• Forum - Techniques, Marquage, Coloration, Chromosomes, Bandes

[Génétique] localisation d'un gène sur un chromosome.

Pour reconnaître spécifiquement chaque paire chromosomique, on utilise des techniques de marquage particulières qui permettent d'obtenir une coloration inhomogène des chromosomes par le Giemsa et l'apparition de bandes. C'est la succession de bandes sombres et claires le long d'un chromosome, identique chez tous les individus pour un chromosome donné, qui en permet l'identification précise, selon le mème principe qu'un code à barres.  [...] Dans les deux cas, les bandes ne deviennent visibles qu'après une coloration avec le Giemsa. Ces deux techniques donnent un marquage réciproque, c'est-à-dire que là où l'on obtient une bande sombre avec l'une des deux techniques, on observe une bande claire avec l'autre.  [...]

[Biologie Moléculaire] Isochores G, isochores R

En interphase, l'organisation du génome est relié à la structure des chromosomes dont les différentes régions organisées en bandes peuvent être visualisées au microscope après coloration par le colorant de Giemsa précédée d'une dénaturation de la préparation chromosomique par la chaleur en tampon salin (bandes R et T), ou une enzyme protéolytique comme la trypsine (bandes G et C).  [...] Ces bandes qui peuvent être également visualisées par différentes techniques de coloration mises au point dans las années 1970, forment des systèmes de marquages transversaux spécifiques de chaque chromosome qui sont couramment utilisés en cytogénétique pour établir le caryotype.  [...]

[Biologie Cellulaire] Protéines

A plus grande échelle la structuration et le repliement des protéines membranaires interviennent. A une échelle encore plus grande ces protéines s'organisent dans des domaines spécifiques de la membrane.   [...] Certaines protéines membranaires sont exposées à la surface de chaque cellule d'un individu donné conférant à cette cellule des caractéristiques qui lui sont propres. Ces protéines sont connues sous le nom d'Antigènes d'histocompa*tibilité. On les considère comme des marqueurs cellulaires en ce sens qu'elles dessinent à la surface des cellules des motifs dits antigéniques caractéristiques de chaque individu et, c'est à ce titre, que ces antigènes constituent une véritable carte d'identité chimique de la personne.  [...]

[Biologie Cellulaire] La cellule mystère.... - Page 14

est ce que parfois si vous avez le temps vous pouvez expliquer (avec des mots pas trop technique svp) ce que sont ces cellules et à quoi elles servent, car c'est super interessant mais moins quand on comprend rien.  [...] Sur ce qu'on voit en rouge, je pense que ce sont les bandes A. En vert, je suis perplexe car il semble que le constituant visé soit plus facilement accessible à la coloration aux extrémités de la coupe. Et la coloration verte est répartie de façon assez hétérogène sur le dessus des fibres donc je n'ai aucune idée.  [...]

Bleu de coomassie

On l'utilise généralement pour colorer les protéines dans un gel d'acrylamide. Il y a plein de recettes (meme sur wikipedia) pour préparer une solution de travail qui contient effectivement de l'acide acétique (et de l'ethanol).   [...] Pour décolorer (le gel sans protéines, c'est à dire pour diminuer le bruit de fond) on utilise une solution d'acide acétique ou même de l'eau (moi je passe le gel dans l'eau au micro ondes pour augmenter le contraste).   [...]

[Biologie Cellulaire] problème de marquage cytochimique

je réalise des hybridation in situ avec des sondes ARNm (U-DIG) sur coupe de morceau d'éponges. je révèle le marquage avec des anticorps anti-DIG couplé a une phosphatase alcaline. la coloration se fait avec du NBT/BCIP.  [...] le témoin actine doit marquer partout et de la même manière or voila le marquage suis un gradient de coloration allant du pôle basal de la coupe au pôle apical.  [...]

[Biologie Moléculaire] détermination du type d'électrophorese à sa vue.

Pour le gel 3 est ce que la différence entre les deux correspond à une mauvaise digestion par les enzyme de restriction choisi (n°2).   [...] Pour le gel 2, il faut voir les taille, mais ca me semble pas incompatible avec de l'ARN en méga grosse quantité, ca ressemble à ce qu'on voit quand on expose un gel propre d'ARN trop fort.   [...]

[Biologie Cellulaire] probleme d'immunohistochimie

La technique j'utilise est classique. on place des coupes de tissus, issu de bloc de paraffine, sur des lames après les avoirs coupés au microtome. On enlève la paraffine, on rehydrate, on fait l'antigen retrieval (citrate buffer et chauffage au four a micro-onde), incubation avec l'anticorps primaire, puis avec l'anticorps secondaire biotynilé, puis avec les billes de streptavidine-peroxydase, et enfin la révélation avec le peroxydase substrate kit DAB SK-400 vector lab.  [...] Question stupide. vos marquages fonctionnent ils dans les mains d'un autre expérimentateur L'IHC n'est quoi qu'on en dise, pas encore une technique parfaitement standardisée, certains anticorps ne fonctionnent pas en paraffine (les coupes congelés sont à essayer), tous les antigènes ne sont pas démasqués par le citrate 0.  [...]

Régulation et localisation : les techniques

- la régulation transcriptionnelle d'un promoteur (technique autre que la fusion transcriptionnelle avec un chromogène).  [...] Pour la localisation cellulaire, il existe des techniques de marquage immunologique avec des billes d'or observable au MET.  [...]

[Biologie Cellulaire] CFSE et thymidine tritiée

j'aurai une question concernant 2 techniques d'étude permettant de caractériser la prolifération cellulaire d'une suspension à savoir le marquage à la thymidine tritiée et à la CFSE.  [...] J'aurai souhaité savoir quelles étaient les différences principales de ces 2 techniques hormis le fait que la thymidine tritiée se base sur l'étude de la radioactivité exprimée par les cellules alors que la CFSE, elle, se base sur l'étude de la fluorescence émise.  [...]