protuits formés par minutes et par mL de protéines, soit U/mL) déterminée de manière expérimentale et de la concentration en protéine en solution (mg/mL).  [...]

problème d'enzymologie

Il faut que tu commences par réaliser le graphique en double inverse de Lineweaver-Burck (1/v = f(1/[S])) pour tes deux droites avec ou sans inhibiteur, ensuite, tu pourras savoir si ton inhibition est compétitive (les deux droites se croisent sur l'ordonnée) ou non-compétitive (elles se croisent hors de l'ordonnée).   [...] on met dans des tubes differents des concentration croissantes de substrat ( Volume = 9ml) on ajoute 1ml d'enzyme (2mg/ml) le ph est 9.5.pour cela on ajoute a chaque concentration un volume determiné de NAOH (pour maintenir le PH).  [...]

[Biochimie] Activité de la LDH

J'ai fais un TP pour déterminer l'activité de la lactate déshydrogénase. J'ai trouvé une valeur de l'ordre de 10^-9 pour l'activité enzymatique et de l'ordre de 10^-7 pour l'activité spécifique exprimée en katal/mL. Je dois bien evidemment discuter de ces résultats mais je n'ai aucune valeur théorique.  [...] En même temps cette activité dépend de la concentration de l'enzyme ect...sauf que nous n'avons que le volume prélevé pour la manip. Donc qu'en pensez-vous Peut-on tout de même dire quelque chose Sur l'ordre de grandeur qui me paraît bien.  [...]

[Biochimie] Détermination d'une concentration et d'un degré de pureté

On me demande de calculer le degré de pureté de la poudre commerciale en comparant cette valeur de concentration par la concentration théorique.  [...] Je doute beaucoup pour le calcul de la concentration (choix du volume) et notamment comment interpréter le 99.5% car si on regarde bien l'écart de grandeur entre les deux concentrations c'est impossible que la poudre contiennent 99.5% d'enzyme mais est-ce qu'on dit que la poudre est purifiée à 0.5% ou 99.5%.  [...]

[Biochimie] Cinétique biochimique.

Pour cela, j'ai utilisé la formule CaVa = CbVb en sachant que j'ai choisi que V(NaOH) du graphique était le Va de mon calcul (avec Ca pour trouver la concentration de NaOH correspondant au volume Va, Va le volume de NaOH trouvé graphiquement, Cb la concentration de NaOH donnée soit 1mol/L et Vb le volume réactionnel de 10ml) pour ensuite trouver Vi en mol/L/s en divisant Ca par le temps correspondant à Va en seconde.  [...] Pourriez-vous me dire si je suis sur la bonne piste Sachant que la question d'après demande de calculer la concentration initiale en enzyme Ci en mol par litre de milieu réactionnel pour chaque expérience. Pour cette question je pense utiliser le volume de solution enzymatique de l'expérience mais je ne sais pas quel autre facteur utiliser car je suis un peu perdu au milieu de toutes les données.  [...]