• Forum - Synthèse, Phase, Solide

proteines sans ribosomes

Bien sûr que ça implique la chimie même avec les ribosomes. Quand je dis chimiquement, j'entends par là artificiellement. Et dans ta question de départ je ne savais pas si tu parlais d'une synthèse par les humains ou par les cellules. Car il y a aussi une synthèse non ribosomique de peptides réalisée par d'autres enzymes.  [...] Bref, en laboratoire, les peptides sont réalisés par assemblage un à un des acides aminés. c'est la synthèse en phase solide (la synthèse peut également se dérouler en phase liquide mais c'est une méthode moins utilisée).  [...]

[Génétique] la PCR

Bien que la synthèse d'oligo soit aussi importante, je la mettrai plus dans le limite technologique que dans limite de connaissances bio, mais je parlais bien du séquençage, car ce qui nous intéresse quand on veut amplifier un gène, ou une partie de génome, c'est déjà de savoir ce qu'on a.  [...] Donc pas de séquençage, pas d'amorces ( mais évidemment pas de synthèse d'amorces... pas d'amorces non plus, mais la c'est vraiment limite technologique qui est de pouvoir faire ce qu'on cherche à faire alors qu'on sait exactement ce qu'on veut faire ).  [...]

[Biologie Moléculaire] purification de l'ARN

on appelle cDNA le brin synthétisé a partir de l'ARNm, artificiellement. Donc on purifie des ARN et ensuite on synthétise les cDNA.  [...] merciii...encore une question est-ce qu'il y a une différence entre la synthèse peptidique en phase solide et la synthèse naturelle d'un peptide au niveau de. l'élongation peptidique, la quantité de peptide obtenue, l'isolement du peptide et l'activité biologique du peptide.  [...]

[Biologie Moléculaire] Comment fabriquer une amorce PCR

eaahhh.. Désolé j'avais mal compris la question. Les amorces sont réalisées par synthèse en phase solide. Le premier nucléotide est fixé covalemment à un support comme tu peux le voir ici, puis les autres sont rajoutés un par un. On utilise le même principe pour synthétiser des peptides.  [...] Admettons que la séquence nucléotidique de la region 500 à 520 soit ATAGCT (je mets moins de nucléotides exprès), dans le sens 5'-3'. Pour avoir une orientation sens, il faut selon moi se placer sur le brin 3'-5' de séquence complémentaire. TATCGA. De ce fait, la polymérase va former un brin orienté 5'-3' de séquence ATAGCT. C'est bien ça.   [...]

Pyroséquençage

2) Oui, ça doit être quelque chose comme ça. Chaque nucléotide est testé l'un après l'autre. Ils sont dégradés par l'apyrase en parallèle de la réaction avec la sulfurylase. Je ne connais pas le fonctionnement précis d'une machine utilisant le pyroséquençage, mais il peut se faire via synthèse en phase solide.  [...] 2) Les nucléotides sont ajoutés un à un, et si le nucléotide ajouté correspond à celui que doit incorporer la polymérase (25% de chance), alors celui-ci devient un nucléoside (qui sera incorporé) et libérera un pyrophosphate (etc. jusqu'à donner de l'oxyluciférine, donnant un signal lumineux).   [...]

proteine

Ils le font par synthèse chimique normalement donc c'est en quelque sorte la même méthode que Merienfield mais appliqué aux oligonucléotides, donc le classique de la synthèse chimique, protection-déprotection. Si tu vas sur le forum de chimie, peut-être quelqu'un pourra te répondre mieux que moi.  [...] Oui c'est exactement ça, c'est à dire comme la synthèse selon Merienfield. Une fois qu'on a compris ce principe, on comprend les autres principes de synthèse d'autres macromolécules. En effet, le fait de greffer le premier nucléotides en premier est très important pour les étapes de purification ultérieures.  [...]

[Biologie Moléculaire] Ribosonde

Eh bien je n'ai jamais étudié la question, mais il y a deux méthodes qui me viennent à l'esprit pour synthétiser des ribosondes. Soit tu fais une transcription in vitro à partir de la séquence d'ADN voulue, soit tu fais de la synthèse en phase solide, utilisée aussi pour faire des sondes ou amorces d'ADN et des peptides.  [...] Ne pas oublier que la réaction de transcription ne synthétise qu'à partir d'un seul des deux brins de l'ADN. Ne pas se tromper de brin si l'on veux utiliser cette sonde pour un Northern blot.  [...]

[Biochimie] Acide Aminé

En fait je suppose qu'ils recherchent l'épitope d'une protéine reconnu par ton IgE. Donc ils synthétisent des peptides de 10 acides aminés ici (c'est bien ça ) qui recouvrent toute la séquence de ta protéine (ou plutôt ici une région de ta protéine vu que ça semble être une étape d'affinage non ).  [...] C'est juste une technique de synthèse de tes peptides en phase solide. C'est à dire qu'ils sont synthétisés acide aminé par acide aminé avec des cycles de protection/déprotection directement sur une membrane de cellulose. Et tout ça est automatisé comme tu peux le voir ici, ce qui permet de tester plein de peptides en même temps.  [...]

[Biochimie] Nickel et congélation ...

Je me demande si, justement, tu ne pourrais pas profiter que ton objet soit si petit pour finir par une étape de gel filtration au lieu d'une phase inverse.  [...] Justement ce peptide en question est le peptide bêta-amyloïde de la maladie d'Alzheimer lol. Nous n'avons pas le matériel pour faire de la synthèse en phase solide. Le but est justement de le produire nous-mêmes pour ne pas avoir à l'acheter. Tant qu'à faire.  [...]

gène et synthèse des enzymes

Pour ta deuxième question, in vivo, c'est par l'étape de traduction que sont synthétisées les protéines grace aux ribosomes et autres chose mais je préfère être généraliste pour ne pas t'embrouiller. In vitro, je peux te dire la synthèse des protéines en phase solide de Merrifield mais même ton prof risque à peine de s'en souvenir de ses vieilles connaissances de fac.  [...] Comment l'information est-elle transférée Grâce à un intermédiaire qui va porter le message du gène vers le lieu de synthèse des protéines. Cette molécule appelée ARN messager (ARN m) est en quelque sorte une copie du gène. Mais, contrairement au gène, elle peut sortir du noyau.  [...]