• Forum - Température, Protéines, ADN

[Divers] Intérêts du NaDOC, SS DNA, chelex, Tris Cl dans plusieurs expériences

Je ne connais pas suffisement les protocoles que vous utilisez, cependant l'utilisation de Tris Cl sert milieu tampon. Il permet de conserver un ph régulier durant toutes vos expériences. Ainsi, travaillant avec de l'adn et des protéines, tous deux très semsibles aux changements de ph, vous évitez des dénaturations.  [...] C'est donc en fait la température qui va reverse crosslinker les protéines de l'ADN, le chélex étant là pour protéger l'ADN des nucléases, si j'ai bien compris.  [...]

Extraction de l'ADN

[COLOR= Plum ]Bonjours,je voudrais savroir pour quoi au cours de l'extraction de l'ADN génomique d'Arabidopsis thaliana.aprés broyage du tissu et la mises de la solution de lyse,pour précipitation des protéines,on doit incuber le mélange dans une étuve et pour quoi exactement à 65°C [/COLOR ].  [...] Peut-être est-ce une température suffisante pour dénaturer les protéines partiellement tout en restant inférieur au Tm de ton ADN.  [...]

Extraction ADN phenol : température de centri

Je pratique des extractions d'ADN méthode phénol-chloroforme sur des produits alimentaires (bien gras et bien protéinés. C'est d'ailleurs pour cela que je ne prends pas des systèmes de kits et colonnes).  [...] Mais si quelqu'un pouvais m'éclairer sur le rôle de la température (par exemple sur la séparation d'avec les protéines, mais aussi l'extraction préférentielle de l'ADN vs ARN peut-être) ce serai super.  [...]

[Biologie Moléculaire] Explications rapides sur la PCR

Classiquement, Thermus aquaticus, bactérie des grand fonds. les températures de la PCR sont comprises entre 50 et 95°C. Or à ces températures, les protéines sont souvent sans structures tertiaires donc sans activité. Comme cette bactérie vit près des sources chaudes, ces protéines résistent très bien à ces températures.  [...] A haute température, dénaturation de l'ADN comme des protéines, il y a séparation des 2 brins. On descend la température, processus inverse.  [...]

Dénaturation de l'ADN

Je suppose aussi qu'avec la chaleur, les protéines associées à l'ADN (histones, etc...) sont séparées et dénaturées... un biologiste moléculaire peut confirmer.  [...] Pour ajouter à ce qu'a dit yoyo,, les organismes vivant à ces hautes temperatures ont des protéines particuliérement bien adaptées (notament lié à une richesse en résidus proline qui confére de la rigidité aux protéines) et qui ne se dénaturent pas. L'exemple type est l'ADNpol (Taq polymerase) qu'on utilise pour les PCR.  [...]

le régime alimentaire des insectes et leur biochimie

ces petites bestioles ont une formidable adaptabilité à leur environnement, et ils ont quasiment tout les gènes qui pourrait les aider à surmonter un déficit quelconque dans l'approvisionnement en acide aminés indispensable à leur synthèse des protéines.  [...] ..c'est leur épigénétique qui détermine quel gène s'exprime et quel gène se tait...c'est pas une réponse à ma question, ça car ce que je veux savoir c'est qu'est ce qui contrôle l'acétylation et la méthylation des séquences ADN chez les insectes je sais que c'est l'environnement et ces changements mais comment exactement par exemple le froid provoque l'hibernation chez beaucoup d'animaux dont les insectes, sur quoi la faible température agit existe t il des structures qui font office de thermostat qui lorsque la température est trop basse sécrètes les hormones nécessaires à l'entrée en hibernation, et ces hormones une fois ils arrivent à toutes les cellules de l'insecte provoquent la chute aux niveau d'activité minimale ou chaque cellule a son thermomètre et a une matière protéique au sein de chaque noyau qui est influencée par la température.  [...]

[Biochimie] Conservation ADN à température ambiante

J'ai fait une énorme boulette et ai laissé mon ADN à température ambiante pendant 4jours.  [...] Sachant qu'il ne fait pas très chaud ces derniers jours, je voulais savoir s'il était possible que mon ADN ne soit pas complètement foutu.  [...]

[Biochimie] spectre d'absorption et ADN

soit un ADN naturel mitochondriale de lapin [0.4M], bicaténaire, hélicoïdale, circulaire, comportant 500pb et un ARN naturel d'E.Coli [0.4M] monocaténaire, pseudo-hélicoïdale à 30% comportant 250b.  [...] Du coup si on prend par exemple un pic de 1 pour l'ADN, l'ARN devrait être à 0.5, mais avec l'effet hyperchrome, une partie se retrouve avec +40% donc 0.7. Or tu as 30% de ton ARN enroulé donc à 0.5 et 70% simple brin donc à 0.7. Ce qui donne au final. DO du pic ARN= (30%*0.5)+(70%*0.7)= 0.64.  [...]

[Biologie Cellulaire] Cryoconservation embryonnaire : comment les cellules repartent à la vie ?

Non effectivement c'est bien ça généralement les enzymes du corps humain a une forte température son détruit et a une faible température inactivé c'est pour ça que l'organisme par le thermostat physiologique que l'on possède régule l'homéostasie thermique (Hypothalamus) dans les alentours de 37°C +ou- 0,05 car a un certain moment thermique les réactions métaboliques ne se font plus comme par exemple la mort, la température d'un cadavre est hypothermique ce qui prouve donc qu'il n'y a plus de réaction métabolique car physiologiquement il a été prouvé que le noyau centrale de l'organisme produisait de la chaleur par les réactions métaboliques qui s'y produisait et que cette énergie était libéré de manière thermique.  [...] Il me semble qu'une simple variation de température dans le sens du froid inactive les enzymes qui sont les principales protéines des réactions métaboliques, il suffira par la suite d'augmenter la température pour atteindre une température optimal de fonctionnement des enzymes 37°C pour l'Homme, 41,5°C pour la poule, 39°C pour l'éléphants etc.  [...]

[Microbiologie] Traitements Thermiques pour bactéries

Pour la température tuant les bactéries, il me semble qu'à partir de 60°C, on observe une dénaturation des protéines et à 90°C, une dénaturation de l'ADN ce qui devrait déjà tuer un certain nombre de bactéries. Pour stériliser un aliment, 121°C pendant 20 min (principe de l'autoclave).  [...] - Justement je suis sur ce forum pour que quelqu'un me donne ces fameux barèmes temps/température, pour les principales bactéries que l'on trouve dans le domaine alimentaire. Staph, E.Coli, Clostridium, Bacillus Cereus, Listeria, Salmonelle.  [...]