• Forum - Tube, Eau, Stérile

[Microbiologie] Question sur un protocole de dilution.

[*] Au bout de 24h ou plus, procéder à la détermination de la concentration de la suspension de bactéries, en préparant des dilutions décimales croissantes allant de 10-1 à 10-8 à l'aide de tube à essai contenant 9 ml d'eau physiologique stérile (1 ml de la suspension mère dans 9 ml d'eau physiologique stérile, homogénéiser puis reprendre 1 ml de cette dilution à 10-1, le verser dans 9 ml d'eau physiologique stérile, homogénéiser, et ainsi de suite jusqu'à la dilution finale 10-8. Rejeter 1 ml de cette dernière dilution ).  [...] C'est peut-être pour donner une habitude pour des futures gammes de dilutions en tube, que tu incubera directement, le même volume de milieu permettra une comparaison plus correcte, comme les dilutions pour déterminer les concentrations en bactéries avec les bouillons VLBL.  [...]

[Microbiologie] isolement des bactéries lactiques

comment isolé des bactérie lactique a partir de lait cru dans le milieu sélective mrs et quelle est la température d'incubation et svp comment faire la pérufication et l'identification des ces bactérie.   [...] Pour une purification, il suffit de suspendre la ou les colonies de votre choix chacune dans un tube d'eau distillée stérile, afin de.  [...]

[Microbiologie] Dilution

il est dit aussi que le liquide de dilution eau peptonée tamponnée stérile remplit des tubes à raison de 9 mL par tube mais si j'ai 5 g que je dois transférée dans 45 mL d'eau peptonée est-ce que la dilution est de 10 -1 également.  [...] C'est pas tout a fait exacte car seul l'eau pure a une densité de 1 (en supposant que tu vois ce qu'est la densité) mais cette l'imprécision n'est pas important pour des valeurs de microbiologie.  [...]

[Microbiologie] congélation de Neisseria gonorrhoeae

Alors j'ai fait à ma manière. toujours sur cryobille, sauf que j'ai d'abord ensemencé un bouillon, fait maison à base de chocolat+PVX et d'eau stérile, avec la souche puis j'ai placé ce bouillon dans le tube contenant les cryobilles à la place du liquide cryoprotecteur.  [...] Le tube a été incubé 24h à 37°C en atmosphère enrichie en CO2. Ensuite il est resté 20min à température ambiante puis 20min au réfrigérateur à 4°C et enfin au congélateur à -20°C. Et de nouveau. la souche n'a pas survécu.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ADN

J'ai posé ma question parce qu' au niveau du protocole que j'ai utilisé aucune information sur la concentration n'a été indiqué.   [...] heureuse de vous avoir encore une fois piwi, je doit peut être mieux m'expliquer. j'ai extrait mon ADN dans un tube à eppendorff, la dernière étape de l'extraction est de dissoudre l'ADN (petit culot)dans 50 ou 100 ul d'eau distillée stérile ou dans du TE.  [...]

[Biologie Moléculaire] pb migration ADNg sur gel

L'extraction se fait à l'aide du TriReagent. Pour le dosage (20µL d'ADN + 980µL d'eau stérile dans la cuve du spectro), j'obtiens des valeurs de DO de 0,105 pour prendre l'exemple sur un tube. Ce qui me donne une concentration de 262,5 µg/mL d'ADN. Or je dépose ensuite dans le puit d'un gel d'agarose 0,8% environ 10µL d'ADN+4µL de bleu de charge.  [...] En ce qui concerne les ARN, dans le labo où je suis on prend mille et une précautions pour arriver à les isoler...(utiliser des tubes et cones stériles, traités à l'eau DEPC puis rincés à l'éthanol puis encore à l'eau, ou un kit de purif d'ARN utilisant du mercaptoéthanol pour inactiver les RNases), précautions que je ne prends pas pour l'ADNg, je pense qu'il y a peu de chances que j'isole de l'ARN total et que ce soit cela que je dose.  [...]

[Microbiologie] L'alcool à 90° est-il plus efficace que la javel contre les bactéries ?

Il y a de l'eau physiologique stérile pour diluer à chaque fois, en plus de 1mL d'E.coli dans tous les tubes et des doses différentes d'alcool à 90° ou d'eau de javel.  [...] On stérilise l'anse puis on ne va étaler qu'une petite zone (ça dépend de la turbidité de la suspension. plus c'est opaque, plus on sera minutieux) de la partie déjà ensemencée sur un cadran supplémentaire ==. le coin/bord le plus éloigné est par principe encore une fois celui où il y a le moins de bactéries.  [...]

sterilisation eau pour cosmetique

Je ne suis pas non plus une experte dans le domaine, mais je pense que tout dépend de l'utilisation que tu veux en faire.Si tu veux conserver tes produits cosmétiques pendant plusieurs jours ou quelques semaines, je rajouterais, en plus de l'eau stérélisée, des conservateurs anti-microbiens qui inhiberont la croissance bactérienne pendant un certain temps.  [...] Je n'aurai besoin que de 50-100 ml d'eau par fab et sa coûtent cher en petit flacon et si j'achète au litre ce ne sera plus steril un fois le flacon ouvers. En petite quantité cela coûtent environs 8-10 euros le litre ou alors est ce que je peux acheter cette eau steril en 5l et un fois ouverte mettre 1% de conservateur Dans ce cas j'aurai combien de temps pour l'utiliser Ou alors connaissez vous un site pas cher ou on peux acheter de l'eau steril en petite quantité.  [...]

transformation e.coli par le plasmide pglo

Or au depart jai ajouté 10microlitre de plasmide pglo dans mon eppendorf ( plasmide pglo lyophilisé 20 micro gramme à reprendre dans 400 microgramme d'eau stérile).  [...] Là tu es donc à 0.05µg/µl (puisque j'ai considéré que tes 400µg d'eau stérile c'est enfaite 400µl d'eau stérile LOL) Et donc si ta fait la transfo classique 10µl plasmide + 40µl cellules alors ta étalé 0.5µg de plasmide. Donc si t'a compté 600 colonies admettons, alors l'efficacité c'est.  [...]

[Biologie Moléculaire] protocole pour rendre des levures compétentes

Je dois écrire un compte rendu de TP dans lequel nous devons indiquer le rôle des solutions (HEPES, DTT, eau stérile froide, sorbitol) utilisés pour rendre des cellules de levures compétentes. j'ai déjà fait pas mal de recherche sur internet, mais je n'ai trouvé que des protocoles semblables au notre mais pas à quoi serve les solutions utilisées. Alors aidez moi.  [...] Centrifugation pour n'avoir que des cellules d'intérêt et pas d'élément solide du milieu (bout de viande/foie...) Les plus grosses structures coulant au fond en premier dans le principe.   [...]