• Forum - Tampon, Bain, Mari, Substance, Enzyme

[Biochimie] Utilisation du bain marie dans le dosage des enzymes

Est-ce que je dois placer juste le tampon au bain mari ou je dois placer la dedans aussi la substance que j'ai préparé et qui doit réagire avec l'enzyme.  [...] Je suppose que l'utilisation du bain mari c'est pour donner une température adéquate à la réaction lors de sa provocation dans la cuve du spectrophotomètre. Mais là je pense ceci. le tampon et la substance distinée à régire avec l'enzyme sont conservés à une température de 26C°, Ok MAIS l'homogénat et sur la glace 4C° et au moment du mélange dans la cuve 4C° et 26C° je ne sais pas ce que ça va donner.  [...]

Optimisation d'extraction d'ADN

Donc ceci je connais pas ton kit mais par expérience j'ai remarqué que si tu double tout les temps (temps de centri, temps d'incubation) t'améliore le rendement de purif. Moi même je laisse au moins 10 min pour la première incubation ou l'ADN entre en contact avec la résine (si c'est un kit avec des petite colonne que tu utilise).   [...] 5 ml puis je commence l'extraction par l'ajout de tampon de lyse et la proteinase K, je vortex puis je les incube pendant 15 min dans le bain mari à 56°C... puis j'ajoute RNase et je centifuge, puis l'éthanol et je vortex et je déplace la solution lysée au colonnes de résines je centrifuge 10.  [...]

[Biochimie] dosage enzyme pour quoi utiliser le bain-marie ?

2- Il y a une phrase qui dit qu'il faut mettre les solutions préparées au bain-marie (25 C°). Quel est l'effet de cette température Quelle rôle joue t'elle dans la procédure du dosage.  [...] On met les solutions préparées au bain-marie (25 C°) certainement pour réactiver l'enzyme inactivé par le froid et de ce fait elle redevient active, ce qui permet d'effectué le dosage.  [...]

Immunohistochimie

- Pour démasquer l'antigène. immerger la lame dans du tampon Tris-EDTA buffer, pH 9.0, 0.05% Tween- 20*, et incuber à 95°C dans un bain-marie pendant 30 minut es. (Sinon adapter à votre protocole interne en gardant le pH requis).  [...] Les solutions, maîtriser la fixation (temps notamment...), utiliser des protéases, pour info, la prière n'est pas efficace. Les bruits de fonds viennent ensuite, (avec les anticorps commerciaux on peux espérer l'absence de marquage on spécifique) on peut alors agir sur la concentration en anticorps, le temps d'incubation et les rinçages.   [...]

Mesure de l'activité antioxydante

Un millilitre de l'extrait à différentes concentrations (de 0,007à 2,5mg/ml) est mélangé avec 2,5ml d'une solution tampon phosphate 0,2 M (pH 6,6) et 2,5ml d'unesolution de ferricyanure de potassium K3Fe(CN)6 à 1%.L'ensemble est incubé au bain-marie à 50°C pendant 20 min ensuite, 2.  [...] 700nm contre un blanc semblablement préparé, en remplaçant l'extrait par de l'eau distillée qui permet de calibrer l'appareil (UV-VIS spectrophotomètre). Le contrôle positif est représenté par une solution d'un antioxydant standard. l'acide ascorbique dont l'absorbance a été mesurée dans les mêmes conditions que les échantillons.   [...]

[Biotechnologie] Recherche d'un thème en biotechnologie

Et peut être plus particulièrement sur celui-ci, qui vient de sortir. Exposition alimentaire aux substances chimiques. l'Anses publie les résultats de la deuxième étude de l'alimentation totale.  [...] Et tu as les bisphénol et autres composants des plastiques alimentaires (même problème avec les cosmétiques)...ceux-là même qui, si on les chauffe (micro-onde, bain-marie...) ou s'ils sont en contact avec une substance lipidique, ont la capacité de passer dans l'aliment (ou dans le cosmétique)...et se retrouvent donc dans notre organisme.  [...]

[Divers] Amylosynthétase, Température condition

Après je pense qu ej'ai du avoir une mauvaise réactio pr les autre tubes car on a aps eu assez de temps pour le faire, masi devenait jaune foncé, surtt le dernier, à mon avis je pense que la stimulation de l'enzyme, au niveau de la température agit beaucoup.  [...] Je pense que a froid, il voulait nous montré que les enzymes sont inactives à basse température. Et pour le 3eme tube, que quand on le remettait dans dans de l'eau à 37°C elles retrouvaient leurs propriétés lorsque la tempéture est optimal. Et que l'enzym est dénaturée quand elle est a plus de 40°C.  [...]

[Biologie Moléculaire] Hydrolyse, amidon

bonjour, je suis en 1ere s et j'ai un doute. Est-ce que si on mélange dans un tube de l'amidon et de l'eau distillée pour faire du lait d'amidon peut-il y avoir une Hydrolyse même si je n'ai pas ajouté l'enzyme Puis après si j'effectue le test de fehling(en chauffant au bain marie)peut-il donner positif à la présence.  [...] Hélas ce n'est par une coupure chimique par l'eau. ce sont des enzymes ou des substances agressives (acides, bases... ) qui coupent la molécule, puis c'est la molécule d'eau qui maintient les deux morceaux séparés.  [...]

enzymologie- Liqueur de Fehling

Pour étudier l'activité enzymatique de l'invertase, nous avons réalisé un TP dont l'une des étapes était d'ajouter la solution d'invertase à pH assez acide soit 4.8 sur la liqueur de Fehling au bain- marie. Dés l'obtention d'une coloration jaune franc. nous notons le volume versé ainsi ensuite on trace la courbe 1/v=f(t).  [...] Désolée, voilà.nous avons mis dans un bain marie à 56 degrés 5 tubes à essais contenant chacun du saccharose et du tampon dont le pH=4.8, après quelques minutes nous avons ajouté l'invertase ensuite avons nous sorti un tube après l'autre et bloqué à chaque fois la réaction.  [...]

[Divers] tube Eppendorf-Haute température

Quand on met un tube Eppendorf, qui contient une solution amidon+eau, dans un bain mari à haute température (70 ou 80°C) pendant 30 minutes, est ce que cette haute température à un effet sur le tube Eppendorf.  [...] et est ce que cette température (80°C) ne pourrait pas influencer cette manipulation. mettre une solution amidon + eau dans un tube Eppendorf puis mettre ce tube dans un bain mari pendant 30 minutes à 80°C pour le test de gonflement de l'amidon.  [...]